糖的测定方法

《糖的测定方法》由会员分享，可在线阅读，更多相关《糖的测定方法（13页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、糖的测定方法对于糖的测定方法有很多，大致可分为三类1. 物理法，（1.旋光法, 2 .折光法, 3.比重法,）2. 物理化学法,（1.点位法, 2 极普法, 3.光度法, 4.色谱法）3. 化学方法,（1.斐林氏法. 2.高锰酸钾法. 3.碘量法. 4.铁法. 5. 蒽铜比色法.6.咔唑比色法）共计三大种，在测定其他碳水化合物时，往往是使其水解为糖再进行 测定。一. 总糖的测定 食品中的总糖主要指具有还原性的葡萄糖，果糖，戊糖，乳糖和在测 定条件下能水解为 还原性的单糖的蔗糖（水解后为1分子葡萄糖和1 分子果糖），麦芽 糖（水解后为2 分子葡萄糖）以及可能部分水解的淀粉（水解后为2 分子葡萄糖

2、）。还原糖类之所以具有还原性是由于分子中含有游离的 醛基（-CHO）或酮基（二C=0）。测定总糖的经典化学方法都是以其能被各种试剂氧化为基础的。这些 方法中，以各种根据斐林氏溶液的氧化作用的改进法的应用范围最广 在这里我们主要给大家介绍铁法，蒽铜比色法，斐林氏容量法。斐林 氏容量法由于反应复杂，影响因素较多，所以不如铁法准确，但其操 作简单迅速，试剂稳定，故被广泛采用。蒽铜比色法要求比色时糖液 浓度在一定范围内，但要求检测液澄清，此外，在大多数情况下，测 定要求不包括淀粉和糊精，这就要在测定前将淀粉，糊精去掉，这样 就使操作复杂化，限制了其广泛应用。(一) 铁法1. 原理：样品中原有的和水解后

3、产生的转化糖都具有还原性质，在碱 性溶液中能将铁还原，根据铁的浓度和检验滴定量可计算出含糖量。其反应为下：CH 0+6K Fe(CN) +6K0H (CHOH)(COOH) +6K Fe(CN) + 4H 06 12 63642462滴定终了时，稍过量的转化糖即将指示剂次甲基兰还原为无色的隐色 体。2，试剂1) 1的次甲基兰指示剂2) 盐酸(水解作用)3) 10%和30%的NaOH溶液4) 1铁(贮存特色瓶，临用前标定)标定步骤称蔗糖1.0000g定容500ml取此液50ml于100ml容量瓶一加 hcl5ml摇匀一65-70C水裕15分钟一取出冷却一用30%NaOH中和 加水于刻度一倒入滴定

4、管中一取10ml1%铁于锥形瓶中一加10% NaOH2.5ml加12.5ml的水加玻璃珠颗粒一加热至沸一保持一分钟一 加次甲基兰 1 滴立即以糖液滴足至蓝色退去为止，记录用量。正式滴定比较滴定时少0.5ml糖液，煮沸1分钟，加指示剂一滴，再 用糖液滴定至兰色褪去，计算铁溶液的浓度。A=(W V)/(1000X0.95)A：相当于10ml铁氧化钾溶液的转化糖的量(克)V：滴定时消耗的糖液的体积W：称取纯蔗糖的量1000 ：稀释比0.95：换算等数3操作方法稀释10gf用100ml水作溶液一于250ml容量瓶一加20%醋酸铅10ml 一至沉淀完为止一加10mll0%NA2HPO4-至不在产生沉淀为

5、止一加水 至刻度一过滤一取滤液50ml 于100ml容量瓶中一按铁氧化钾标定 法进行转化，中和及滴定计算糖含量总糖(以转化糖计%)= (A X 1000)/(WV)X100A：相当于10ml铁氧化钾溶液的转化糖的重量，W：样品的重量V：滴定时样液消耗的体积4实验应注意(a) 达终点时，过量的转化糖将指示剂次甲基兰还原为无色的隐色体，隐色体容量受空气中氧所氧化，很快又变成指示剂的颜色。(b) 整个过程应在低温电炉上进行，滴定要速度，否则终点不明显(c) 糖与硫酸反应脱水生成羟甲基咲喃甲醛，生产物再与蒽铜缩合 成兰色化合物，其颜色深浅与溶液中糖的浓度 成正比，单、双糖等糖类都直接于试剂发生作用，因

