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1、1.snnRNAA：小核核RNAA，只存存在于细细胞核或或者核质质核仁中中的一类类小分子子量的RRNA，具具有独特特功能并并且独立立存在的的实体，约约为700-3000个核核苷酸，可可参与真真核生物物的RNNA剪接接。2.siiRNAA：即干干扰RNNA，一一类小分分子量的的RNAA，可以以高效，特特意地阻阻断体内内同源基基因的表表达，促促使同源源mRNAA降解，诱诱使细胞胞表现出出特定的的基因缺缺失。3.核酶酶：一类类具有催催化活性性的核糖糖核酸，呈呈锤头状状，参加加RNAA的剪切切和降解解。与RNNA酶有有显著区区别，它它是RNNA，后后者是蛋蛋白质。4.反义义RNAA又称调节节RNAA，
2、是指指能与特特定mRRNA互互补结合合的RNNA片段段，即碱碱基序列列正好与与有意义义的mRRNA互互补的RRNA分分子。5三链DDNA：是在DDNA双双螺旋结结构基础础上形成成的，由由多聚嘧嘧啶核苷苷酸或者者多聚嘌嘌呤核苷苷酸与DDNA双双螺旋形形成的。/由于双螺旋的一股轻微折叠后，该股中的碱基可与双螺旋的碱基以Hoogsteen氢键相连如TAT、CGC、TAA、CGG。6.RNNAi：即RNNAi干干扰，ssiRNNA高效效特异地地阻断体体内同源源基因表表达，促促使同源源RNAA降解，诱诱使细胞胞表现出出特定基基因缺失失的表型型的现象象。7.何谓谓反义RRNA？其功能能和医学学意义如如何？
3、答答：又称称为调节节RNAA，是指指能与特特定mRRNA互互补结合合的RNNA片段段，也即即碱基序序列与有有意义的的mRNNA互补补的RNNA分子子。功能能：a阻阻断mRRNA的的翻译，bb抑制DDNA复复制和mmRNAA的转录录，c选选择性的的关闭基基因。意意义：参参与基因因调控：可用于于基因治治疗（病病毒、肿肿瘤）；8什么叫叫做核酶酶？如何何发挥作作用？有有何应用用价值？答：即即一类具具有催化化活性的的核糖核核酸。主主要催化化RNAA的剪接接反应和和剪切反反应。应应用意义义：通过过设计合合成特异异性切割割病毒以以及病毒毒的RNNA的核核酶，对对病毒和和肿瘤的的基因治治疗将发发挥重要要作用。
4、9.何谓谓RNAAi？其其作用机机理和应应用前景景如何？答：即即RNAAi干扰扰，siiRNAA高效特特异地阻阻断体内内同源基基因表达达，促使使同源RRNA降降解，诱诱使细胞胞表现出出特定基基因缺失失的表型型的现象象。作用用机理：分为起起始阶段段和效应应阶段。起起始阶段段Diccer酶酶以依赖赖ATPP的方式式切割外外源性的的双链RRNA为为小分子子干扰RRNA，清清除病毒毒，阻断断转座子子表达；效应阶阶段小分分子干扰扰RNAA结合核核酶复合合物形成成RNAA诱导活活化的复复合物及及RISSC，然然后RIISC结结合至mmRNAA转录本本上并切切割它，从从而发挥挥作用。应应用前景景：大通通量研
5、究究基因功功能的工工具；基基因敲除除中的应应用；用用于基因因治疗；基因表表达的调调控。第二章 1移动基基因：又又叫转位位因子（transposable elements）,由于它可以在染色体基因组上移动，甚至可在不同染色体间跃迁，故又称跳跃基因（jumping gene）。2断裂基基因：真真核细胞胞的结构构基因，其其核苷酸酸序列中中含有与与氨基酸酸编码无无关的DDNA间间隔区段段，从而而被分割割成不连连续的若若干区域域。将这这种编码码序列不不连续，有有间隔区区段的DDNA片片断称为为断裂基基因3RNAA剪接：将断裂裂基因的的内含子子删除和和表达子子连接并并最终形形成成熟熟mRNNA的过过程。4
