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1、血清中胆红素的测定注意事项：病人准备：病人准备除了特殊检验有专门规处定外，一般需求病人处于安静状态，生活饮食处于日常状态，目前已公认过度空腹、饮食、饮酒、吸烟、及姿势体味等可影响某些检验结果，现分述如下：1、 运动：肌肉活动的影响可分短暂性的持续性的两类，短暂性影响为血浆脂肪酸含量，可因运动而暂时减少，而后渐渐增加而恢复。丙氨酸可因运动暂时增加达180%,受到持续性影响主要是一些与肌肉有关的酶，如肌酸激酶，乳酸脱氢酶等，据称一场60min的手球训练赛后11h,肌酸激酶活性比赛前仍增加达125%，长期坚持体育锻炼还会提高性激素水平，因此采血前亦安静，不宜过大的活动。2、 食物：进餐后血浆脂肪、蛋
2、白质、糖类有所增加。有人研究于高脂餐24 h采血多数人碱性磷酸酶含量增高，主要来自肠源性同工酶，且与血型有密切关系，O型或B型兼为le+分泌型者增高更明显。一般认为高蛋白质餐使血浆尿素增加，但不影响肌酐含量，高比列不饱和脂，酯酸食物，可降低胆固醇含量，可引起粪隐血假阳性。故在做相应检验时，应对食物有一定的控制。3、 过度空腹：一般血液生化检验要求病人晚餐后禁食，至次日晨采血，空腹约812h ，但过度空腹，某些检验含有异常结果。例如血清胆红素可因空腹48h而增加240%；血糖可因空腹过长而减少为低血糖；血脂空腹过度，甘油三酯，游离脂肪酸有增加，故空腹并非越长越好。4、 饮酒：饮酒后使血浆乳酸、尿
3、酸盐增加。长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高，平均红细胞体积增加，甚至可以将这项作为嗜酒者的筛选检查。5、 吸烟：瘾烟者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%，而不吸烟者含量在1%以下。血液学方面亦有变化，白细胞数增加，嗜酸粒细胞减少，中性粒细胞及单核细胞增多，血红蛋白偏高，平均红细胞体积偏高。6、 药物：药物对检验的影响非常复杂，15000多种药物对检验有干扰作用。众所周知，抗生素、磺胺类药物，对肝功能有大小不一的影响，甚至几片常用药物可以引起严重的药物反应，故在采样检查之前，暂停各种药物是为上策，如不可停用，则应了解可能对检验结果产生的影响。7、 体位：体位影响血液循环，由于血浆和组织间液因体位不
4、同而平衡改变，则细胞成分和大分子物质的改变较为明显，例如由卧位改为站位，血浆白蛋白可因此而浓度增大，总蛋白、酶、钙、胆红素、胆固醇及甘油三酯等亦因站位而浓度增加；比容、红细胞计数亦于站位时增加。8、 其他：病人准备还应考虑病人的生物钟规律，因此复查以在大体相同的时间采样为好。采血时止血带结扎过久也是一种误差因素，如以结扎1min的样品结果为基数，则结扎3 min，可使血浆总蛋白增加5%胆固醇增加5%，铁增加6%,胆红素增加8%。学期和ph值测定的血液以动脉血为原则，切不可漏气。细菌培养的样品需采用无菌技术，防止污染。9、 注意事项：（1）在1037范围内，重氮法不受环境温度影响呈色在两小时内稳
5、定。 （2）严重溶血时，可导致测定结果偏低。 （3）血脂可影响测定结果，故应尽量取空腹血。 （4）胆红素对光敏感，胆红素标准液及血清样本均应避光。一、胆红素氧化酶法的原理：胆红素氧化酶（BOD）催化胆红素氧化，生成胆绿素，后者一步氧化生成淡紫色化合物，在450nm波长比色，吸光度的下降值（A）与血清胆红素浓度呈正比。二、重氮法的原理：血清中结合胆红素可直接与重氮试剂产生偶氮胆红素，所以称为直胆，又称1min胆红素测定，非结合胆红素测定时需以咖啡因、苯甲酸钠为加速剂破坏胆红素氢键再与重氮试剂反应，抗坏血酸破坏剩余重氮试剂，加入碱性酒石酸钠使最大吸光度由530nm转到598nm，非胆红素的黄色素及其它红色与棕色色素产生的吸光度将之可忽略不计，使灵敏度和特异性升高，最后形成的绿色是由蓝色的碱性偶氮胆红素和咖啡因与对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素混合而成。三、钒酸氧化法的测定原理:在PH3附近,表面活性剂和钒酸作用于血清TBi1,使之氧化成胆绿素，使胆红素所特有的黄色减少，由此测定钒酸作用前后450nm吸光度的变化求出血清中TBi1的浓度。在PH3附近，当试剂中缺少表面活性剂时，钒酸只与血清中结合胆红素作用，使之氧化成胆绿素，此时测定450nm吸光度下降值求出血清中TBi1的浓度。