6、此不需要水解。(二)蒽铜的比色法1. 原理：糖与硫酸反应脱水生成羟甲基呋喃甲醛，生产物再与蒽铜缩 合成兰色化合物，其颜色深浅与溶液中糖的浓 度成正比，可比色定量。2. 试剂(1) 硫酸锌溶液：溶解500g化学纯硫酸锌于500ml水中(2) 亚铁氰化钾溶液：溶解10.6g化学纯亚铁氰化钾于100ml 水中(3) 0.2%蒽铜试剂：溶解蒽铜0.2g于100ml95%硫酸中，置棕 色瓶中冷暗处保存(4) 0.1%葡萄糖液：准确称干燥葡萄糖0.1000g定容100ml3. 操作方法( 1 )标准曲线绘制( 2 )100ml 容量瓶编号沸水浴加热6分钟，取出冷却f用1cm比色杯f 610nm测定吸光度f

7、作出以吸光度为横坐标，糖液浓度为纵坐标的准曲线( 3 )样品测定称10g样品一于100ml热水加入500ml容量瓶中一加硫酸锌5ml-沸 水浴5分钟一取出再摇动下加亚铁氰化钾5ml,-冷却一定容500ml 一过滤一吸滤液25ml-于250ml容量瓶一定容250ml-取稀释液1ml, 于比色管中一加10ml蒽铜试剂一摇匀一水浴加热6分钟一冷却一比 色试验注意1, 样液必须清澈透明,加热后不应有蛋白质沉淀2, 样品颜色较深时,可用活性炭脱色后再进行测定3, 此法与所用的硫酸浓度和加热时间有关4, 所取糖液浓度在 1-2.5mg/100ml 之间二. 还原糖的测定方法 还原糖包括葡萄糖、果糖、麦芽糖

8、,在葡萄糖分子中含有淤青的醛茎, 在果糖分子中含有淤青的酮茎,在乳糖中和 麦芽糖中含有淤青的半缩羧茎,因此都有还原性。在测定还原糖时一 般测定总糖时所有将糖类水解为转化糖再测定 的方法都可用来测定还原糖。（一）斐林氏容量法1. 此法的原理、试剂、方法与总糖的测定方法相同。只是样品溶液不 必以过转化,而是直接取滤液进行滴定,滤液进行滴定,滤液中的还 原糖含量以在 0.2-0.5%为好,又能通过增减样品量或改变稀释倍数 来调节。10毫升费林氏A、B液混合时理论上相当还原糖量如下： 葡萄糖（无水）果糖或转化糖尿病 0.0500 克乳糖尿病0.0678 克麦芽糖0.0807 克2 试剂(1)斐林氏 A

9、 液，称 69.8g cp 硫酸铜于 100ml 水中，过滤备用(2)斐林氏B液，称34.6g.cp浓流锌钠和100gcpNaOH于1000ml水中，过滤备用3 方法称取样品10-20g :制备与转化同铁氰化钾法。将样液倒入滴管中，吸取 A,B 液准备预滴定预滴定:吸A、B液各5ml-从滴管中加15ml样液一加热至沸一继续滴加样液 一至兰色变潜一加3滴次甲基兰一在1分钟内滴定到终点达到终点时，稍微过量的转化糖，将兰色的次甲基兰染色体还原为无 色的隐色体，而显出氧化亚铜的红色，去碱性条件下加热糖的产物是 复杂的。去碱性中断裂是由于碱度不同，加热时间不同，生产不等的碎片，这 种碎片给后面滴定带来误

10、差，而且，这种碎片与糖没有化合量的关系， 所以， Lanecrol-EynonMethod 作出数据检索表正式滴定:吸A,B液各5ml-于三角瓶一加比预定量少0.5-1.0ml样液一2分钟 内要求沸腾1分钟-加3滴指示剂-用样液滴定兰色消失 总沸腾时间为3分钟，即滴定在3分钟完成。计算：还原糖=(F V)/(W V) X10021F：转还糖回数，即与10ml斐林氏试液相当的转化糖毫克数，V ：样品试液总体积1V ：样品试液滴定量2W：样品重量在测量乳糖制品时，若蔗糖与乳糖的含量比超过3： 1 时，则应与滴 定量中加上相关表中(课本中表 9-8)校正值后在进行计算 我们举例如下：如果标准果糖溶液

