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1、第4章1、 细胞全能性：一个植物细胞具有产生一个植株的潜力。2、 细胞分化：细胞后代在形态结构和功能上发生差异的过程。3、 脱分化：已分化的细胞转化成具有分生能力的细胞的过程。4、 再分化：已分化的细胞经过脱分化再次分化的现象。5、 外植体：从植物体分离并用于离体培养的材料。6、 愈伤组织：脱分化的细胞，经细胞分裂形成无特定结构、松散的薄壁细胞团。7、 胚状体：离体培养下没经过受精，但经过胚胎发育所形成的胚的类似物。8、 植物组织培养的定义、一般过程？答：植物组织在离体条件下和无菌条件下利用人工培养条件培养、生长、发育再生出完整植株的过程。过程：离体的植物器官、组织、细胞（脱分化）愈伤组织（再
2、分化）根芽植物9.离体条件下生长素与细胞分裂素在细胞分化的作用？答：生长素主要作用是诱导愈伤组织的形成、胚状体的产生以及试管苗的生根， 细胞分裂素主要作用是促进细胞的分裂和器官的分化、延缓组织的衰老、增强蛋白质的合成、抑制顶端优势、促进侧芽的生长及显著改变其它的激素作用。更重要的是配合一定比例的细胞分裂素诱导腋芽及不定芽的产生。10.常用的植物激素有哪些？写出英文缩写。答：生长素：吲哚乙酸（IAA）； 萘乙酸（NAA）；2，4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）； 吲哚丁酸（IBA）；植物分裂素：6苄基酰嘌呤（6-BA）；激动素（KT）；玉米素（ZT）。 第5、6章11、胚胎培养及分类?答：胚胎培养是
3、指将植物的胚胎与母体分离，在人工的培养基上培养形成幼苗的过程。根据培养中所取外植体的部位不同，包括幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养。12、茎尖脱毒的一般步骤？答：诊断：首先了解供试材料感染病毒的种类；茎尖培养脱毒或结合热处理 鉴定；繁殖；驯化移植13、快繁的一般步骤？答：1.无菌母体植株的制备（取材、植物激素、 防止褐化和有害物积累）2.不定芽增殖（增殖的途径：诱导形成大量胚状体；诱导形成大量不定芽；促进腋芽的快速形成；愈伤组织增殖）3. 完整植株的形成4. 再生植株的驯化5. 再生植株的鉴定（植物形态学鉴定；细胞学鉴定）14、请简述玉米胚胎培养的基本步骤？答：1）玉米种子
4、消毒2）在黑暗条件下，将种子放在无菌湿润的含滤纸的培养皿中培育6hr。3）将吸涨的种子在无菌培养皿内将胚分离出来4）无菌水冲洗3次5）在MS培养基中暗培养。6）观察：2d出现胚根，3-4 d出现胚芽，10d长成幼苗。15、胚胎培养的意义？答：克服杂种胚的败育，获得稀有杂种获得单倍体和多倍体植株打破种子休眠，促进胚萌发，缩短育种周期克服种子生活力低下和自然不育性，提高种子发芽率第7章16、 试比较花粉培养和花药培养的异同之处？答：(1)花药培养是器官培养，花粉培养是细胞培养。(2)花药培养一般选择花粉的单核期进行接种。(3)花药培养包括：选择材料-消毒-接种培养-愈伤组织生成-分化出单倍体植株。
5、(4)花粉培养包括：花粉的分离-预处理-培养过程。17、在花药培养中应注意哪些主要环节？答：选择合适的材料；选择最佳预处理时期；接种；环境。第8章18、 如何得到单离的细胞？答：诱导愈伤组织，通过继代，去松散的愈伤组织，通过霉处理得到单体细胞。 直接从外植体，通过机械法或霉处理方法获得。19、 单细胞培养有哪些方法？答：平板培养；看护培养；微室培养；悬浮培养；液体浅层培养。第9章20、 原生质体：指除去细胞壁的细胞或是说一个被质膜所包围的裸露细胞。21、 亚原生质体：在原生质体分离过程中，有时会引起细胞内含物的断裂而形成一些较小的原生质体就叫做亚原生质体。22、微小原生质体：由原生质膜和薄层细
6、胞质包围细胞核形成的小原生质体。也称为微小原生质体。23、胞质体：不含细胞核而仅含有部分细胞质的原生质体。24、为什么原生质体要培养在等渗培养基中？答：正常状态下，细胞壁使原生质不易受伤害，而原生质体细胞壁去除后，裸露的原生质体处于渗透压不同的情况下有可能吸水胀破或试水褶皱，所以在等谂培养基中保护原生质体的活力和纸膜的稳定性。25、植物体两细胞杂交的概念和类型？答：植物体细胞杂交是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。 类型：对称融合；非对称融合。26、PEG融合、电融合的原理和各自的优缺点?答：PEG融合：由于PEG分子具有轻微
7、的负极性，故可以与具有正极性基团的水、蛋白质和碳水化合物等形成H键，从而在原生质体之间形成分子桥，其结果是使原生质体发生粘连进而促使原生质体的融合。其优点是融合成本低，勿需特殊设备；融合子产生的异核率较高；融合过程不受物种限制。其缺点是融合过程繁琐，PEG可能对细胞有毒害。 电融合：在交变电场作用下，使原生质体因极化而产生偶极子，从而使原生质体紧密接触排列成串；在强度足够的直流电泳池，使膜发生电击穿，从而导致紧密接触的细胞融合在一起。优点：一是不存在对细胞的毒害问题；二是融合效率高；三是融合技术操作简便。缺点：不适用于大小下相差较大的原生质体融合；设备昂贵。第10章27、 种质保存的概念？答：
