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1、机能学实验设计大纲实验名称:茶多酚对心律失常的保护作用课题来源：自选设计班级:2011级护理本科4班设计人员：龙 慧,7组，设计日期:2013年1月7日指导老师:杨拯基础医学实验教学示范中心2013年1月制一、实验设计的目的意义:实验设计的目的意义，国内外研究现状，存在的问 题，解决问题的思路。目的与意义:心律失常时，运用茶多酚来影响心率，本实验的目的在于研究茶 多酚对心律失常的保护作用，从而进一步使茶多酚更好的运用于临床治疗。国内外研究现状:任何原因引起的心脏激动的起源、频率、节律及激动传导速 度与顺序的异常，都会导致心率失常（或快或慢）。茶多酚是从茶叶中提取的多酚类物质，据目前所知，具有降
2、低血脂、抗动脉粥 样硬化、抗癌、抗突变等多种药理作用，有关文献报道其对心肌损害具有保护作 用，然而，茶多酚对心率的保护作用的研究还不是很全面，茶多酚可通过抑制钙离 子内流而发挥抗心率失常作用。结合本实验的目的，即探讨茶多酚对心率失常的保护作用，利用茶多酚来治疗 心律失常具有重要意义，使其可以更好的应用于临床。存在的问题：目前市场上已有茶多酚类药物，用于治疗疾病，但对于心率失常 的作用的准确性，有待加强。解决问题的思路:本实验通过分别运用乌头碱、氯化钙、氯仿、哇巴因以及结 扎冠脉复灌复制心律失常模型，运用茶多酚进行救治，设计给药组与对照组。参考文献：1杨贤强，王岳飞茶多酚化学【M】.上海.上海科
3、学技术出版社2003.1-72黄健，茶多酚对异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚的保护作用，今日药学-2012年10期3唐莉，期前收缩临床分型证治，中国健康月刊:B-2011年3期4叶建文，浅谈抗心律失常药物的临床应用，中国医药指南-2011年9期5谭建国杨旭东，心律失常的中医治疗，中医临床研究-2010年13期6覃中琼，药物治疗乌头碱导致恶性室性心律失常30例疗效观察，中国医 药导报-2006年20期7付志材 魏学兰，与抗心律失常药物配伍应用易诱发心 率失常的药物研究，中国医药导报-2006年23期二、实验设计方案（实验设计目标,拟解决的主要问题，实验动物设计，实验专 业设计，实验统计设计,实验方法设
4、计，可行性分析，预期结果，实验设计工作时间 安排）。（一）实验设计目标，拟解决的关键问题设计目标:探讨茶多酚对心律失常的保护作用，从而研究茶多酚具体对什么类 型的心律失常具有治疗作用。拟解决的关键问题:实验模型的制备。对试验性心律失常的模型进行分组与实 验结果分析。（二）实验设计1、实验动物设计我们选用大鼠作为实验动物，有以下几点理由：1）、大鼠易得到，容易饲养，在科研工作中被广泛利用。2）、大鼠体型大小合适，易于观察。3) 、适用于复制快速性心律失常模型。2、实验专业设计选用大鼠作为实验动物，分别给予乌头碱、氯化钙、氯仿、哇巴因以及结扎冠 脉复灌，然后给予茶多酚进行解救，观察对实验性心律失常
5、的作用，记录每组中的 死亡数和生存数，心电图数据，室颤发生率等。3、实验统计设计实验统计设计中应始终贯彻随机、对照、重复三大原则。(1) 随机:选正常成年健康重相近的大鼠100只，雌雄兼有，将100只大鼠按体 重由小变大编号后，从随机数字表中查取随机数字，依次抄录于大鼠编号下。具体 方法:动物编号为1100号，运用计算机产生随机数，把100只大鼠随机分成5 组，每组20只大鼠;再把每组中的20只大鼠运用随机数分组，分为给药组(10只) 和对照组(10 只)，分别为 A 组(1,2,3,4,5,6,7,8,9,10，1，2,3,4,5,6,7,8,9,10 前10只为给药组(A1)，后10只为对
6、照组(A2);B组(1,2,3,4,5,6,7,8,9,1010前10只为给药组(B1)，后10只为对照组(B2);以 此类推，分为A、B、C、D、E组(2) 对照:本组实验做了给药组和对照组对照，在前面的专业设计里已经提及。(3) 重复:本实验采用的是每实验小组有20只大鼠，具有一定的重复性。(4) 统计数据收集:本实验搜集计量资料，初步确定对各组实验数据的比较分为 实验值和基础值比较。实验数据收集记录A组(对氯化钙诱发大鼠室颤的作用)编组实验前的试验后的是否存活率(%)心率(次/min)心率(次/min)存活A1A2基础值比较B组（对氯仿诱发大鼠室颤的作用）编组实验前的试验后的是否存活率（
