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1、 白婧婧：酸枣仁总皂苷萃取工艺优化本科毕业论文 题 目 酸枣仁总皂苷萃取工艺优化 学 院 食品科学与工程学院 专 业 生物工程专业 毕业届别 2014 届 姓 名 白婧婧 指导教师 刘昕 职 称 高级实验师 甘肃农业大学教务处制二一 四 年 五 月2 目 录摘要1关键词1Abstract1Key words 1前言21实验材料及方法31.1实验材料 31.2实验方法 31.2.1纯化步骤31.2.2对照品溶液的制备31.2.3测定波长的选择31.2.4标准曲线的绘制31.2.5供试品溶液的测定41.2.6单因素试验41.2.7正交试验42结果与分析52.1 正丁醇用量对总皂苷得率的影响52.2
2、萃取温度对总皂苷得率的影响52.3萃取时间对总皂苷得率的影响62.4正交试验结果73讨论74结论8参考文献9致谢10 酸枣仁总皂苷萃取工艺优化 白婧婧（甘肃农业大学食品科学与工程学院生物工程专业，甘肃兰州，730070）摘要:酸枣仁皂苷因其独特的药理活性越来越受到人们的重视，具有广阔的开发应用前景。本文以酸枣仁总皂苷含量为指标，选择正丁醇萃取的料液比、萃取温度、萃取时间为三个考察因素,通过单因素试验，研究各因素对总皂苷得率的影响，采用正交试验，对酸枣仁总皂苷的萃取工艺条件进行优化，旨在提高酸枣仁总皂苷的提取率。实验结果表明，酸枣仁总皂苷萃取的最佳工艺条件是：正丁醇萃取的料液比1:2 、萃取时间
3、40min 、萃取温度40 ，在此条件下，总皂苷的提取率为 87%。关键词：酸枣仁 皂苷 正丁醇 萃取 Optimization of extraction process of total saponins from semen Ziziphi Spinosae BAI Jing-jing（Major in biological engineering the College of College of Food Science and Engineering of Gansu Agriculture University，Lanzhou，730070）Abstract:The total
4、saponins in semen ziziphi spinosae are more and more attention because of its unique pharmacological activity.It has broad development and application prospect.In this paper, the content of total saponins in semen Ziziphi Spinosae as index, the material liquid select n-butanol extraction ratio, extr
5、action temperature, extraction time three factors as factors, The single factor test, effects of various factors on the yield of total saponins.By orthogonal test, extraction conditions of total saponins Jujuboside were optimized to improve the extraction, the extraction rate of total saponins from
6、semen Ziziphi Spinosae n-butanol extraction method.The experimental results show that the optimum conditions for extraction of total saponins from semen Ziziphi Spinosae is:the butanol extraction liquid ratio 1:2, extraction time 40min, extraction temperature 40 ,Under these conditions, the extracti
