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1、2022年高一生物生物技术实践的复习该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因。细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程叫做细胞分化。植物组织培养过程：离体的植物组织或细胞，在培养一段时间后，通过细胞分裂形成愈伤组织，其特点是细胞排列疏松而无规则，是一种高度液汽化呈无定形状态的薄壁细胞。这种由高度分化的植物组织细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。愈伤组织重新分化成根芽等器官，这个过程叫再分化。植物组织培养的条件：植物的组织或细胞离体状态时，在一定的营养物质、激素和其它外界条件（温度、湿度、pH、光照等）
2、的作用下就可能表现出全能性，发育成完整植株。离体的植物组织或细胞叫做外质体。2.影响植物组织培养的因素不同植物组织或同一植物组织的不同部分，培养的难易程度不同，菊花的组织培养，一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝。植物组织培养需要适宜的培养基，常用的是MS培养基，在配制好的培养基中，常常添加生长素和细胞分裂素两种激素，菊花茎段的培养比较容易，一般不用添加植物激素。植物激素：生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，使用的先后顺序以及比例等都会影响植物细胞发展方向。其他因素：pH、温度、光照等条件也影响植物组织的培养。3.植物组织培养实验操作制备MS固体培养基可分为配制各种
3、母液和配制培养基及灭菌，灭菌的方法是高压蒸汽灭菌。外植体要先用70酒精消毒，再用0.1氯化汞消毒，最后用无菌水清洗。接种时要始终在点燃的酒精灯旁进行，对接种工具要火焰灼烧灭菌。一般地讲，容易进行组织培养的植物，往往是容易进行无性繁殖的植物。植物组织培养技术有广泛的应用，和普通繁殖方式相比具有很多的优点。例如：实现优良品种的快速繁殖；实现培养脱毒植株；培养细胞产品；培养人工种子；以及转基因植物的培育等等。4.被子植物的花粉发育花粉的形成：花粉是由花粉母细胞经过减数分裂形成的，是单倍体的生殖细胞花粉粒形成精子还要经过有丝分裂过程。花粉的发育：被子植物的花粉发育要经过四分体时期、单核期、双核期三个阶
4、段，其中单核期又分为单核居中期和单核靠边期两个时期，双核期包括花粉管细胞核和生殖细胞核两个核。5.产生花粉植株的两条途径：通过花粉培养法产生植株的两条途径：一种是花粉通过胚状体阶段培养成植株；另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。通过花药培养产生的花粉植株的两条途径并没有绝对的界线，主要是取决于培养基中激素的种类及其浓度比。6.花药离体培养实验确定花粉发育时期的最常用方法是醋酸洋红法和焙花青铬矾法，后种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。对获取的材料要选用70洒精浸泡，再用0.1氯化汞消毒，最后用无菌水冲洗35次。花药培养的第一步成功的标志是接种的花药长出愈伤组织或释放胚状
5、体，下一步将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株。花药培养形成幼苗前不需要光，形成幼苗后需要光。单倍体育种的优点：后代都是纯合体，自交产生的后代不会产生性状分离，明显地缩短了育种周期，另外为新品种的培育开辟了新途径。影响花药培养的因素诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低，受多种因素影响，其中材料的选择与培养基的组成是主要的影响因素。最适宜的花药发育时期会因植物的种类不同而不同，但对大多数植物而言，适宜进行花粉培养的时期是单核居中期或单核靠边期。在花药培养中，要使所选材料的发育时期完全一致是很困难的，不同花序在不同时期的进程中不同，即使是同一花序上，不同花朵
6、也有很大的差异。7.提取生物大分子的基本思路：选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学的生物大分子。概念：就是利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学方面的差异，提取DNA，去除其它成分。方法：DNA和蛋白质等其它成分在不同浓度的氯化钠溶液中溶解度不同。利用这一特点选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离的目的。DNA不溶于酒精，但是细胞中的某些蛋白质则溶于此溶液。蛋白酶能水解蛋白质，但对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受6080OC的高温。而DNA在80OC以上才会变性。洗涤剂能瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。8.DNA的鉴定在沸水浴的条件下，D
7、NA遇二苯胺会染成蓝色。9.DNA粗提取的实验设计选取实验材料选用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大。破碎细胞获取 DNA的滤液动物细胞的破碎较易，例如，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水同时用玻璃棒搅拌，过滤后收取滤液即可。如是植物细胞需要先用洗涤剂溶解细胞膜。去除滤液中的杂质常用的方案利用DNA在不同NaCL溶液中的溶解度不同，通过溶解过滤析出再溶解去除杂质。DNA的析出与鉴定DNA的析出用的是与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液。静置一段时间，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提出的DNA鉴定DNA时在试管中先加人物质的量浓度为2mol/l的NaCl溶液5mL。两支试管中其中一支加人
8、DNA丝状物，然后各加入二苯胺4mL。在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。10. PCR原理体外进行DNA复制的各种组成成分有解旋酶、DNA母链、四种脱氧核甘酸、DNA聚合酶、引物)DNA的两条链是反向平行的，为了明确地表示DNA的方向通常将DNA的羟基（OH）末端称为3端，而磷酸基团的末端称为5端。DNA合成的方向：DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从3端延伸DNA链。DNA复制需要引物：当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的3端开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的5端向3端延伸。变性：双链的解开是进行DNA复制的前提，在80100OC的
9、温度范内，DNA的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为变性。当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链。PCR利用了DNA的热度性原理通过控制温度来控制双链的解聚与结合。DNA聚合酶 科学家从水生耐热细菌Taq中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶，它的应用，解决了高温导致DNA聚合酶失活的问题促成PCR的自动化。 综上所述，PCR反应需要在一定的缓冲液中提供DNA模板，分别与两条模板链结合的两种引物，四种脱氧核甘酸，耐热的DNA聚合酶，同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。11.植物芳香油是天然香料的主要来源之一，主要包括萜类化合物及其衍生物，具有很强的挥发性。植物芳香油的提取方法：水热气蒸馏法：利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后混合物重新分出油层和水层据原料放置位置，又可分为水中蒸馏、水上蒸馏、水气蒸馏。如玫瑰精油、薄荷油、肉桂油、熏衣草油、檀香油等压榨法：利用机械压力榨出芳香油如橘子油、柠檬油、甜橙油等的提取。萃取法：利用植物芳香油易溶于有机溶剂的特点提取芳香油，不适于水蒸气蒸馏的原料可用此法。
