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1、168615140001 高熹 2016 年 9 月 19 日果蝇唾腺染色体标本的制备与观察实验报告一、实验原理双翅目昆虫（摇蚊、果蝇等）幼虫期的唾腺细胞很大，其中的染色体称为唾腺染色体。这 种染色体比普通染色体大得多，宽约5um，长约400um，相当于普通染色体的100150倍， 因而又称为巨大染色体。唾腺染色体处于体细胞染色体联会配对状态。并且唾腺染色体经过 多次复制而并不分开，每条染色体大约有10004000根染色体丝的拷贝，所以又称多线染 色体。多线染色体经染色后，出现深浅不同、密疏各别的横纹，这些横纹的数目和位置往往 是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征；如染色体有缺失、重复、倒位易
2、位等，很容易 在唾腺染色体上识别出来。各染色体的异染色质的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心；横纹 有深浅、疏密的不同，各自对应排列，这意味着基因的排列。唾腺染色体广泛应用于细胞遗 传学、发生遗传学、进化遗传学及分子遗传学的研究中。二、实验材料果蝇的三龄幼虫三、实验器材双目解剖镜，生物显微镜，解剖针，载玻片，盖玻片，滤纸条，废物缸，托盘等。四、实验试剂生理盐水，盐酸，蒸馏水，改良苯酚品红染色液等。五、实验步骤1.剥离唾腺：在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁 上即将化蛹的三龄幼虫，或者选择经低温处理的果蝇三龄幼虫置于载玻片上。每只手各持一 个解剖针，在解剖镜下进行操作。由
3、于果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持解 剖针按压住虫体前端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适 当用力向右拉唾腺腺体随之而出。剔除脂肪体并弃除无关物质。2解离：加一滴45%乙酸溶液于腺体上，作用5-7s。用滤纸吸干溶液。在唾腺组织上滴 一滴1mol/lLHCl,解离30-40s，以松软组织，利于染色体的分散。3吸去HCl，用水冲洗2-3次.4染色：滴加改良苯酚品红染液染色30min,染色时间不可过长，否则背景也着色。5. 加2滴乳酸-乙酸溶液，洗涤染好的腺体。重复2-3次，滤纸吸净剩余溶液，擦净腺 体周围杂质。6. 压片：加1滴乳酸-乙酸溶液于载玻片中
4、央的腺体上，盖上干净的盖片，并覆一层滤 纸。将片子放在实验台上，用大拇指用力压住，并横向揉几次。（注意不要使盖片移动，用 力和揉动是一个方向，不能来回揉。）7. 镜检：先用低倍镜进行观察，找到分散好的染色体再转用高倍镜进行观察。六、思考题1）染色中心：染色中心是染色后的果蝇唾腺染色体在显微镜下显示的深色部分，位于 整个唾腺染色体的中部，是许多异染色质聚集在一起形成的结构。其实际上是由果蝇第二对 与第三对染色的着丝粒部位相聚集而形成的一个深色中心。所有染色体都连接在这一点，其168615140001 高熹 2016 年 9 月 19 日本质是由每一条染色体的着丝粒结合在一起。2)联会，亦称配对，指同源染色体两两配对在细胞减数分裂前期的偶线期，来自父 本和母本的同源染色体，两两靠拢进行准确的配对，形成二阶体，即一对染色体含有四条染 色单体，但仅有两个着丝点，所以又称四分体，是减数分裂的重要特征。3)
