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1、 学科分类号（二级）180.51本科学生毕业论文（设计）题目矮壮素对马铃薯米拉 试管苗生长的影响 姓名 学号 院、系 生命科学学院专业应用生物教育指导教师 职称（学历） 讲师（硕士研究生） 矮壮素对马铃薯米拉试管苗生长的影响摘要：以MS为基本培养基，以马铃薯米拉的试管苗为实验材料，研究矮壮素对马铃薯米拉试管苗生长的影响。结果表明，在MS培养基中加入100mg/L的矮壮素能有效仰制马铃薯试管苗腋芽的萌发，可使试管苗节间长度变短、茎变粗、叶片浓绿，保持马铃薯试管苗的正常生长，有利于培养出健壮的试管苗，达到壮苗的目的，有效防止试管苗发生徒长和倒伏现象。关键词：马铃薯试管苗；矮壮素；壮苗马铃薯（学名：
2、Solanum tuberosum），属茄科多年生草本植物，块茎可供食用，是全球第三大重要的粮食作物，仅次于小麦和玉米。马铃薯又称地蛋、土豆 、洋山芋等，茄科植物的块茎。是世界上种植和食用国家最多的作物，与小麦、玉米、稻谷、高粱并成为世界五大作物1。随着马铃薯生产的发展马铃薯茎尖脱毒离体培养2试管脱毒微型薯的诱导3-5等研究取得了很大的进展,很好地解决了由于病毒侵染积累品种严重退化的问题，并为大规模工厂化种苗繁育、品种资源的长期保存积累了经验，但频繁的继代培养过程中脱毒试管苗常常出现严重的徒长现象，不仅降低了有效繁殖倍数，而且影响到下一代扩繁。矮壮素(CCC)是一种优良的植物生长延缓剂，又名稻
3、麦立，它的化学名称为2-氯乙基三甲基氯化物。CCC是通过仰制赤霉素生物合成过程中GGPPCPP的环节来使植物生长延缓的。可用于小麦；水稻；棉花；烟草；玉米及西红柿等作物6-7，抑制作物细胞伸长，但不抑制细胞分裂，能使植株变矮，杆茎变粗，叶色变绿，可使作物耐旱耐涝，防止作物徒长倒伏，抗盐碱，又能防止棉花落铃，可使马铃薯块茎增大。马铃薯品种米拉中晚熟品种，生育期从出苗到成熟105-115天左右。株型开展，分枝数中等，株高60cm，茎绿色基部带紫色，生长势较强，叶绿色。抗晚疫病，所以适于无霜期较长、雨多湿度大、晚疫病易流行的西南一季作山区。本实验以米拉马铃薯试管苗作为材料，通过在MS培养基中加入不同
4、浓度的矮壮素，研究不同浓度的CCC对米拉马铃薯试管苗生长的影响。达到马铃薯试管苗壮苗的目的，提高马铃薯的生产效率。1、材料与方法1.1实验材料实验材料米拉（Mira）的脱毒试管苗有云南师范大学组织培养实验室提供。矮壮素采用四川国关实业公司的产品。1.2实验方法本次实验采用的是植物组织离体培养法，实验分为两个阶段，第一阶段是米拉脱毒试管苗的扩繁，第二阶段是加入不同浓度矮壮素对米拉试管苗的培养。1.2.1培养基的配制以MS培养基为基本培养基，以蒸馏水代替无菌水，加入不同浓度的矮壮素，PH值调至5.8，总共有6个矮壮素浓度梯度，每个梯度分装10瓶，分装到果酱瓶中，每瓶装50mL培养基，封口采用不透气
5、封口膜，放入高压灭菌锅进行常规灭菌。试验中采用的6种不同矮壮素浓度的培养基列于表1。表 1 含不同浓度矮壮素的培养基处理矮壮素（CCC）浓度水平（mg/L）1(对照)MS+02MS+203MS+504MS+1005MS+1506MS+2001.2.2接种从培养好的脱毒马铃薯米拉试管苗中选取大小均匀一致的试管苗，采用带一个叶片和腋芽的单节茎段，长度1厘米左右，将茎段腋芽朝上插在培养基上。总共6个处理，每个处理10瓶，每瓶接种5个茎段。整个过程在严格的无菌环境下进行。1.2.3培养条件将接种好的培养瓶放到培养室中进行培养，。培养室中的温度为251、光照时间为14h/d、光照强度为10001500l
6、x。1.2.4观察记录每7天观察和记录一次马铃薯米拉试管苗的生长情况，及时清理和统计污染数，培养到40天时记录结果。记录每一株苗的分支数、根数和叶数（叶数只记录可见叶的数量），株高用直尺测量从培养基以上到茎尖的部分，选取苗的茎段中间比较均匀的部分用游标卡尺测量其茎粗。记录完分支数、根数、叶数、株高和茎粗这几个数据后，把苗去除其根部放到烘箱中烘干（先在105温度下处理30min，再在80温度下处理12h），烘干后用分析天平测量其干重，计算其干重和株高的比值。2、结果与分析在恒温培养室里培养40d后，不同培养基培养马铃薯米拉试管苗的生长情况如图1所示。其根数、叶数、株高、茎粗和干重/株高的平均值及
7、其腋芽萌发情况的测定结果见表2。图1不同浓度CCC处理下马铃薯米拉试管苗的生长情况表2 不同浓度CCC对马铃薯米拉试管苗生长的影响浓度（mg/L）根数(条/棵)叶数（片/棵）株高（cm）茎粗（mm）分支（条/棵）干重/株高（mg/cm）07.0811.028.150.762.1116.820 6.99.884.630.920217.2850 7.16103.560.880176.4100 7.4210.42.220.980487.38150 7.479.882.060.950457.28200 5.6810.431.580.720651.6注：表中数据是接种后生长40d后数据，为调查样本的平均
