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1、放射免疫分析法原理及操作注意事项【关键词】 带状疱疹；虹膜炎；放射免疫分析关键词 带状疱疹；虹膜炎；放射免疫分析放射免疫分析的原理1：就是利用放射性核素标记抗原或抗体，然后与被测的抗体或抗原结合，形成抗原抗体复合物的原理来进行分析的。它又分为两种方法。1竞争性RIA，又称传统RIA主要特点：标记的是抗原。其原理：未知抗原Ag+标记抗原Ag*+已知定量抗体Ab 标记抗原与抗体复合物Ag*Ab+未知抗原与抗体复合物AgAb+游离标记抗原Ag*(去除)(未知抗原多，标记抗原与定量抗体结合的复合物就少，表现为负相关)。临床上甲胎蛋白，2微球蛋白，人绒毛膜促性腺激素亚单位(HCG)等的检测都是竞争性RI
2、A法原理。竞争性RIA法，根据加样顺序与温育次数的区别，反应方式分三种：平衡法，将非标记抗原(被测物与标准品)、抗体、标记抗原依次加入反应管，混匀后一次性温育至反应达到动态平衡，再加分离剂分离B(复合物)与F(游离物)如：AFP，2MG，Fer；顺序加样法，先将非标记抗原(被测物与标准品)，与抗体在反应管内作第一次温育，待反应达到动态平衡后。加入标记抗原，再作第二次温育后，分离B与F如：CEA；急诊检测法：为临床急需检测结果而提出的反应方式，不等RIA反应达到动态平衡就终止反应；分离剂的选择有，PEG(聚乙二醇)，第二抗体等。现在一般采用的是：第二抗体与PEG合用的方法，称为双抗体PEG法。PEG原理：PEG浓度达到7%9%时能使抗原抗体复合物沉淀。优点：经济，简便，通用。缺点：重复性差，非特异性结合率高。第二抗体：第一抗体是可与被测抗原进行特异结合的抗体，来自家兔或豚鼠。用第一抗体为抗原，作用到羊，马身上，产生的抗第一抗体的抗体称第二抗体。第二抗体与第一抗体在适当条件下发生特异性结合，生成分子量很大的免疫复合物(AgAb1Ab2)，能自然沉淀。优点：分离效果好。非特异性结合率低。缺点：增加经费投入。需要第二次温育，延长了时间。所以就产生了两者合用的双抗体PEG法,它结合了上述两种方法的优点。1程绍钧,余裕民.检验核医学M.重庆：重庆大学出版社，2003：6275.