6、 重叠叠基因：不同基基因的核核苷酸序序列有时时为相邻邻两个基基因共用用，将核核苷酸彼彼此重叠叠的两个个基因称称为重叠叠基因。5 假基基因：在在珠蛋白白基因簇簇各片段段核苷酸酸序列分分析时发发现，除除了有正正常的功功能基因因之外，还还有功能能失活的的特殊序序列片段段，它不不能行使使表达功功能。该该类核苷苷酸序列列中存在在的无表表达功能能的畸变变核苷酸酸序列片片段。6 卫星星DNAA：又称随随体DNNA,不编码码蛋白质质和转录录RNAA的小片片段高度度重复一一类小片片段DNNA序列列，多富富含GCC碱基在在DNAA浮力密密度实验验中会在在主峰旁旁形成些些小峰，形形似卫星星分布而而称之。一般5-10
7、bbp短序序列，人人类为1171bbp，保保护和稳稳定染色色体7 基因因组：表示某某物种单单倍体的的总DNNA。对对于二倍倍体高等等生物其其配子的的DNAA总和即即为一组组基因组组不同生生物基因因组数目目不同。8 LTTR：即长末末端重复复序列，为为RNAA基因组组的两端端含有的的U3RRU5两两个完全全相同的的正向重重复序列列。具随随机整和和能力，可可用作病病毒载体体问答：11 什么么叫做基基因？何何谓基因因的新概概念？基基因的主主要功能能是什么么?答：基因就就是指编编码有功功能蛋白白质多肽肽链或RRNA分分子所必必须的全全部核酸酸序列。所所谓基因因的新概概念是随随着近年年分子生生物实验验技
8、术的的发展从从分子水水平上研研究基因因的结构构和功能能，提出出的移动动基因，断断裂基因因，重叠叠基因，假假基因等等基因的的新概念念。功能能：编码码蛋白质质或者RRNA分分子基本本遗传信信息的基基本遗传传单位，是是构成DDNA的的功能单单位。2.何谓谓转位子子和转位位作用？转位的的后果如如何？答答：一种种大于220000bp的的可以在在染色体体基因组组上移动动，甚至至可以在在不同染染色体间间跳跃的的基因序序列，也也可以称称为插入入因子IS因因子。转转位作用用：转位位子具有有双向整整合特性性，可以以插入其其他基因因及自身身基因不不同位点点上的移移动方式式。后果果：可以以在细菌菌染色体体或质粒粒中随
9、机机转移，被被插入的的基因即即失去活活性。可可以在染染色体或或质粒的的某一IIS上脱脱落转位位至另一一相同的的IS上上，引起起突变或或基因转转移。3.何谓谓基因工工程的四四大里程程碑和三三大技术术发明？答：四四大里程程碑：119444年Osswalld报道道肺炎球球菌转化化实验，明明确遗传传物质是是DNAA；19953年年Jammes wasstonn和Frranccis Criick阐阐明了DDNA双双螺旋结结构(半半保留复复制及其其中心法法则)；遗传密密码子的的破译；基因转转移载体体的发现现。三大大技术发发明：工工具酶的的发明（内内切酶、合合成酶、连连接酶）；基因合成和测序（合成仪、测序仪
10、）；PCR技术（PCR扩增仪）。第三章名词解释释：1基因表表达：是目的的基因DDNA在在导入的的细胞内内转录成成mRNNA, 再以mRRNA指指导翻译译成蛋白白质。2 启动动子：是是位于结结构基因因上游，转转录起始始调控所所必需的的一段DDNA序序列，内内含-335区（与与因子结结合）和和-100区（和和核心酶酶结合）的的保守序序列。当当启动子子与全酶酶结合后后可在+1转录录起始点点开始转转录。3 终止止子：位位于一个个基因编编码区下下游提供供终止信信号的DDNA序序列，可可以被RRNA聚聚合酶识识别并发发出停止止mRNNA合成成的信号号。4 起始始密码子子：编码码多肽链链的第一一位氨基基酸的
11、密密码子AAUG（或或ATGG），编编码甲硫硫氨酸（蛋蛋氨酸）。在细菌中也有罕见的其实密码子GUG，编码缬氨酸。其起始表达作用AUGGUG。5 终止止密码子子：有三三个密码码子（UUAA, UAAG，UUGA），为为终止密密码子，只只表示链链的终止止，不表表达氨基基酸。问答1外源基基因在大大肠杆菌菌中表达达需要的的条件有有哪些？答：条件件：一：外源基基因插入入序列必必须保持持有正确确的方向向和阅读读框架。其其遗传密密码不得得缺失、遗遗漏或错错位及错错码。否否则会导导致编码码错误的的蛋白质质分子，特特别是目目的基因因序列内内部应不不含两端端酶切位位点的识识别序列列；二：原核mmRNAA聚合酶酶能
