《2023年植物组织中淀粉含量的测定2.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2023年植物组织中淀粉含量的测定2.docx（4页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、植物组织中淀粉含量的测定 植物组织游离脯氨酸含量的测定 原理 植物在逆境条件下，游离脯氨酸便会大量积累，且积累指数与植物的抗逆性有关。因此，脯氨酸可作为植物抗逆性的一项生化指标。 采用磺基水杨酸提取植物体内的游离脯氨酸，不仅大大减少了其他氨基酸的干扰，快速简便，而且不受样品状态干或鲜样限制。在酸性条件下，脯氨酸与茚三酮反响生成稳定的红色缩合物，用甲苯萃取后，此缩合物在波长520nm处有一最大吸收峰。脯氨酸浓度的上下在一定范围内与其消光度成正比。材料、仪器设备及试剂1.材料 植物叶片 2.仪器设备 分光光度计；水浴锅：漏斗：大试管20m1；具塞刻度试管20m1注射器或滴管5loml。 3.试剂
2、13磺基水杨酸溶液 2甲苯； 32.5酸性茚三酮显色液：冰乙酸和6mo1.l-l磷酸以3：2混合，作为溶剂进行配制，此液在4下23天有效； 4脯氨酸标准溶液。准确称取25mg脯氨酸，用蒸馏水溶解后定容至250ml，其浓度为100ug.ml-l。再取此液10ml，用蒸馏水稀释至looml，即成10g.ml-1的脯氨酸标准液。 1.标准曲线制作 1取7支具塞刻度试管按表9.2-1参加各试剂。混匀后加玻璃球塞，在沸水中加热40min。 2取出冷却后向各管参加5ml甲苯充分振荡，以萃取红色物质。静置待分层后吸取甲苯层以0号管匀对照在波长520nm下比色。 3以消光值为纵坐标，脯氨酸含量为横坐标，绘制标
3、准曲线，求线性回归方程 表9.2.1各试管中试剂参加量试管 0 6脯氨酸标准溶液m1 0 0.2 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 水m1 1.8 1.6 1.2 0.8 0.4 0 冰乙酸m1 2茚三酮显色液m1 3样品测定 1脯氨酸提取。取不同处理的剪碎混匀植物叶片0.20.5g干样根据水分含量酌减，分别置于大试管中，参加5m13磺基水杨酸溶液，管口加盖玻璃球，于沸水浴中浸提10min。 2取出试管，待冷却至室温后，吸取上清液2m1，加2m1冰乙酸和3m1显色液，于沸水浴中加热40min，下步操作按标准曲线制做方法进行甲苯萃取和比色向各管参加5ml甲苯充分振荡，以萃取红色物质。静置待分层后吸取甲苯层以0号管匀对照在波长520nm下比色。 3结果计算。从标准曲线中查出测定液中脯氨酸浓度脯氨酸含量的百分数。 脯氨酸g.g-1干或鲜重c.vaw1 式中：c一提取液中脯氨酸浓度ps，由标准曲线求得： v提取液总体积ml a-测定时所吸取得体积ml w-样品重g 第1页 共1页
