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1、D-二聚体生理学背景纤维蛋白溶解系统(fibrinolysissystem)是人体最重要的抗凝系统,由4种主要部分组成:纤溶酶原(plasmingen)、纤溶酶原激活剂(plasmingenactivator,如t-PA,u-PA)、纤溶酶(plasmin)、纤溶酶抑制物(plasminactivatorinhibitor,PAI-1,antiplasmin)。当纤维蛋白凝结块(fibrinclot)形成时,在tPA的存在下,纤溶酶原激活转化为纤溶酶,纤维蛋白溶解过程开始,纤溶酶降解纤维蛋白凝结块形成各种可溶片段,形成纤维蛋白产物(FDP),FDP由下列物质:X-寡聚体(X-oligomer)
2、、D-二聚体(D-Dimer)、中间片段(Intermediatefragments)、片段E(FragmentE)组成。其中,X-寡聚体和D-聚体均含D-二聚体单位。人体纤溶系统,它对保持血管壁的正常通透性,维持血液的流动状态和组织修复起着重要作用。D-二聚体血浆中水平增高说明存在继发性纤溶过程,而先生凝血酶,后又有纤溶系活化;并且也反映在血栓形成的局部纤溶酶活性或浓度超过血浆2%。一抗纤溶酶活性或浓度。溶栓治疗是指用药物来活化纤维蛋白溶解系统。一般为投入一种纤溶酶原活化物如尿液酶、链激酶或组织型纤溶酶原活化物(tpA),使大量纤溶酶生成,从而加速已形成血栓的溶解。FDP或D-二聚体生成,则
3、表明达到溶栓效果。纤溶蛋白降解产物中,唯D-二聚体交联碎片可反映血栓形成后的溶栓活性。因此,理论上,D-二聚体的定量检测可定量反映药物的溶栓效果、及可用于诊断、筛选新形成的血栓。但是,到目前为止,商品的D-二聚体检测手段都尚存在一定局限性。其中D-二聚体的胶乳免疫比浊法检测,由于其快速测定、灵敏度高、阴性预报值高,重复性良好,临床医师较多采用。定义D-二聚体是纤维蛋白单体经活化因子XIII交联后,再经纤溶酶水解所产生的一种特异性降解产物,是一个特异性的纤溶过程标记物。D-二聚体来源于纤溶酶溶解的交联纤维蛋白凝块。D-二聚体的形成体内纤维蛋白溶解系统:在纤溶激活酶的作用下溶解纤维蛋白和纤维蛋白原
4、,部分血管内纤维蛋白的沉积和清除已在血管内沉着的微量纤维蛋白。正常人纤溶酶和抑制酶之间保持了动态平衡,使血液循环能正常进行。病理状态下,机体发生凝血时,凝血酶作用于纤维蛋白原,转变为交联纤维蛋白,同时纤溶系统被激活,降解形成各种FDP碎片。r链能把二个含D片断的碎片连接起来形成D-二聚体。D二聚体的升高,表示纤溶活性增强,提示体内存在着频繁的纤维蛋白降解过程。Vr1卜Urril_l;Ifti”Iu厂!:!-nui,_ib:”rfnir正常人纤洛酶系统正常人纤洛酶系统形成示意冬悻内发生擬血DIG深静1*血栓病人纤翳詡抻制系境野溶抑制减牺动鑫平衡关系破坏纤辭?S性增强凝血酶件用于纤维墨白舒幡系统同
5、时被漳活FDPfr片s二葉体丫链交链;讥匸龙交能F维蛋白降解FDP片检测原理标本中的D-二聚体与鼠抗人D-二聚体单克隆抗体包被的胶乳增强颗粒发生抗原抗体反应,生产胶乳颗粒凝集以致浊度上升,通过浊度的变化量来反映D-二聚体得浓度。D-二聚体的临床意义D-二聚体测定是诊断活动性纤溶较好的指标,对血栓形成性疾病如弥漫性血管内凝血(DIC)、深静脉血栓形成、脑血管疾病、肺栓塞、肝脏疾病、恶性肿瘤、外科手术后、急性心梗等疾病均有重要的诊断价值,同时D-二聚体检测还可用于溶栓药物的治疗监测指标。1. 肺栓塞病人D-二聚体水平不同程度升高,用组织纤溶酶及激活物(t-PA)治疗后,D-二聚体迅速升高,可了解病