8、值。2.1不同浓度CCC对米拉试管苗根系生长的影响根的主要作用是固定植物体，并从土壤里吸收水分和无机盐8。健壮的苗应该要有健壮的根作为基础。从表3中可以看出，在不同浓度CCC的影响下，只有当CCC浓度达到200mg/L时马铃薯米拉试管苗根的数量与其他几个浓度的表现出显著性差异。从表2中看出200mg/LCCC影响下马铃薯米拉试管苗的平均根数为5.68条，少于其余浓度影响下的根数。所以当CCC浓度达到200mg/L时马铃薯米拉试管苗的根数明显减少，不利于其生长。表3 在不同浓度CCC培养后马铃薯米拉试管苗根数的差异性因变量(I) 浓度(J) 浓度均值差 (I-J)标准误显著性95% 置信区间下限
9、上限根数LSD.0020.00.18000.42265.671-.65191.011950.00-.08000.42265.850-.9119.7519100.00-.34000.42265.422-1.1719.4919150.00-.38667.43423.374-1.2414.4681200.001.39818*.43682.002.53842.258020.0050.00-.26000.42265.539-1.0919.5719100.00-.52000.42265.220-1.3519.3119150.00-.56667.43423.193-1.4214.2881200.001.21
10、818*.43682.006.35842.078050.00100.00-.26000.42265.539-1.0919.5719150.00-.30667.43423.481-1.1614.5481200.001.47818*.43682.001.61842.3380100.00150.00-.04667.43423.914-.9014.8081200.001.73818*.43682.000.87842.5980150.00200.001.78485*.44804.000.90292.6668注：均值差的显著性水平为 0.05。2.2不同浓度CCC对米拉试管苗叶片数以及叶片生长的影响从表4
11、可看出，在CCC的各浓度梯度处理下，叶数与对照组无显著性差异。但是被CCC处理的马铃薯米拉试管苗的叶片与对照组相比，叶片变厚变大、叶色变深，叶绿素含量更高，有利于光合作用9。表4 在不同浓度CCC培养后马铃薯米拉试管苗叶数的差异性多重比较因变量(I) 浓度(J) 浓度均值差 (I-J)标准误显著性95% 置信区间下限上限叶数LSD.0020.001.14000*.38220.003.38771.892350.001.02000*.38220.008.26771.7723100.00.62000.38220.106-.13231.3723150.001.13111*.39267.004.3582
12、1.9040200.00.58818.39502.138-.18941.365720.0050.00-.12000.38220.754-.8723.6323100.00-.52000.38220.175-1.2723.2323150.00-.00889.39267.982-.7818.7640200.00-.55182.39502.164-1.3294.225750.00100.00-.40000.38220.296-1.1523.3523150.00.11111.39267.777-.6618.8840200.00-.43182.39502.275-1.2094.3457100.00150.
13、00.51111.39267.194-.26181.2840200.00-.03182.39502.936-.8094.7457150.00200.00-.54293.40516.181-1.3404.2546注：均值差的显著性水平为 0.05。2.3不同浓度CCC对米拉试管苗株高的影响从表5看出，在CCC不同浓度梯度处理下，马铃薯米拉试管苗的株高有显著性差异。但是浓度为100mg/L和150mg/L，150mg/L和200mg/L这两组的株高差异性不显著。从图1可看出CCC的浓度越高，试管苗生长越缓慢。图2不同浓度CCC对马铃薯米拉试管苗株高的影响表5 在不同浓度CCC培养后马铃薯米拉试管苗株高的差异性因变量(I) 浓度(J) 浓度均值差 (I-J)标准误显著性95% 置信区间下限上限株高LSD.0020.003.51400*.22361.0003.07383.954250.004.59200*.22361.0004.15185.0322100.005.92600*.22361.0005.48586.3662150.006.08356*.22974.0005.63136.5358200.006.55936*.23111