8、利用天然或人工创造的适宜环境，使个体中所含有的遗传物质保持其遗传完整性，高活力，能通过繁殖将遗传物质传递下去。28、 种质保存的方法有哪些？答：1、种子保存2、种植保存3、离体保存4、超低温冷冻保存29、 离体保存的意义？答：可使一些无性繁殖作物种质资源低温长期保存，避免资源的丢失。节省土地和劳力，方法简单，花费少并能在保存中脱毒。一旦利用可快速繁殖；也利于种质交换。30、 超低温冷冻保存的原理是什么？答：也叫冷冻保存，指在-196的液氮超低温下使细胞代谢和生长处于基本停止的状态，在适宜条件下可繁殖，再生出新的植株，并保持原来的遗传特性。第11章31、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组织
9、培养基有何独特之处？答：主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。、独特之处：液体培养基 成分中有动物血清等32、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？答：因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强。33、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？答：成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养。34、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？答：不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体。35、简述BSS的组成及用途。答：主要组成：无机盐、葡萄糖。作用：维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定，提供简单的营养。主用途：要用于取材
10、时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配制其它试剂等。 第12章36、什么是细胞系和细胞株？进行动物单细胞克隆的方法主要有哪些？答：细胞系：原代培养物经首次传代成功后即为细胞系, 细胞株：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养细胞称为细胞株。主要方法：有限稀释法、软琼脂克隆分离法。37、大规模培养动物细胞的技术主要有哪些？答：气升式培养系统 微载体培养系统中空纤维培养系统 微囊培养系统第13章38、比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的异同。答：比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用 途相同植物体细胞杂交细胞膜的流动性细胞的全能性形成植株去除细胞壁后诱导原生质体融
11、合离心、电刺激、振动、显微操作、聚乙二醇等试剂诱导克服远源杂交不亲和，获得杂种植株都有杂种细胞形成动物细胞融合细胞膜的流动性杂种细胞使细胞分散后诱导细胞融合同上，再加灭活的病毒诱导制备单克隆抗体的技术之一39、制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？答：B淋巴细胞具有产生单一抗体的能力，但不能在体外增殖；骨髓瘤细胞是一种癌细胞，它能在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体。因此，两种细胞融合后，可以产生既能体外增值又能产生抗体的杂交瘤细胞。40、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要步骤。答：细胞的选择与培养 细胞融合试验单克隆抗体检测 克隆化培养 杂交瘤细胞的鉴定 单
12、克隆抗体的大量制备单克隆抗体的鉴定 单克隆抗体的纯化第14章41、什么是克隆？克隆有哪几个层次？答：只由一个范本分子、母细胞或母本直接形成新一代分子、细胞或个体，就是无性繁殖，即克隆。在分子水平上-重组载体通过宿主细胞的无性繁殖使目的基因扩增，再用某探针选取、钓取目的基因。在细胞水平上-单克隆抗体：利用动物细胞融合技术将骨髓瘤细胞和能产生抗体的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞，再去培养，筛选到杂交瘤细胞系。在个体水平上-不通过两性细胞的结合，从一个单一的细胞繁殖出生物个体。42、核移植技术的一般操作程序？答：核移植克隆哺乳动物的技术操作过程主要包括核受体和核供体的处理和制备、核移植、重组胚的体外或体内培养、核移植胚胎移入代孕母畜（寄母）等步骤 。43、什么是治疗性克隆？治疗性克隆的目的和用途是什么？答：治疗性克隆指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中形成重组胚，把重组胚体外培养到囊胚，然后从囊胚内分离出ES细胞，获得的ES细胞使之定向分化为所需的特定细胞类型(如神经细胞，肌肉细胞和血细胞），用于替代疗法。 这种方法的最终目的是用于干细胞治疗，而非得到克隆个体。运用克隆技术获得人体早期胚胎，但目的不是将胚胎培育成人，而是为了提取全能型的胚胎干细胞，然后在合适的条件下，使其发育成为人体的任何一个器官，包括大脑、肌肉、血液和神经，这些器官组织将用于医疗。4
