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1、细菌样品冷冻干燥制样方法) 取样:取大量样品离心(转速 300r4000r),去除上清液,加入适当PH(7.27.4)的01 M PBS清洗三遍;清洗时菌体温柔悬浮。2) 固定:.%戊二醛固定h(此步时间非绝对,112h都可),用PBS清洗两遍,每遍10min。再用纯水清洗两遍。3) 梯度脱水: 用乙醇的水溶液按0、50%、7%、80、%的浓度梯度对样品进行脱水,每步15m,之后在0乙醇的水溶液中脱水 1 次;再将样品置于乙醇和叔丁醇1:1混合液中15n;最后置样品于叔丁醇中i2次。(此步也可以尝试不做)4) 冷冻干燥:滴加处理好的样品于5*5 m的盖玻片上,置度冰箱冷冻后放入冷冻干燥机中进行
2、冷冻干燥。) 电镜观察: 样品充分干燥后,进行扫描电镜观察。2.5%戊二醛:Stp1:0.2M磷酸缓冲液的配制:(0.M的就是稀释2倍)取50m定容10mL-磷酸二氢钠(Na2PO4.O) 2.6克 磷酸氢二钠 (Na2HPO.1H2O) 29克 双蒸馏水 加至50毫升H调至7.4Step:戊二醛固定液的配制:- 5%戊二醛 1ml双蒸馏水 ml 02ol/L磷酸缓冲液5 戊二醛最终浓度 2.5%pH值7.3-7.4 内容总结(1)细菌样品冷冻干燥制样方法1) 取样:取大量样品离心(转速 3000r),去除上清液,加入适当 H(274)的0.1 MP清洗三遍()再将样品置于乙醇和叔丁醇 :1混合液中15in(3)最后置样品于叔丁醇中 15mi2次