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1、丹参酮A乳剂对小鼠脑缺血的保护作用【摘要】目的观察丹参酮A对小鼠脑缺血、脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用小鼠断头模型、小鼠脑卒中模型、小鼠脑缺血再灌注模型，观察丹参酮A注射乳剂对小鼠断头后存活时间、喘气次数，小鼠脑卒中后的神经行为，小鼠脑缺血再灌注后脑内SD活性、DA含量的影响。结果丹参酮A能延长小鼠断头后的存活时间、增加断头后的喘气次数，改善脑卒中小鼠的神经行为，进步脑缺血再灌注损伤后小鼠脑组织中SD酶活性,降低DA含量。结论丹参酮A注射乳剂对小鼠脑缺血及脑缺血再灌注损伤具有保护作用。【关键词】丹参酮A注射乳剂；脑缺血；脑缺血再灌注；自由基Abstrat：bjetiveTinvestig
2、atetheprtetiveeffetfTanshinneAagainstbraininjuryinieinduedbyerebralisheiarerebralisheia-reperfusin.ethdsieerepretreatedithTanshinneAatthedsef7.8,3.9,1.9g/kgi.v.respetively.Thedelsfieerebralisheiaanderebralisheia-reperfusinereade.Thesurvivaltie,gaspingtiebydeapitatinandbehavirereevaluated.TheSDativit
3、yandDAntentereeasured.ResultsTanshinneAuldsignifiantlyinreasethesurvivaltieandgaspingtie,iprvethebehavirfie.TanshinneAuldalsenhanethesuperxidedisutase(SD)ativityandreduethealnyldialdehyde(DA)ntentiniebraintissueatthesaetie.nlusinTanshinneAhasprtetiveeffetagainstbraindaageinduedbyerebralisheiaandereb
4、ralisheia-reperfusininie.Keyrds:TanshinneAeulsin;erebralisheia;erebralisheia-reperfusin;freeradial丹参酮tanshinne是丹参的有效活性成分，包括丹参酮、丹参酮A、丹参酮B等脂溶性成分和丹酚酸甲、丹酚酸乙、丹参素等水溶性成分，其中丹参酮A为丹参酮中含量最高的活性成分1。为理解决丹参酮A不溶于水，成盐后注射给药不易透过血脑屏障，将丹参酮A做成微乳制剂，在不改变其理化性质的根底上，保持其原有的脂溶性和穿过脂双层生物膜、透过血脑屏障的才能。本文利用小鼠脑缺血及脑缺血再灌注模型，观察丹参酮A对脑缺血的保
5、护作用，讨论其作用机制。1材料1.1药品与试剂受试品：丹参酮A注射乳剂0.3gL-1，批号202206，北京中海康科技开发公司提供，临用前用5葡萄糖注射液稀释至所需浓度，DA、SD试剂盒南京建成生物工程研究所。2方法2.1小鼠断头喘气模型2取体质量1822g的昆明种小鼠50只，随机分为5组，每组10只，雌雄各半。实验组分别尾静脉丹参酮A注射乳剂7.8、3.9、1.9g/kg；阳性对照组尾静脉注射丹参酮A磺酸钠注射液5.2g/kg；空白对照组尾静脉注射等容量的5葡萄糖注射液20L/kg。给药10in后，迅速从小鼠双耳后颈部断头，观察小鼠断头喘气的时间及喘气次数，实验结果进展LSD检验。2.2小鼠
