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1、实验五培养基的配制（基础实验，4学时)一、实验目的和要求学习和掌握配制培养基的一般方法和步骤二、实验原理培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素及水分等。琼脂是应用最广的凝固剂,培养基一经制成就应及时灭菌,一般采用高压蒸汽灭菌器灭菌。牛肉膏蛋白胨培养基是细菌学中最常用的基础培养基，加琼脂制成的固体培养基常用于细菌的分离和培养.配方：牛肉膏0。3g，蛋白胨g，NC 0.5g，水00ml，琼脂520，pH 7。27。三、实验用具高压灭菌器、电热板、恒温培养箱、电子天平、50ml刻度搪瓷杯、称量纸、三角瓶、量筒、试管、培养皿、玻璃棒、pH试纸、记号
2、笔、牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、1mo/ NaO、1o/Hl四、实验步骤1、称药品 按配方依次称取，放入具刻度搪瓷杯中,牛肉膏可用表面皿或小烧杯称量,热水溶解后倒入搪瓷杯中,蛋白胨极易吸潮,称量要迅速.、溶解 在具刻度搪瓷杯中加入少于所需要的水量,加热,用玻璃棒搅拌,溶解后加入琼脂，熔化后补充水至所需量。3、调pH 用mol/LNaOH 和1ml/LCl调,用H试纸检测。4、分装 液体培养基分装高度以试管高度的1/4左右为宜，三角瓶不超过容积的一半为好,固体培养基试管高度的15，灭菌后制成斜面.5、加塞 用棉花制作塞6、包扎 三角瓶用牛皮纸或双层报纸包在棉塞外，以防止灭菌时冷凝水沾湿棉塞.试管先扎成捆后，在棉塞外用纸包。标明组别、培养基名称、日期。、灭菌 .13M,121，湿热灭菌20mn。8、摆斜面 趁热将试管口搁在一根长木条上，使斜面长度不超过试管总长的12。9、平板制作 灭菌后冷至506，取下棉塞,通过火焰,倒在已灭菌的平皿中，平皿制好后通常倒置1、无菌检查 将灭菌的培养基放在37恒温箱中培养48h,无菌生长可使用。六、注意事项1、分装时可用滤斗，避免培养基沾在管口或瓶口上而造成污染。2、称药品用的牛角匙不要混用；称完药品及时盖紧瓶盖.七、思考题高压蒸汽灭菌器如何使用?文中如有不足，请您指教！ /
