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1、薄层色谱分析步骤及注意事项瘪层色谱法(thin layer chromatography简写TLC)爱种物理化学的分离技术,常用于至豐的分离与分折。现对此卷的分析步骤氏注意事项提点建议。薄层色谱分析步骤完成TLC分析通常需经制板、点样、展开、检出4步操作。制板在一平而支持物(通常为軽)上，均匀地涂制硅胶、氧化铝或其他叹附剂薄层、样品的 分离、检测就在此薄层色谱板上进行。一般选用适当规格的表而光滑平整的玻璃板。常用的薄层板规格t： 10cmX20cm. 5cm X20cm、20cmX20cm等。称取适量硅胶，加入0.2%0.5%拔甲赧纤维素钠溶液(CMC-Zi), 充分搅拌均匀，进行制枚。一般来
2、说10cmX20cm的玻璃板，35g硅胶/块；硅胶与羨甲基 纤维素钠的比例一般为1： 21: 4。制好的玻痛板放于水平台上，注意防尘。在空气中自 然干燥后,置1C烘箱中烘0.5也，取出，放凉，并将其放于紫外光灯(254nm)下检视，薄 层板应无花斑、水印，方可备用。点样用微量进样器进行点样。点样前，先用铅笔在层析上距束端lcm处轻轻画一模线，然后 用毛细管呎取样液在橫线上轻轻点样，如杲要畫新点样，一定要等前一次点样残余的溶剂認 复后再点样，以免点样斑点过大。一般斑点宜径大于2mtn,不宜超过5mm.底线距杀线12. 5cm,点间距离为lcm左右，样点与玻璃边缘距离至少km,为防止边缘效应,可将
3、薄层根两边刮去1 2cm,再进行点样。展开将点了样的薄层板放在盛在有展开剂的展开槽中，由于毛细管作用,展开溶剂在薄层板 上烫慢前进，前进至一定距离后，取出薄层板，样品组分同移动速度不同而彼此分离。展开室应预饱和。为达到饱和效杲，可在室中加入足够量的展开剂；或者在壁上贴两条 与室一祥高、宽的滤纸条，一端泛入展开剂中，密封室顶的羔。 展开剂一般为两种以上互溶的有机溶剂，并且临用时祈配为宜。薄层板点样后，应待溶剂挥发完，再放人展开室中展开。 展开应密闭，展距一般为815cm。薄层板放入展开室时，展开剂不能没过样点。一般 悄况下，展开剂泛入薄层下端的高度不宜超过0.5cm。 展开剂每次展开后，都需要更
4、换，不能重复使用。 展开后的薄层枚用适当的方法，便溶剂挥发完全，然后进行检视。 RF值一般控制在0.30.8,当Rf值很大或很小时，应适当改变流动相的比例。斑点的检出展开后的薄层板经过干燥后，常用紫外光灯照射或用显色剂显色检出斑点。对于无色组 分，在用显色剂时，显色剂喷洒要均匀，量要适度。紫外光灯的功率越大，暗室越暗，检出 效杲就越好。展开分离后，企锂在薄层板上的位置用比移值（Rf值）来丧示。化合物斑点中心至原点的距 离与溶剂前沿至原点的距离的比值就是该化合物的RF債。注意事项铺板用的匀浆不宜过稠或过稀：过稠，板容易出现拖动或停颉适成的层纹；过稀，水蒸发后, 板表面较粗烫。匀浆配比般是硅胶G：
5、水=1: 23,硅胶G：羨甲基纤维素钠水溶液=1:2。研曆匀浆的时间，根据经酚来定,与空气湿度有关，一般通过拿起研棒时匀浆下滴的悄况来 列新,越稠越难下漓。匀浆的稀稠除影响板的平滑外，也影响板涂层的厚度,进一步影响上 样量。涂层薄，点样易过载；涂层犀，显色不那么明显。通常，板的质量对薄层鉴别的彩呐 不爱很大，彩响*大的是展开剂的配制和展开锤的饱和。点祥尽量用小的点样管。如果有足够的耐性，呆好只用1微升的点样管。这祥，点的斑点 较小，展开的色谱图分离度好，颜色分明。祥品溶液的合水量越小越好，祥品溶液含水量大, 点样斑点扩散大。样品溶液的溶剂一般是无水乙醇、甲隼氯仿、乙酸乙酯。点好祥的薄层 板用电
6、吹风的热风吹干或放入土堡器里晾干。展开剂配制选择合适的量器把各组成溶剂移入分液滞斗，强烈振摇便混合液充分混匀，放宜，如杲 分层，取用体积大的一层作为展开剂。绝对不应该把各组成溶液倒入展开缸，振摇展开缸来配制展开剂。混合不均匀和没有梢品多数时候这不是必须的。展开系统的饱和一般使用的是双槽的展开缸，一槽用来放展开剂，另一槽可加入氨水或硫敌。把待展开 的板放入两槽间的平台，斜架著，兼上展开缸的弟于。让展开剂的蒸气充满展开缸，并使薄 层板呎附蒸气达到饱和，防止边沿效应，饱和时间在半个小时左右。展开时难免要打开羔 亍把律层板放入展开剂中，不过对薄层板与蒸气的呎附吃影响不大，当然动作应该尽量轻、 快。温湿度的揑也温湿度对薄层影响都很大。不冻结的前提下，通常温度越低分离越好，较难的分离需 在低亘二分离，例如人参皂昔。湿厦的影响，估计主要是影胸薄层板的呎附1,导致选择 性（容量闵于）的芟化，湿厦应根据实际悄况确定。遍度控制使用空调器或冰柜，湿度控制 畏通过在另一展开槽放昼相应浓度的硫酸。显色喷显色剂显色晟重要是有好的雾化器。如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！
