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1、学兔兔标准下载0ICS67.50CCSX04中华人民共和国出入境检验检疫行业标准1SN/T5655.12023商品化试剂盒检测方法预包装食品致敏原免疫分析法第11部分:夏威夷果ittCommercalkitesmehodImmunoassayoffoodalergensinprepackagedfoodsPart11:MacadamiaNut-20231101发布20240501实施中华人民共和国海关总署发布学标准兔兔下载学兔兔标准下载1SN/T5655.12023前言本文件按照GB/T1.2020标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件为SN/T5655商品化试剂
2、盒检测方法预包装食品致敏原免疫分析法的第11部分。SN/T5655已经发布了以下部分:第1部分:麸质;第2部分:甲壳纲类动物;第3部分:蛋类;第4部分:花生;第5部分:大豆;第6部分:乳;第7部分:扁桃仁;第8部分:腰果;第9部分:榛子;第10部分:巴西坚果;第11部分:夏威夷果;第12部分:开心果;第13部分:胡桃。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位:中华人民共和国广州海关、韶关海关、中国海关科学技术研究中心。本文件主要起草人:董洁、郭敏、曾静、黄成栋、梁颖婕、刘津。学标准兔兔下载学兔兔标准下载1
3、SN/T5655.12023引言食品致敏原是普通食品中正常存在的天然或人工添加物质,被过敏体质人群消耗后能够诱发过敏反应。SN/T5655商品化试剂盒检测方法预包装食品致敏原免疫分析法规定了预包装食品中致敏原成分的酶联免疫吸附定量检测和胶体金免疫层析定性检测方法,旨在满足预包装食品致敏原标识、生产质控和食品安全检验监管的检测需求。SN/T5655商品化试剂盒检测方法预包装食品致敏原免疫分析法拟由下列13个部分构成。第1部分:麸质。第2部分:甲壳纲类动物。第3部分:蛋类。第4部分:花生。第5部分:大豆。第6部分:乳。第7部分:扁桃仁。第8部分:腰果。第9部分:榛子。第10部分:巴西坚果。第11部
4、分:夏威夷果。第12部分:开心果。第13部分:胡桃。学标准兔兔下载学兔兔标准下载1SN/T5655.12023商品化试剂盒检测方法预包装食品致敏原免疫分析法第11部分:夏威夷果1范围本文件规定了预包装食品中夏威夷果致敏原的胶体金免疫层析测定方法。本文件适用于预包装食品中夏威夷果致敏原的胶体金免疫层析定性检测,也适用于预包装食品生产过程对生产原料和环境样品中夏威夷果致敏原的定性监测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682
5、分析实验室用水规格和试验方法liiiiiiiiiAOACGuideinesforColaboratveStudyProcedurestoValdateCharacterstcsofaMethodofAnalyss.AppendixM:ValdatonproceduresforquanttatvefoodalergenELISAmethods:commu-tiniyguidanceandbestpractces3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。13.夏威夷果Macadamianut(lefi山龙眼科澳洲坚果属植物MacadamiatrniolaF.Mue)所产果实。注:又称澳洲胡桃、昆士兰
6、果。23.G胶体金免疫层析coloidalgoldimmunochromatographyassay;ICA以胶体金作为示踪标志物的一种免疫层析检测技术。注:通常为试纸条形式。4原理利用抗原-抗体特异性结合反应,对样品中的夏威夷果致敏原进行胶体金免疫层析试纸条检测。样品中的夏威夷果致敏原与预包被在反应管内的标记抗体发生反应,形成抗原-抗体结合物。此抗原-抗体结合物被预包被在免疫层析试纸条上的特异性抗体捕获,形成抗体-抗原-抗体的夹心复合物,并在检测区显色,通过目测判读检测结果。1学兔兔标准下载1SN/T5655.120235试剂和材料除特别说明外,实验用水应符合GB/T6682规定的三级水,所
7、有试剂均为分析纯。1iiiiiiiiiti5.夏威夷果致敏原胶体金免疫层析检测试剂盒:试剂盒按照AOACGuidelnesforColaboratveStudyProcedurestoValdateCharacterstcsofaMethodofAnalyssAppendixM:Valdatonproce-duresforquanttatvefoodalergenELISAmethods:communiyguidanceandbestpractces进行评价,评价结果见附录A。注:试剂盒详细信息见附录B。25.吸附缓冲液,按照附录C执行。:022,2324455.PBS-吐温缓冲液8.gNaC
8、l,0.gKCl,1.44gNaHPO40.24gKH2PO4,mL吐温-20,调pH至7.7.,用蒸馏水定容至1L。5.氯化钠(NaCl)。5.棉签拭子。6仪器和设备126.分析天平:感量0.1g。6.匀浆机。36.涡旋混匀仪。46.离心机:转速4000r/min。5156.单道移液器:00L1000L,00L5000L。7分析步骤17.环境拭子的采样11(7.吸取1mLPBS-吐温缓冲液5.3)到洁净的2mL离心管中,浸润棉签拭子5.5)。12(13(27.用浸润的棉签拭子7.1.)的棉头,擦拭大约10cm10cm面积的待检测环境表面。若无法实现10cm10cm的待检测环境表面擦拭,请自行
9、定义合理及合适的待检测环境表面范围并记录。7.将擦拭取样后的棉签拭子7.1.)放回装有PBS-吐温缓冲液的离心管中,充分浸洗并挤压使棉头与缓冲液充分融合和释放,取出挤干的棉签拭子。1417.从离心管中取0.mL用于检测。(2注:若棉签采样拭子7.1.)含有肉眼清晰可见的致敏原颗粒,则可能含有的致敏原超过1000mg/kg,建议将棉签拭子采样处理后的离心管中样品液,进一步稀释后,再用于检测。27.清洁用水的采样1直接取0.mL清洁用水用于检测。37.食品样品前处理和提取317.液体样品:量取不少于5mL样品,进行充分均质。320(7.固体样品:称取50.0g样品,向其中加入450mL水和4.0g
10、氯化钠5.4)后均质。置离心机2学兔兔标准下载8.2本方法对环境表面的拭子采样的检出限为1g/100cm(当采样面积为10cm10cm时),或1SN/T5655.120232中4000r/min室温(025)离心5min,取上清液用于检测。无离心条件时,可用粗滤纸过滤,得到滤清液用于检测。若离心后产生脂肪层,则轻挑除去脂肪层后,取脂肪层下的无脂肪清液用于检测。脂肪含量高的样品,宜进行冷冻离心以去除脂肪。33(02247.含多酚类的样品:对于如啤酒、葡萄酒、可可、调味料、中草药等样品,应使用吸附缓冲液5.2)进行样品前处理。吸取1mL液体样品或称取1.0g均质后的固体样品,加入已含有9mL吸附缓
11、冲液的样品管中,室温(025)孵育10min15min,边孵育边振荡。孵育结束后置离心机中于室温(025)000r/min,离心5min,取上清液用于检测。注:若样品中可能含有的致敏原浓度超过1000mg/kg,建议将样品提取液进一步稀释后,再进行检测。密封好的上清液或滤清液在28避光保存不超过2d。47.样品的测定1221、321向预包被标记抗体的反应管见B.a)中加入0.mL的流动相缓冲液见B.1c),再加入0.mL于7.7.2、7.步骤得到的样品提取液,盖上管盖充分混匀,于室温(025)孵育5min。向反应管中放入夏威夷果致敏原试纸条见B.b),反应5min,目测读取检测结果。注:强酸性或强碱性样品提取液调节pH值至7.50.后再检测。57.测定结果评估和表述51CC7.试纸条反应区包括2条结果条带,从上至
