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1、附件 : 食品中对位红的检测高效液相色谱法（初步方案）（北京出入境检验检疫局食品安全检测中心提供）应用范围本方法涉及以辣椒为主要或配料成分的食品和以番茄原料为基质的食品中违禁着色剂对位红的检测。定义对位红又称对硝基苯胺红， 是一种工业用偶氮染料， 不溶于水易溶于有机溶剂， 不允许在食品中使用。方法要点对位红染料经乙腈超声提取后， 过滤，滤液用反相高效液相色谱仪进行色谱分析。 以波长可变的紫外可见检测器定性和定量。试剂与标准品除有特殊指明外，本方法中涉及试剂均为分析纯，实验用水均为超纯水。试剂与标准品名称规格级别乙腈瓶级二氯甲烷瓶级冰醋酸瓶分析纯对位红标准溶液标准贮备液称取对位红（按产品标明的纯
2、度折算成纯着成剂），用乙腈溶解并定容至容量瓶。标准工作液分别取上述标准贮备液 、 、和 溶液移入容量瓶中以乙腈定容，此时溶液中对位红的浓度分别为和。6仪器与设备前处理仪器与设备分析仪器与设备万分之一天平具塞比色管配有紫外可见检测器及自电子天平烧杯动进样器的反向打浆机容量瓶超声波震荡提取仪 滤膜色谱柱. 一次性注射器漩涡振荡器样品处理方法甜椒或红辣椒粉称取 (准确至)样品于具塞比色管中，用乙腈定容至并摇匀。粉状调味品称取（准确至）样品于具塞比色管中，用乙腈定容至并摇匀。调味辣椒酱、原味辣椒酱、辣椒油等称取（准确至）样品于具塞比色管中，用乙腈定容至并摇匀。以番茄原料为基质的番茄酱和番茄沙司称取（准
3、确至）样品于具塞比色管中，用乙腈定容至并摇匀。提取将称量好的样品在超声波提取仪中充分超声提取分钟，并不时摇匀。上样用一次性注射器抽取一定体积的提取液，将提取液过 有机系滤膜至进样瓶中，拧紧瓶盖，1 / 2在漩涡振荡器上振荡秒，使溶液充分混匀，待测。色谱分析高效液相色谱测定流动相流动相：乙酸溶液流动相：乙腈梯度洗脱程序时间（）流动相流动相梯度曲线线性线性线性线性线性流速：进样量： 检测波长紫外可见检测器或二极管阵列检测器，检测。色谱柱色谱柱 柱温：室温注：待基线稳定后开始进样，两次进样间隙时间为分钟结果计算标准曲线用点标准工作溶液的测定值绘制标准曲线，标准溶液浓度在 范围内呈良好线性。 （）样品结果计算对位红含量按以下公式计算：单位：样品中待测组分的浓度，单位：检测样品取样量（）样品溶液体积（）样品溶液的稀释倍数注意事项对位红与苏丹类染料化学结构和性质相类似，使用该色谱条件出峰时间约为分钟。使用该方法可同时检测苏丹橙、苏丹、 苏丹、 苏丹、 苏丹、 苏丹红、 胭脂树橙等。2 / 2