12、够识识别插入入的基因因，三: 外源源基因必必须能在在大肠杆杆菌中进进行有效效转录（如如无内含含子），转转录后的的信使RRNA在在菌体必必须相当当稳定，并并且能有有效的进进行翻译译，转译译的蛋白白分子在在菌体内内不至于于受菌体体蛋白酶酶的降解解2 影响响外源基基因在大大肠杆菌菌中表达达的因素素有哪些些？答：包括以以下这些些因素：启动子子结构对对表达效效率的影影响；表表达载体体的选择择；外源源基因中中密码子子的作用用；mRRNA的的一级结结构与基基因表达达；mRRNA的的二级结结构对翻翻译起始始的影响响；mRRNA稳稳定性的的影响；转录终终止区对对外源基基因表达达效率的的影响；转录后后的若干干因素
13、与与基因表表达的关关系；宿宿主选择择对表达达的影响响；培养养条件的的控制对对表达效效率的影影响。第四章名词解释释：1锌指结结构：由由两个半半胱氨酸酸残基和和两个组组氨酸残残基通过过位于中中心的锌锌离子结结合成一一个稳定定的指状状结构，表面暴暴露的碱碱基及其其极性氨氨基酸与与DNAA结合有有关。2 亮氨氨酸拉链链：存在与与蛋白CC末端，为为两组走走向平行行.带亮亮氨酸的的螺旋旋形成的的对称二二聚体，约约为300个氨基基酸，每每两个亮亮氨酸之之间隔有有六个氨氨基酸，于于是每两两圈螺旋旋就有一一个亮氨氨酸，排排成一排排，从而而在2个个-螺旋旋的蛋白白分子之之间形成成一条拉拉链。3 RNNA编辑辑：是
14、mmRNAA转录后后因插入入，缺失失或核苷苷酸的替替换，改改变了DDNA模模板来源源的遗传传信息，从从而翻译译出氨基基酸序列列不同的的多种蛋蛋白。4增强子子：是使启启动子的的基因转转录效率率显著提提高的一一类顺式式作用元元件，其其本身不不具有启启动子活活性，可可独立存存在与上上游区、下下游区或或基因内内部，可可进行远远距离增增强启动动作用，而而且无方方向性。问答1 真核表表达调控控的顺式式作用元元件有哪哪些？其其作用特特点是什什么？ 答：顺式作作用元件件有：启启动子，增增强子，沉沉默子，衰衰减子，终终止子。作用特点：是能够与DNA结合蛋白质结合的特定序列的DNA片段，决定转录起始位点和RNA聚
15、合酶的转录效应。2 真核核表达调调控的反反式作用用因子有有哪些？其作用用特点？答：反反式作用用元件：主要分分为通用用转录因因子和转转录调节节因子两两大类。作作用特点点：一，同同一DNNA序列列可被不不同蛋白白质识别别；二：同一蛋蛋白质因因子可与与多种不不同DNNA序列列发生联联系，多多通过蛋蛋白质-蛋白质质先结合合再影响响DNAA。三：蛋白质质-蛋白白质或蛋蛋白质-DNAA的结合合，导致致构象上上细微的的改变，从从而发挥挥调控作作用。四四：反式式作用元元件在合合成过程程中有相相当大的的可变性性和可塑塑性。4 常用用的真核核表达载载体有哪哪些？并并简述其其特点。答：主要有一下几种：逆转录病毒载体
16、，痘类病毒载体，HSV-I单纯疱疹病毒载体。特点：一，逆转录病毒载体：对细胞的感染效率高，并能表达整合的病毒基因；可以同时感染大量细胞；长时间感染细胞并不会发生毒害作用；宿主范围十分广泛；可以进行DNA的单拷贝整合；但稳定性差，安全性差，重组病毒滴度不高而且局限于感染分裂细胞。二，痘类病毒载体：对多种细胞敏感易于培养利于大量生产制备；对外环境相对稳定并易于保存运输；接种途径简单易行；利于多价疫苗的研究开发；利于大片段的外源性基因的插入，且不影响病毒的正常复制和表达，但是基因组分子量大不易操作，没有mRNA的剪切功能故不宜采用基因组DNA，需使用无内含子的cDNA。三，HSV-I单纯疱疹病毒载体：比较大利于大片段的外源性基因插入提供条件，而且插入容量大；可以感染神经细胞。5 简述述真核，原原核俩大大表达系系统的优优缺点？答
