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1、紫外分光光度计法测定果蔬中 维生素C的含量紫外分光光度计法测定几种常见果蔬中维生素C的含量摘要：利用维生素c对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，用紫 外分光光度法测定5种常见果蔬中维生素C的含量。最大吸收波长为 243nm，标准曲线方程为A=000537c，相关系数为Rt=O.99539。9 种果蔬中维生素C含量】mg（100g） 1分别为：青尖椒 111. 8、上海青104. 2、韭菜82. 5、小白菜78. 9、西芹59. 70、胡萝 卜49.8、西兰花28、茄子26.4、山药14.9。该方法简单、快速，结 果令人满意。1. 前言维生素C又称抗坏血酸，是一种水溶性维生素。能预防牙龈出 血及萎
2、缩、提高人体免疫力，对坏血病、动脉硬化、贫血等有一定疗 效。天然存在的抗坏血酸有L型和D型2种，后者无生物活性。维生素C 是呈无色无臭的片状晶体，易溶于水，不溶于有机溶剂。在酸性环境 中稳定，遇空气中氧、热、光、碱性物质，特别是由氧化酶及痕量铜、 铁等金属离子存在时，可促进其氧化破坏。氧化酶一般在蔬菜中含量 较多，故蔬菜储存过程中都有不同程度流失。但在某些果实中含有的 生物类黄酮，能保护其稳定性。维生素C的测定方法主要有紫外分光光度法、红外光谱法、2,6 二氯靛酚滴定法、高效液相色谱法、钼蓝比色法、原子吸收法、碘 量法、电位滴定法、荧光光度法、毛细管电泳法、流动注射化学发光 法2-12等。其中
3、原子吸收法、高效液相色谱法和荧光光度法仪器相 对昂贵；碘量法和电位滴定法操作步骤较繁琐，而且受其它还原性物 质、样品色素颜色和测定时间的影响；紫外分光光度法是根据维生素 C对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于243nm处测定样品液与碱 处理样品液两者吸光度之差，通过标准曲线方程，即可计算样品中维生素c的含量。本实验采用市售的西芹为研究材料，用紫外分光光度法测定 韭菜中维生素C的含量。2. 实验 2.1材料、试剂和仪器 市售西芹10%HCl、抗坏血酸、Imol/lNaOH、蒸馏水UV2000-紫外可见分光光度计、KDC-40-电子天平、FA1104-离心 机2.2方法准确称取0050g抗坏血酸，
4、加10ml 10%HCl溶解，用蒸馏水定 容至500ml,混匀，即得100ug/ml维生素C标准溶液。分别准确移取100ug/ml维生素C标准溶液Oml、0. 03ml、0.06ml 0.09ml、0. 12ml、0. 15ml、018ml、0. 24ml、0. 30ml于试 管中，分别加入蒸馏水至总体积为3ml。以水为参比，在243nm处测定吸光度，以维生素C浓度为横坐标、吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。标准曲线将西芹洗净晾干，取104489g于研钵中，先加入10%HCl 5ml, 再加入5ml,研磨匀浆，转移至50ml容量瓶中，稀释至刻度，混匀。 移至离心管中3000r/min离心10min
5、,取上清液即为待测果蔬提取液。取0lml待测果蔬提取液，放入盛有0. 2ml 10%HCl的试管中， 再加入蒸馏水4. 7ml,摇匀。以蒸馏水为空白对照，在243nm处测定其 吸光度（AJ。依次吸取01ml待测果蔬提取液、1ml蒸馏水和0. 4ml 1mol/l NaOH溶液放入试管中，摇匀；静置20min后加入04ml 10%HCl，混匀, 再加入31g蒸馏水。以蒸馏水为空白对照，在243nm处测定其吸光度 （A。果蔬样品吸光度二待测果蔬提取液吸光度（A。-碱处理果蔬提 取液吸光度（A?）测得果蔬样品的吸光度后,依据标准曲线方程,即可计算出果 蔬中维生素C的含量mg/100g。维生素C含量=
6、（c V总V待测总 100） / （匚讣总1000） 式中：c为依标准曲线方程计算得到的维生素C浓度,ug/mlV釣测吸光度时吸取样品溶液的体积,ml；V总为吸取样品定容总体积,ml；V待测总为待测样品总体积,ml；W总为果蔬质量，g;100为100g果蔬。3. 结果3.1标准曲线由标准曲线可得线性回归方程为A=0 05371X,相关系数R2 =0.99539。3.2维生素C含量的测定几种常见果蔬中此含量120 业耳由图可知，蔬菜中的维生素C含量分别为m g/100g：青尖椒111.8、上海青104.2、韭菜82.5、小白菜78.9、西芹59.70、胡萝卜49.8、西兰花28、茄子26.4、山
7、药14. 9。9种蔬菜中维生素c的含量关 系为：青尖椒上海青韭菜小白菜西芹胡萝卜西兰花茄子山 药。3.3结论与分析利用维生素C在紫外光区有明显的吸收和对碱不稳定的特性， 建立了果蔬中维生素C含量的测定方法。在一定浓度范围内，维生素 C浓度与紫外吸光度呈良好的线性关系，回归方程为A=0. 05371X,相 关系数 R2=0.99539。9种蔬菜中Vc含量大小依次为：青尖椒上海青韭菜小白菜西芹胡萝卜西兰花茄子山药。(1) 碾磨不充分，研钵上有残留，导致部分维生素C残留在 蔬菜内，故测Vc含量值偏低。(2) 将研钵中的研磨液转移至容量瓶中时有部分研磨液漏出， 仪器清洗不干净，导致定容后容量瓶内Vc浓度偏低。(3) 取上清液时有少量底层物质吸入其中，导致测吸光光度值 有误差。该方法简单易行、灵敏度高、结果准确，可快速测定果蔬中维生素C的含量。