6、脑卒中模型3取体质量2224g的雄性昆明种小鼠50只，分组、给药同实验“2.1。给药后10in小鼠用乙醚浅麻醉，别离两侧颈总动脉及迷走神经，左侧颈总动脉连同迷走神经下置一根直径为0.2的细钢丝，结扎后将钢丝抽出，右侧颈总动脉及迷走神经完全结扎。术后按下述指标观察缺血1.5h内卒中指数，每0.5小时记录1次，并计算3次分数总和。评分标准：1毛蓬乱竖起，动作缓慢或活动减少，触耳反响加强，眼睑下垂，脑卒中指数各1分，总计4分；2头翘起，眼球固定，后肢向外向后伸展，转圈，抽搐或痉挛，脑卒中指数各3分，总计15分；3昏迷，脑卒中指数为6分。2.3小鼠脑缺血再灌注模型4取体质量2224g的雄性昆明种小鼠6
7、0只，随机分6组，每组10只，实验组与阳性对照组分组与给药剂量同实验“2.1，假模型组及模型组尾静脉注射等容量的5葡萄糖注射液20L/kg。给药后10in，各组小鼠用乙醚麻醉，别离两侧颈总动脉并结扎，导致脑缺血，结扎20in后松开，恢复颈总动脉血流，造成缺血再灌，小鼠手术后缝合并继续饲养。连续给药3d，每天1次。假模型组只别离双侧颈总动脉而不结扎。末次给药后30in将各组小鼠处死，取脑，试剂盒测定DA的含量及SD酶活性。转贴于论文联盟.ll.3结果3.1丹参酮A注射乳剂对小鼠断头喘气时间及次数的影响丹参酮A注射乳剂7.8、3.9g/kg可以显著延长小鼠断头后的存活时间，增加喘气次数，与空白对照
8、组比拟差异显著P0.05,P0.01,见表1。3.2丹参酮A注射乳剂对缺血小鼠脑卒中指数的影响由表2可见，小鼠脑卒中后脑卒中指数明显增加；丹参酮A预防给药后，小鼠脑卒中指数明显降低，丹参酮各剂量组脑卒中指数与模型组比拟差异均有显著性P0.05,P0.01。表1丹参酮A注射乳剂对小鼠断头喘气时间及次数的影响略Tab.1TheeffetfTanshinneAeulsinnsurvivaltieandgaspingtiebydeapitatininie与5%葡萄糖组比拟：*P0.05;*P0.01表2丹参酮A注射乳剂对脑缺血小鼠脑卒中指数的影响略Tab.2TheeffetfTanshinneAeul
9、sinnstrkeindexiniesubjetedterebralisheia与模型组比拟：*P0.05;*P0.013.3丹参酮A注射乳剂对脑缺血再灌注损伤小鼠脑内SD活性及DA含量的影响由表3可见，小鼠在脑缺血再灌注后，脑组织SD活性明显下降，DA含量显著升高，模型组与假手术组比拟差异显著P0.01。与模型组比拟，丹参酮A注射乳剂7.8、3.9g/kg的脑组织SD活性显著上升P0.05,P0.01，DA含量极显著下降P0.01。提示丹参酮A注射乳剂能使脑缺血再灌注小鼠的脑组织过氧化程度受到明显抑制，进步机体去除自由基的才能。表3丹参酮A注射乳剂对缺血再灌注小鼠脑SD和DA的影响略Tab.
10、3TheeffetfTanshinneAeulsinnDAntentandSDativityiniesubjetedterebralisheia/reperfusin与模型组比拟：*P0.05;*P0.014讨论当脑缺血发生时，脑微血管系统中存在的谷胱甘肽-谷胱甘肽复原酶自由基去除系统的含量下降5，再灌注时那么导致微血管周围有大量自由基产生。氧自由基那么会损伤血脑屏障，促进脑水肿的形成、血管内皮黏附分子的表达以及白细胞和血小板与内皮的黏附，加重再灌注后脑微循环障碍6，因此自由基损伤也是防治脑缺血再灌注损伤的机理之一。DA是自由基与生物膜不饱和脂肪酸发生脂质过氧化的产物，它的含量反映氧自由基的程
11、度及脂质过氧化的程度。此外，DA可与核酸及蛋白质发生交联，使之受损。因此，DA不仅是细胞损伤的代谢产物，而且也是导致细胞损伤的机制之一。SD是一种金属酶，此酶可以催化超氧自由基发生岐化反响，可以去除氧自由基，保护生物膜免受自由基的攻击损害。本次试验采用小鼠断头、小鼠脑卒中及小鼠脑缺血再灌注模型，研究丹参酮A注射乳剂对脑缺血及脑缺血再灌注损伤的保护作用。试验结果说明，丹参酮A注射乳剂可以升高脑组织内SD酶的活力，降低DA含量，延长小鼠断头后的存活时间、增加喘气次数，改善脑卒中小鼠的神经行为。由此可见，丹参酮A注射乳剂对脑缺血及脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用，该作用的产生可能与其抑制脂质过氧化反响有关。
