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1、念珠菌感染特性及耐药性分析医学检验专业指导老师 学生摘 要目的 探讨念珠菌感染的特点及耐药性情况，为临床合理选用抗真菌药物提供实验室依据。方法 应用回顾性调查分折的方法，对我院1年间住院病人、门诊病人标本分离的193株念珠菌进行统计并对常用抗真菌药敏试验结果进行分折。结果 分离出的念珠菌以内科系统为主，共分离出136株(占70.47%)；检出真菌最多的部位是呼吸道，占真菌标本的76.17%；其种类以白色念珠菌及热带念珠菌为主，分别占73.58%和15.54%；药敏结果中：两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，特比萘芬对白色念珠菌的敏感率仅6.3%，但对热带念珠菌的敏感率为100%。结论
2、加强临床真菌分离菌株对抗菌药物的耐药性关注，根据药敏试验合理应用抗真菌药物十分重要。关健词：念珠菌,感染特性, 耐药性ABSTRACTobjective To investigate the characteristic of Candida infection and examine the drug resistance condition, so as to provide assistance to the reasonable use of antifungal agents clinically. Methods To analyze the status of drug resi
3、stance of 193 strains of Candida, which were isolated from inpatients and outpatients of our hospital. Antifungal agents susceptibility test was done to know the drug resistance. Results The Candida isolated in our hospital were predominant from medical unit, 136 strains of Candida were identified(a
4、ccounted for 70.47%); The specimens where detected Candida were mostly from respiratory tract, accounting for 76.17%. The Strains of Candida albicans and C. tropicalis had the highst detection rates, accounting for 73.58% and 15.54% respectively. The rates of susceptibility of Candida to Amphoterici
5、n B, Nystatin were more than 90%, and the rates of susceptibility to Terbinafine was only 6.3% for Candida albicans, but 100% for C. tropicalis. Conclusion Pay more attention to the drug resistance to the Candida isolated from the clinical. Antifungal agents should be selected reasonably according t
6、o the result of drug susceptibility test.KEY WORDS ：Candida，infection characteristic，Drug resistance目 录第一章 绪论1.1 念珠菌简介1.2 念珠菌致病机理1.3 念珠菌影响因素1.4 念珠菌相关感染第二章 念珠菌感染特性及耐药性分析 2.1 材料与方法 2.2 结果 2.3 讨论参考文献致 谢毕业设计小结 第一章 绪论1.1念珠菌简介念珠菌是一种腐物寄生菌，广泛存在于自然界。是人体正常菌群之一，平时主要生存于人体的口腔、皮肤、粘膜、消化道、阴道及其他脏器中。正常人群白色的带菌率可高达40%;
7、从阴道粘膜分离出来的念珠菌85%-90%为白色。而白色的致病性最强。1.2致病机理念珠菌是一种条件致病菌，念珠菌的致病性是相对的。侵入人体后是否发病取决于人体免疫力的高低及感染菌的数量、毒力。在正常情况下，寄生在人体内的念球菌呈酵母细胞型，一般不致病。在机体某些生理、病理因素影响下，阴道或阴茎内环境改变，机体抵抗力或免疫力降低时，念珠菌就会大量繁殖发展为菌丝型，侵犯组织，达到一定量时，人体就会发病，引起临床症状。这些因素通常包括妊娠、糖尿病、口服避孕药、长期应用广谱抗生素、免疫抑制剂及皮质激素使用等使机体免疫力下降，或改变阴道内环境的情况下，妇女阴道上皮细胞糖原增加，酸性增强，白色念珠菌会繁殖
