LD50测定预试(采用改良寇氏法)

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1、实验一、LD50测定预试(采用改良寇氏法)小白鼠腹腔注射敌百虫目的:初步确定0%和100%死亡率的剂量范围。1. 基本要求:步骤:(1)实验动物的选择:、各半后兼取,剔除病鼠及(远、近)孕鼠,体重应较接近202g。品系、年龄、饲料、饥饱与环境因素尽可能一致。本实验采用昆明小鼠20只。(2)随机分组:减少人为的偏差,采用随机数字表。每个小鼠称(按体重轻重分)重编号,和随机数字表对应,用组数去除时(本实验分四组),按如下分配。余数等于零时,其余数用组数表示如:44余04组。不够除时,直接把分子落下来。如:3433组。能除时,余数即为组数。如:0.5411组。如此类推,分完了不均衡(每组应相等),每

2、组多的重新按随机数字表分配,随机数字除以该组的动物数(参见例1例3)。 (3)确定剂量 剂量范围选择:据经验,预试找出0%100%范围,Dm为使试验动物全部死亡的最小剂量,Dn为使试验动物一个也不死亡的最大剂量。Dm =10mg/kg ; Dn =3.3mg/kg 二步法 大致 a新药 10x 稀释 2倍稀释 范围b无资料:治疗量100x 作为最大剂量剂量分组:58组为宜,要求50%死亡上下各有一半的组,包括0%和100%组,两头舍去。各组剂量呈等比级数,换成对数为等差级数。比值=log-1(logDmax-logDmin组数-1)操作条件要统一。2. 药品的配置确定用药容量(d),小白鼠腹腔

3、注射为0.2mg/10g。计算每组药液量:V组=每组动物数动物平均体重d(5ml或以上为好)。为留余地。使V能被(1-K)整除。计算母液药液量及浓度V母=V/(1-1:r)C母=Dmax/d 例:C母=(2200g/10g/0.2ml/10g)用5%敌百虫稀释求5%敌百虫中多少ml才含有母液所需溶质数多少克?X=100?克2%=?ml取2%敌百虫?ml加生理盐水至?ml即为母液。以此类推。从母液中取出?ml作为4号液(最高浓度)在剩下的?ml+生理盐水?ml摇匀取?ml作为3号液。以此类推。3. 计算剂量填入表格以第一组剂量比值按顺序填入各组剂量值。4. 将稀释好的药液按顺序给每组小鼠0.2ml/10g腹腔注射,1号液注射1组;2号液2组观察1015内死亡情况以翻正反射消失为准,并将死亡数填入表格,一只未死的剂量组为0%全部死亡的为100%。组号剂量mg/10g对数 剂量实验动物数死亡数死亡数PP21234

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