7、%）心率（次/min）心率（次/min）存活B1B2基础值比较以此类推，C（对乌头碱诱发大鼠心率失常的作用），D（对哇巴因诱发大鼠心率失 常的作用），E（对结扎冠脉复灌诱发大鼠心率失常的作用）组记录同样的数据。表15组茶多酚对实验性心率失常的作用比较组别对照组的给药（茶多酚）组的茶多酚对心率失常存活率（%）存活率（%）是否有作用A组B组C组D组E组实验值比较（5）统计数据分析本实验采用计量资料来测定各种指标的数值，所有数据均采用平均数?标准差 （?s）表示，五组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析，组间两两比较行q检 验，如B1、B2组模型心率行两样本比较t检验，均以0.05作为显著性检验水
8、准。 实验数据记录如B组。五组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析，如各组心率总体均值的比 较，其方法如下：(1) 建立检验假设H0:,1=(各组心率总体均值相等)。，2,3H1:,1、(不等或全不等)，a,0.05。,2,3(2) 计算统计量利用统计学专业软件SPSS做One-way ANOVA。(3 )查F值表，确定P值，得出结论。A、B、C、D、E组每个组模型心率两样本比较t检验，如A1与A2组之间模型 心率的比较，其方法如下：(1) 建立检验假设H0: = (两组心率模型形成总体均值相等)。,1,2H1:、不等，a,0.05。,1,2(2) 计算统计量X=(X1+X2+X3+Xn)/
9、n呻？(Xi-X)2/(n-1) t=(x-u)/Sx(3 )查t值表，确定P值，得出结论。4、实验方法设计实验技术路线获取大鼠(1)复制心律失常模型与解救：1) A组运用氯化钙，给药组用茶多酚解救，对照组用生理盐水，分别记录心率 和存活率;2) B组运用氯仿，给药组用茶多酚解救，对照组用生理盐水，分别记录心率和 存活率；3) C组运用乌头碱，给药组用茶多酚解救，对照组用生理盐水，分别记录心率 和存活率；4) D组运用哇巴因，给药组用茶多酚解救，对照组用生理盐水，分别记录心率 和存活率；5) E组运用结扎冠脉复灌，给药组用茶多酚解救，对照组用生理盐水，分别记 录心率和存活率。实验技术方法(1)
10、 随机抽样:随机100只正常的大鼠，并分别编号，再随机平分成五组，并称 重。(2) 实验分组:实验室共10组同学，1、2组做A组实验，3、4组做B组实验，5、6组做C组实验,7、8组做D组实验,9、10组做E组实验。(3) 实验手术:各组同时领取大鼠，称重。(4) 模型复制:根据各组的模型复制药物的不同，分别给予不同的药物。A组10%氯化钙130mg/kg,B组取1.5g脱脂棉，浸含氯仿8ml(每换一鼠加氯仿1.0ml),C 组滴注乌头碱10毫克每千克每分钟，直至引发心律失常，D组恒速输入哇巴因50 毫克每千克每分钟，直至心率失常;E组将冠脉左前降支结扎，造成心肌缺血， 5min后剪断结扎线，
11、使冠脉重新得到血液灌注。（5）处理措施:模型复制后，向给药组注入茶多酚10mg/kg分别观察心率，存活 数。（三）可行性分析：1、大鼠易得到，容易侍养，在科研工作中被广泛利用。2、操作比较简单。3、手术器材和设备均为实验室常用，手术方法我们也相对熟练。（四）预期效果：1、茶多酚对心律失常具有保护作用2、为临床上进一步研制有关茶多酚对心率失常的治疗提供可靠依据。（五）实验设计工作时间安排：1、共计1D完成药物的配制与仪器设备的准备；2、共计0.5D完成实验动物模型制备和处理；3、共计0.5D完成材料重量分析；4、总共实验在2D完成。三、完成实验的条件1、仪器设备情况:本实验采用机能实验室常用设备，具体如下:BL-420生物机 能试验系统、注射器、脱脂棉、烧杯、手术器械。2、实验动物情况:健康的大鼠100只。3、药品试剂:本实验采用茶多酚、生理盐水、乌头碱、氯化钙、氯仿、哇巴 因。教研室评审意见1、实验设计是否合理，可否达到预期目标2、实验设计和技术路线安排是否恰当3、实验条件是否具备实验技术教研室年月曰
