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1、 PCR培训班考试试题一、 选择题（共20题，每题2分） 1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( A ) 目的基因引物四种脱氧核苷酸DNA聚合酶等mRNA 核糖体A、 B、 C、 D、2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为（ D ）A、0.3-1mmol/L B、0.5-1mmol/L C、0.3-2mmol/L D、0.5-2mmol/L 3、多重PCR需要的引物对为（ D）A、一对引物 B、半对引物 C、两对引物 D、多对引物4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，其特异性决定因素为（ B）A、模板 B、引物 C、dNTP D
2、、镁离子5、在PCR反应中，下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增( C ) A、TaqDNA聚合酶加量过多 B、引物加量过多C、A、B都可 D、缓冲液中镁离子含量过高6、 PCR技术的发明人是（A ）A、 Mullis B、史蒂文.沙夫 C、兰德尔.才木 7、 PCR产物短期存放可在（ A ）保存。A、4 B、常温 C、-80 D、高温8、 PCR产物长期储存最好置于（ D ）。A、4 B、常温 C、16 D、-209、 PCR的基本反应过程包括（A ）A、 变性、退火、延伸 B、变性、延伸 C、变性、退火 10、 在实际工作中，基因扩增实验室污染类型包括(D)A、 扩增产物的污染 B、天然基
3、因组DNA的污染 C、试剂污染和标本间交叉污染D、A、B、C都可能11、PCR技术于哪一年发明（ A ）A、1983 B、1971 C、 1987 D、199312、 Taq DNA聚合酶酶促反应最快最适温度为（C ）A、37 B、50-55 C、70-75 D、80-8513、 以下哪种物质在PCR反应中不需要（ D ）A、 Taq DNA聚合酶 B、dNTPs C、镁离子 D、RNA酶14、 PCR检测中，经过n个循环的扩增，拷贝数将增加（ C ）A、 n B、2n C、2n D、n215、 PCR基因扩增仪最关键的部分是（ A ）A、 温度控制系统 B、荧光检测系统 C、软件系统 D、热
4、盖16、 以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则（ A ）A、 各区合并 B、注意风向 C、因地制宜 D、方便工作17、 PCR实验室一般包括( D )A、 试剂准备区B、标本制备区 C、扩增区和产物分析区 D、A、B、C都含18、 PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的（D）。A、 白细胞DNA B、病毒蛋白质 C、血浆抗体 D、病毒核酸19、 如果反应体系中加入模板DNA分子100个，则经过30个循环后，DNA分子的数量将达到（ D ）个。A、10030 B、100302 C、10030
5、2 D、10023020、 PCR扩增产物的分析方法主要有（ D ） A、凝胶电泳分析法 B、点杂交法 C、荧光探针定量PCR法 D、A、B、C都是二、判断题（共20题，每题2分）1、PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间间取得平衡。（ ）2、在PCR反应中，dATP在DNA扩增中可以提供能量，同时作为DNA合成的原料。（ ）3、DNA扩增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板DNA解旋。（ ）4、PCR反应中，复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成。（ ）5、PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。（ ）6、PCR技术可用于基因诊断
6、，判断亲缘关系等。（ ）7、PCR技术需在体内进行。（）8、PCR反应体系中的缓冲液相当于细胞中的体液。（）9、核酸的复制是由5 3方向进行的。（）10、配对的碱基总是A与T和G与C。（）11、HBsAg转阴性后一段时间才出现可检测的HBsAb，此段间隔期称之为“窗口期”。（）12、市面上多数试剂用淬灭基团Q基团和报告基团R基团来标记荧光定量PCR的探针。（）13、PCR反应体系中Mg2+的作用是促进Taq DNA聚合酶活性。（）14、若标本中含有蛋白变性剂（如甲醛），PH、离子强度、Mg2+等有较大改变都会影响Taq酶活性。（）15、 每个子代DNA分子中均保留一条亲代DNA链和一条新合成的
7、DNA链，这种复制方式称之为半保留复制。（）16、 发生溶血的标本对PCR结果没影响。（）17、 “平台效应”是描述PCR后期循环产物对数累积趋于饱和。（）18、 逆转录聚合酶链式反应（reverse transcription-PCR，RT-PCR）就是在应用PCR方法检测RNA病毒时，以RNA为模板，在逆转录酶的作用下形成cDNA链，然后以cDNA为模板进行正常的PCR循环扩增。（）19、 在定量PCR中，72这一步对荧光探针的结合有影响，故去除，实际上55仍可充分延伸，完成扩增复制。（）20、 PCR可应用于遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面（）三、 简答(共两题，每题10分)1、 PCR
8、技术答：PCR技术是用一对寡聚核苷酸作为引物（要点1：2分），通过高温变性、低温退火、中温延伸（要点2：5分）这一周期的多次循环，使特异的DNA片段数量指数倍数增加（要点3：3分）。2、简述定量PCR检测操作的全过程。答：标本的采集，保存（2分）样品前处理（2分）待样品充分裂解后点样上机反应（2分）反应结束后观察结果（2分）发报告（2分） located in the Tomb, Dong Shen Jia bang, defer the next day focused on the assassination. Linping, Zhejiang, 1 of which liquor wine masters (Wuzhen said information is Carpenter), who got A few bayonets, due to missed fatal, when night came
