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1、草莓轻型黄边病毒脱毒技术研究草莓（fragariaananassa Duch.）是我国传统的名优果品之一。以其风味浓郁，富含多种营养成分及维生素等优良的经济性状而受到国内外消费者的青睐。草莓在世界许多国家都有分布，我国的草莓生产发展迅速，栽培面积不断扩大。但是草莓的病毒病却严重影响着草莓的优质丰产，致使草莓产量降低和品质变劣。目前，草莓植株体内已经发现62种病毒，其中危害大，分布广，造成损失严重的主要有草莓斑驳病毒（strawberry mottle virus）、草莓镶脉病毒（Strawberry vein banding virus）、草莓皱缩病毒（Strawberry crinkle v
2、irus）、草莓轻型黄边病毒（Strawberry mild yellow edge virus）。我国的主栽区均存在上述四种病毒。因此，进行草莓轻型黄边病毒脱除的研究具有非常重要的意义。本研究以草莓丰香、幸香、公四莓2号为试验材料，分别采用单纯茎尖培养脱毒、热处理脱毒、药剂处理脱毒来研究其脱毒方法和脱毒率。试验结果如下： 1分别采用草莓丰香、幸香、公四莓2号的匍匐茎茎尖为外植体，以MS培养基为草莓组织培养的基本培养基，共设立四种诱导产生不定芽的培养基，A4培养基中BA浓度为0，设为对照；共设立了三种增殖培养基，B3培养基中BA浓度为0，设为对照。研究结果表明，BA在草莓的分化和增殖中是必不可
3、少的。公四莓2号和丰香的最佳诱导分化培养基为MS+BA0.5mg.L-1+NAA0.1mg.L-1，幸香的最佳诱导分化培养基为MS+BA1.0mg.L-1+NAA0.1mg.L-1。公四莓2号和丰香的最佳增殖培养基为MS+BA0.5mg.L-1+NAA0.1mg.L-1+GA30.1mg.L-1，幸香的最佳增殖培养基为MS+BA1.0mg.L-1+NAA0.1mg.L-1+GA30.1mg.L-1。 2对带毒的试管苗分别进行逐步升温、恒温、变温三种处理，处理期均为21d。逐步升温热处理首次应用于草莓轻型黄边病毒的脱除上。在逐步升温过程中，草莓试管苗的存活率最高，丰香小苗的存活率为73.31，公
4、四莓2号的小苗存活率为57.50；而且在三种热处理条件下丰香的存活率均高于公四莓2号。本研究初步认 为，逐步升温热处理是草萄试管苗热处理脱毒的最佳方法。 3在本次研究中，也首次将西药三氮哩核苦应用于草萄轻型黄边病毒的脱除上。试验中，将三氮哇核昔设四个浓度添加到诱导培养基上，随着三氮哇核昔浓度的加大，茎尖成活率和分化增殖率分别降至20乃和173倍。在lttigL0 mgL”的三 氮哇核昔处理浓度下，草萄幸香的茎尖成活率大于40，茎尖分化增殖率大于3，能保持 一定的茎尖成活率和茎尖分化增殖率。 4用酶联免疫吸附鉴定法（ELISA）对各种脱毒处理后的试管苗进行病毒的检测， 以草萄轻型黄边病毒的抗血清为抗体。检测结果表明，单纯茎尖培养脱毒效果不理 想，丰香和幸香的带毒率很高，公四萄2号有50的脱毒率；逐步升温热处理的效果 最好，丰香和公四萄 2号处理 21d后，100脱除草萄轻型黄边病毒；幸香试管苗在 20 mgL以上的三氮哇核苦的处理下，就能100脱除草萄轻型黄边病毒。茎尖培养 脱毒后，必须经过病毒鉴定，方能用于生产。