6、人的纤溶状态,对肝素治疗有指导作用。2. 冠心病血浆D-二聚体和纤维蛋白原在各种类型冠心病及其预后的临床意义.方法:采用全自动血凝仪分别检测42例急性心肌梗死患者急性期和恢复期、30例稳定型心绞痛患者和32例不稳定型心绞痛患者血浆D-二聚体和纤维蛋白原的含量.结果:心肌梗死患者急性期血浆D-二聚体和纤维蛋白原含量明显升高(p0.01);不稳定型心绞痛患者血浆D-二聚体和纤维蛋白原含量明显升高(p0.01);预后差的心肌梗死患者恢复期血浆中D-二聚体和纤维蛋白原的含量明显升高(p0.05).结论:血浆D-二聚体和纤维蛋白原含量对监测冠心病患者血液纤溶和凝血状态,反映病人溶栓治疗情况预测预后有重要
7、意义.3. 妊娠高血压综合症血浆D一二聚体水平明显高于正常晚期妊娠组(P0.01),血浆D一二聚体水平越高,妊娠期高血压病情越重。妊娠期高血压组血清一氧化氮水平明显低于正常晚期妊娠组(P0.01),血清一氧化氨水平与妊娠期高血压严重程度无明。显相关性。结论血浆D一二聚体水平升高、血清一氧化氮水平下降与妊娠期高血压综合征发病有关4恶性肿瘤诊断中的检测D-二聚体的生成或增高反映机体凝血和纤溶系统的激活,表明随着肿瘤病情进展体内高凝状态加重,提示交联纤维蛋白降解增强,有凝血活性亢进和继发纤溶状态,易发生血栓和DIC.恶性肿瘤患者血浆D=T聚体的变化与其疾病的严重程度及预后明显相关,有助于病情的判断与
8、预后估计及治疗,对于抑制肿瘤的生长和转移有一定的意义。5溶栓治疗的监测在溶栓药物的作用下,血栓被迅速溶解,血浆中D-二聚体明显增高。因此,在溶栓过程中用药前、中、后动态检测D-二聚体浓度变化对监测溶栓药物的效果具有较大的临床价值。6外科手术患者对多例术后患者血浆D-二聚体水平的变化进行检测,结果表明术后患者血浆D-二聚体水平均高于正常人,且增高水平明显。其中胸外科大手术高于其他手术,表明术后患者体内有微血栓形成,并有纤溶活性增强。因此,动态观察术后患者D-二聚体水平对患者预后的判定有重要意义。7弥漫性血管内凝血(DIC)D-二聚体测定是诊断DIC的特异性试验之一,通过对DIC患者进行血小板计数
9、、纤维蛋白原定量、FDP和D-二聚体测定,其中仅D-二聚体能反映凝血酶原和纤溶酶的活性;若D-二聚体的含量0.5mg/L,对DIC高危患者具有极高的预报价值。8深静脉血栓(DVT的筛查血浆D-二聚体阴性可排除DVT的可能性。造影证实DVT者D-二聚体100%阳性。可作溶栓治疗和肝素抗凝的用药指导及疗效观察。D-二聚体可反映血栓大小的变化。含量再增高,预示血栓再发生;治疗期间持续较高,血栓大小无变化,说明治疗无效。陈旧性血栓不增高。D-二聚体检测方法对比D-二聚体检测方法有多种,主要有定性或办定量的胶乳凝集法和免疫渗透法以及定量的ELISA法和胶乳增强免疫比浊法。#胶乳凝集法:胶乳凝集法快速、经
10、济、适合单个标本检测。敏感度低是其最大的缺点,且只能定性不能定量,在肉眼结果判断上存在主观差异。自身红细胞凝集法是半定量的自身红细胞凝集试验。优点是采用全标本,省去了离心制备血浆的麻烦,缺点是仍是敏感度低和不能定量。#免疫渗透率金标法。可定量检测D-二聚体,操作简单,适于急诊。但本方法敏感性和阴性预测值(NPV在不同的报告中存在较大的差异。并且厂商和实验室的结果存在较大的差异。#免疫渗透率金标法:可定量检测D-二聚体,操作简单,适用于急诊。但本法敏感性和阴性预测值(NPV在不同的报道中差别较大,并且厂商和实验室的结果存在较大的差异。#酶联免疫吸附试验(ELISA):ELISA法敏感性高,且能定