11、度为每100ml溶液含糖262.5mg。对于10ml斐林 试液从9-5可以查得果糖液滴定应为20ml。如果不是20ml，可先算 出 A,B 液校正等数。然后进行计算再如标准糖溶液浓度为每100ml溶液含糖199.3ml,对于10ml A,B 液 从9-4中查到，糖液滴定量应为25.00ml，若有出入可校正。如 果要求不高，可省略校正步骤但要求 1得测定误差，则省略校正。 另外有时候并未根据检索表计算样含糖量，但对 A,B 液进行标定，以 使确定相当得还原糖量。这种误差为0.5%。下面我们讲标定量A,B 液准确准确称取烘干冷却得A.R蔗糖1.5g-用水溶解称取250ml容量 瓶中一定容一吸50m

12、l于100ml定量瓶中一加HCL5ml-再65-70摄氏 度水裕15分钟一冷却一用30%Na0H中和一定容准确吸A,B液各5ml于三角瓶中一加水约50ml玻璃珠三粒一加热至 沸一保持1分钟一加指示剂1滴一再煮1分钟一立即用糖液滴定至兰 色褪去，红色出现即为终点正式滴定，先加入比预滴定时少0.5ml左右得糖液煮沸1分钟一加指示剂1滴f再煮沸1分钟f继续滴至终点计算：A=W*V/500X0.95A：相当于10ml斐林氏A、B液的转化糖的量W：称取蔗糖的质量V ：滴定蔗糖的量500：稀释比0.95：换算等数最后计算：总糖(还原糖)以转化糖计%= (A*1000/W*V) *100A：同上W：制取样品

13、的量V：滴定是时样品消耗量1000：是稀释倍数(100/50*500)1.预测定的目的：对样品溶液中还原糖浓度有一定要要求(0.1%左右) 测定时样品溶液的消耗体积应该与标定葡萄糖标液的消耗体积相近， 通过测定了解样品浓度是否合适，浓度过大或过小应该加以调整，使 测定时消耗样品溶液量在10毫升左右；二是通过测定可知道此溶液 的大概消耗量，以便在正式的滴定时，预先加入比实际用量少1毫升 左右的样液，只留下lml左右的样液在续滴定时加入，以便保证在1分钟内完成续滴定工作，提交预测定的准确度。2. 此实验影响测定结果的主要操作因素是反应液碱度、热源强度，煮 沸时间和滴定速度一般煮沸时间短消耗糖多，反

14、之，消耗糖液少，滴 定速度过快，消耗糖量多，反之，消耗糖量少。另外溶液碱度愈高， 二价铜的还原愈快，因此必须严格控制反应的体积，使反应体系碱度 一致。热源一般采用800W电炉，反应液在2秒内沸腾。（二） KMN04 （高锰酸钾法）1原理，还原糖在碱性溶液中使铜盐还原成氧化亚铜，在酸性条件 下，氧化亚铜能使硫酸铁还原为硫酸亚铁，再用 KMNO4 溶液滴定硫酸 亚铁，即可标出还原糖的量。2. 操作方法（ 1 ）样品处理a. 乳糖：包括乳制品以及含蛋白质的冷食类称样2-5g （液体样2550ml）f于250ml容量瓶一加水50ml-加A 液10ml+1N NaOH 4ml-定容一静置30秒一过滤一弃

15、去初液一可测还 原糖及蔗糖用。b. 低酒度饮料：麦精露、各类汽酒等饮料。先暴气除C02-取100ml于蒸发皿中一用1 N NaOH中和一沸水浴蒸2至原体积四分之一转入250ml容量瓶一加50ml水一摇匀一（加A液 10ml加1 N NaOH4ml） 加水至刻度一静置30秒一过滤。c. 含多量淀粉的食品：婴儿食品、糕干粉、宝宝乐、代乳粉、饼干、 面包、糕点等称样10-20gf 250ml容量瓶一加水200ml-45度水浴加热1小时一不停摇动一冷后加水至刻度一静置一吸出清夜200ml于另一容量瓶(250ml)-加 A 液 10ml+1NNaOH 4ml-静置 30 秒-过滤。d. 汽水、果露、国产七种可乐及可口可乐处理CO -吸样液100ml-于250ml容量瓶一加水至刻度一可测还原2糖及蔗糖。( 2)测定方法取50ml处理的样液一于400ml烧杯一加A、B液各25ml-加热在4min左右沸腾一再煮加in趁热抽滤一用60C水洗烧杯和沉淀一直到洗液不成碱性一将抽滤的纸(或者石棉)及CuO-转入原来烧杯一用 225ml 硫酸铁溶液冲洗抽滤瓶-使冲洗液全部洗入原烧杯中