7、on rate of total saponins was 87%. Through the study of saponins from semen Ziziphi Spinosae, provide support for the theory and method for product development.Key words:Semen Ziziphi Spinosae Saponins Butanol Extraction前言 酸枣仁为鼠李科植物酸枣（Ziziphus jujube Mill）的干燥成熟种子，主产于河北、陕西、辽宁、河南、内蒙古、山东、山西、甘肃、安徽等地。酸枣仁
8、是常用的中药材，其味甘、酸，性平，有养肝，宁心，安神，敛汗功效，可用于失眠等病症的治疗，属于卫生部颁布的第一批药食同源两用品。现代医学研究也表明，酸枣仁还具有镇痛、抗惊厥、降血脂、抗血小板聚集、增强免疫功能、降压、抗缺氧、抗心肌缺血、抗心率失常、抗衰老、抗辐射等作用1。神农本草经将其列为上品，本草纲目将其列为本部类，中药学列为养心安神类药。 酸枣仁主要含三萜皂苷类、黄酮类、生物碱类，此外还含有脂肪油、蛋白质、甾醇及微量具有刺激性的挥发油。酸枣仁皂苷是酸枣仁主要成分之一，其中主要含有酸枣仁皂苷A 、B 。酸枣仁皂苷属于四环三萜类皂苷。其结构式为： 随着社会的发展，失眠已经成为困扰人们生活的重要因
9、素。改善睡眠的研究很多集中在西药如安定等以及褪黑素等方面，虽然具有一定的效果，但长期服用会产生一定的依赖性与副作用。酸枣仁为药食同源的保健食品原料，文献记载具有改善睡眠的作用，将其加工成具有改善睡眠功效的保健食品，不仅食用安全可靠，而且功效显著。所以临床上常用作安神药，治疗各种原因引起的失眠症和神经衰弱2。诸多学者对酸枣仁的有效成分进行研究，认为起镇定安神作用的主要成分是酸枣仁总皂苷3。因此，酸枣仁总皂苷的提取纯化方法和它的改善睡眠的效果一直是人们所关注的问题。本文采用正交试验，旨在用正丁醇萃取法对酸枣仁总皂苷的萃取工艺进行优化，为酸枣仁的进一步开发、利用提供试验数据。1 材料及方法1.1实验
10、材料1.1.1材料来自甘肃本地半干旱地区的野生酸枣仁 、酸枣仁皂苷对照品1.1.2试剂甲醇，正丁醇，香草醛，3%高氯酸，冰醋酸等1.1.3仪器与设备 可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司）、恒温水浴锅、电子天平，索氏抽提器、旋转蒸发仪等1.2 实验方法1.2.1纯化步骤酸枣仁经乙醇浸提后，挥发乙醇并用水溶过滤，取上清液用水饱和正丁醇按照正交表L9(34)安排进行萃取，正丁醇萃取液用正丁醇饱和的水20mL洗涤减压回收正丁醇至干，残渣用甲醇溶解并定容到25mL容量瓶中，摇匀，作为供试品溶液4。1.2.2对照品溶液的制备精密称取酸枣仁皂苷对照品溶液5mg，放在烧杯中，加甲醇溶解，定容至5ml的容量瓶
11、中，摇匀。得到浓度为1mg/ml的对照品储备液5。1.2.3测定波长的选择取对照品溶液0.5ml，加在具塞试管中，在70水浴中蒸干，加入5%香草醛冰醋酸（临用新配）0.2 ml，3%的高氯酸0.8 ml，密塞于60 水浴显色20 min后，取出立即用冰水冷却。然后加入冰醋酸5 ml，摇匀，用分光光度计在400800nm波长范围下扫描，由此确定检测波长为602.5nm6。1.2.4标准曲线的绘制精密吸取酸枣仁皂苷对照品溶液0.10ml、0.15ml、0.20ml、0.25ml、0.30ml分别置于10mL具塞试管中，70水浴蒸干，然后分别加入0.2mL的5%香草醛-冰醋酸溶液，再加入0.8mL的
12、3%高氯酸溶液，密塞，在60水浴中加热20min，取出后冰水冷却5min，加冰醋酸5mL，摇匀，于602.5nm处分别测定其吸光度。以酸枣仁皂苷浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线7，如图1所示： 图1 酸枣仁皂苷的标准曲线由图1可得： 曲线的回归方程y=2.4700x-0.0048 R2=0.97691.2.5供试品溶液的测定取供试品溶液0.2ml，置于具塞试管中，在80水浴中蒸干，加入5%香草醛一冰醋酸（临用新配）0.2 ml，和3%高氯酸0.8 ml，密塞于70水浴中显色20min后，取出立即用冰水水浴冷却。然后再加冰醋酸5 ml，摇匀，用紫外-可见分光光度计测定其吸光度A值。又回归方程计算出样品的酸枣仁皂苷含量89。1.2.6单因素试验 （1）正丁醇用量对总皂苷得率的影响取乙醇浸提后的浸提液，用水溶解过滤，取上清液测定总皂苷含量，分别以料液比1:1、1:2、1:3、1:4、1:5加入