11、量,但操作繁琐,时间长,因此该法不适合急诊应用,而且对于快速ELISA检测方法而言,各种方法之间的标准化是一个难题。#胶乳增强免疫比浊法:是一种定量全自动胶乳増强免疫比浊法,在全自动血凝仪上是采用了该方法,整个检测过程为仪器自动完成,只需几分钟便可报告准确的定量结果,操作方便成本低,避免人为因素影响。是目前研究最多的检测方法,敏感性很高,与经典的ELISA法有很好的一致性适用机型。本试剂盒适用于基于光电比浊(色)原理的血凝仪及其他仪器。产品优势1. 全自动乳胶增强免疫比浊法目前最先进的检测方法。2. 全自动分析:操作简单,成本低,避免人为因素影响适用于多种全自动生化及凝血分析仪4.即开即用,快
12、速准确,稳定性好。5.采用与其他凝血项目相同点的血浆标本,能和其他凝血检查项目同时检测6.线性范围(根据CA550型自动血凝分析仪)0.5-60ug/ml7.检测速度快,适用于急诊要求纤维蛋白/纤维蛋白降解产物(FDP)定义FDP纤维蛋白原/纤维蛋白降解产物(fibrinogenandfibrindegrdationproducts),是纤维蛋白(原)被纤溶酶降解的产物(X碎片、Y碎片、D碎片、E碎片)的统称。包括纤维蛋白(Fg)、纤维蛋白单体(FM)的产物(FgDPs)和合交联纤维蛋白的产物(FbDPs)。FDP检测是判断纤溶系统活性的筛选试验之一,是诊断DIC敏感和可靠的指标之一。纤维蛋白
13、(原)降解产物(FDP)是纤维蛋白(原)在纤溶酶的作用下被溶解,产生的降解产物的总称,由许多肽段组成。2.FDP和D二聚体的测定【原理】FDP是纤维蛋白原(Fbg)和纤维蛋白(Fb)被纤溶酶降解产物的总称,所以又称总FDR狭义地讲,Fbg的降解产物称为纤维蛋白原降解产物;Fb的降解产物称为纤维蛋白降解产物,本文中的FDP是指总FDP而言。纤维蛋白原是由两组Aa、Bb、丫肽链经双硫基(s-s)的连结而成的糖蛋白,其分子结构为(Aa-Bb-y)2。Fbg有三个大的区段,中央一个区段为N末端,称为E区段,它还带有纤维蛋白肽A和B(FPAFPB);在E区段两侧各有一个D区段,是C末端。在原发性纤溶时,
14、Fbg受纤溶酶的水解,经过中间分解产物X片段和Y片段,最后生成两个D片段(D单体,)和一个E片段。在继发性纤溶时,是Fb被纤溶酶水解。其水解底物是经忸a作用后发生牢固交联后的Fb,先生成YD/DYYY/DXD等中间产物和称做DD/E的复合物,再进一步被纤溶酶分解为DD(D二聚体,)和E片段,即D二聚体是继发性纤溶的标志临床意义本试剂盒用于定量检测血清或血浆中的纤维蛋白/纤维蛋白原降解产物的浓度。FDP是纤溶亢进时产生的纤溶酶的作用下,纤维蛋白或纤维蛋白原被分解后产生的降解产物的总称。血液中的浓度上升可证明有纤溶亢进,在恶性肿瘤、产科疾病、血管病变、DIC(弥漫血管内凝血综合症)等各种疾病中显示
15、高值。尤其是在凝固及纤溶亢进现住所时会引发DIC。因此,FDP检测是DIC诊断及观察治疗过程的重要指标之一。检验原理纤维蛋白(原)降解产物是测定纤维蛋白溶解系统功能的一个试验。FDP测定采用胶乳免疫比浊法原理:样本中的FDP与抗人FDP单克隆抗体胶乳颗粒发生抗原抗体反应,胶乳颗粒凝集引起浊度上升。通过检测浊度的变化量,求得样本中FDP含量。检测方法胶乳增强免疫比浊法:是一种定量全自动胶乳増强免疫比浊法,在全自动血凝仪上是采用了该方法,整个检测过程为仪器自动完成,只需几分钟便可报告准确的定量结果,操作方便成本低,避免人为因素影响。是目前研究最多的检测方法,敏感性很高,与经典的ELISA法有很好的一致性本产品的技术特点1 用于胶乳免疫比浊法,检测速度快,适用于急诊需求。2 全自动分析检测,操作方便,成本低避免人为因素。3 适用于多种全自动生化仪及血凝分析仪,能和其他凝血检查项目同时检测。4 线性检测范围宽(2.5-120ug/ml)减少了稀释标本的要求,更好的帮助临床进行结果的动态监控。5 FDP是多种碎片组成的复合物,使用2种单克隆抗体,可以实现对D碎片的检测,更准确的反映出标本的FDP的总量。