8、引起念珠菌感染，如阴道炎，故本病常见于孕妇、糖尿病患者及接受雌激素治疗的患者。此菌还可引起龟头炎。1.3致病力影响因素念珠菌的致病力和下列因素有关：粘附力;粘附力与毒力成正比，在念珠菌属中白念珠菌粘附力最强;两型性形态：当感染时，白念珠菌常呈菌丝型。菌丝型的毒力比酵母型的毒力强;毒素：菌细胞表面的多糖毒素和另一种被称为“念珠菌毒素”可能是致病的因素;细胞表面成份;细胞外酶：白念珠菌可产生分泌一些酶，如溶血磷脂酶、磷脂酶和细胞外酸性蛋白酶（CAP）等。其中以CAP最为重要。CAP不仅能水解蛋白质，并能水解角蛋白及胶原，具有促进白念珠菌的粘附功能。1.4相关感染白念珠菌感染，首先是粘附在宿主的上皮
9、细胞上，然后在以上所述的白念珠菌致病因素作用下形成感染灶。粘附在上皮细胞是因为宿主细胞膜表面上有白念珠菌的粘附受体，即岩藻糖和N-乙酰葡萄胺;白念珠菌胞壁上具有多种粘附介导体，其中较为重要的有甘露聚糖蛋白质复合物（M-P）和几丁质。几丁质是（1-3，1-6）-葡聚糖与N-乙酰葡萄糖受化合物而成的立体空间多聚体;白念珠菌胞壁具有纤维蛋白原，纤维连接蛋白等成分的粘着受体。而这些成分广泛分布于血管壁、炎症和创伤愈合等部位，有极强的粘着性，与白念珠菌粘附后能桥连白念珠菌与宿主细胞间的粘附，使白念珠菌更容易粘附和侵袭宿主。第二章 念珠菌感染特性及耐药性分析随着科学技术的发展，广谱抗生素、免疫抑制剂及各种
10、侵入性诊断治疗的广泛应用，机会致病菌念珠菌感染在近年明显增多。真菌感染已成为白血病，淋巴瘤，免疫抑制，长期使用广谱抗生素，中心静脉插管，中性粒细胞减少，烧伤，低体重的早产儿，血液透析，骨髓或器官移植，胃肠道手术和机械通气等特殊人群的严重感染性疾病1 2。并且念珠菌对常用的抗真菌药物存在耐药菌株，给临床治疗带来很大困难。我们对临床标本分离的193株念珠菌属的感染类型及药敏进行分析，现将结果报道如下：2.1 材料与方法1.1 材料1.1.1 标本来源 193株念珠菌来自我院门诊和住院的感染患者的各类标本中。1.1.2仪器 VITEK-AMS 32 全自动微生物分折仪，法国Bio-Merieux公司
11、制造。1.1.3 试剂 YBC卡为Bio-Merieux公司配套产品，念珠菌chromG A显色培养基(法国科玛嘉公司提供)，8种抗真菌药物：两性霉素B、5-氟胞嘧啶、氟康唑、酮康唑、咪康唑、制霉菌素、伊曲霉素、特比萘芬 (辉瑞公司提供)。1.1.4 质控菌株 白色念珠菌ATCC 90029，购自卫生部临检中心。氟康唑可接受的抑菌环直径范围为28-39mm。1.2 方法1.2.1 细菌分离鉴定按全国临床检验操作规程3进行培养分离，分离所得念珠菌采用chromG A显色培养基或用VITEK-32 YBC卡鉴定到种的水平。1.2.2 细菌药敏试验 采用2003年美国国家临床试验标准化委员会(NCC
12、LS)认可的酵母菌纸片扩散法进行敏感性试验。Mueller-Hinton(MH)琼脂中补充2葡萄糖和0.5mgL美蓝4。酵母菌在无菌生理盐水中稀释，比浊至0.5号麦氏管浊度，酵母菌量约为11065106ml，均匀的涂抹在4mm厚平皿培养基上，贴上药敏纸片后，放置35孵箱， 24小时判断结果。质控菌株同时进行K-B法药敏试验，结果符合NCCLS质控要求。2.2 结果2.2.1 念珠菌的分布：193株念珠菌分布在10多个科室， 以内科系统为主，共分离出136株(占70.47%)；外科系统分离出28株(占14.51%)。分布构成（见表1）表1 193株念珠菌分布的科室构成科室株数构成比%科室株数构成
13、比%内科系统13670.47外科系统2814.51呼吸5126.42胸外84.15干部病房2211.40脑外52.59血液199.84外科重监室42.07内科重监室136.74肝胆42.07消化105.18骨科52.59神经84.15泌外、普外21.04心内52.59其它系统2814.51肾病科42.07儿科105.18内分泌21.04妇产科21.04风湿10.52门诊115.70中医10.52其它63.122.2.2 念珠菌的临床标本分布：念珠菌的感染来自临床各类标本。其中以痰标本为主，分离出147株(占76.17%)；生殖系分泌物分离出10株(占5.18%)；尿分离出8株(占4.15%)；
14、口腔分泌物分离出5株(占2.59%)；其它标本分离出23株(占11.92%)。2.2.3 193株念珠菌的种类和对抗真菌药物的药敏结果（见表2）：白色念珠菌在念珠菌感染中分离率最高，分离出142株(占73.58%)；药敏结果中：两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，特比萘芬、对白色念珠菌的敏感率仅6.3%，但对热带念珠菌的敏感率为100%。表2：念珠菌对抗真菌药物的药敏结果抗真菌药物白色念珠菌(n=142)热带念珠菌(n=30)其它真菌(n=21)合计(n=193)SIRSIRSIRSIR两性霉素95.072.112.8296.673.3371.4219.059.5292.754.153.115-氟胞嘧啶20.421.4178.1730106014.2923.8161.921.245.1873.58氟康唑70.4225.354.237026.673.3380.9519.0571.5022.805.70酮康唑43.6647.898.45604066.6728.574.7648.7044.566.74咪康唑25.3555.6319.02208038.1047.6242.8622.8046.1131.09制霉菌素97.890.701
