胚状体苗与器官发生苗的区别

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1、胚状体苗与器官发生苗的区别胚状体苗 器官发生苗1. 最初形成多来自单个细胞，双向极性，两个 分生中心，较早分化出茎端和根端（方向相反）2. 胚状体维管组织与外植体维管组织不相连3. 具有典型的胚胎形态发生过程4. 形成的幼苗具有子叶5. 胚状体发育的苗，根和芽齐全，不经历诱导 生根阶段1. 最初形成多来自多细胞，单向极性，单个 分生中心2. 不定芽和不定根与愈伤组织的维管组织相 连3. 无胚胎形态，分生中心直接分化器官4. 不定芽的苗无子叶5. 一般先长芽后诱导生根，或先长根后长芽各种再生类型的特点比较再生类型外植体来源占八、无菌短枝型嫩枝节段 或芽一次成苗，培养过程简单，适用范围广，移栽容

2、易成活，再生后代遗传性状稳定，但初期繁殖较慢。丛生芽增殖型茎尖、茎段 或初代培养 的芽与无菌短枝型相似，繁殖速度较快，成苗量大, 再生后代遗传性状稳定。器官发生型除芽外的离体组织多数经历“外植体f愈伤组织f不定芽f生根f 完整植株”的过程，繁殖系数高，多次继代后愈伤 组织的再生能力下降或消失，再生后代易发生变异。胚状体发生型活的体细 胞胚状体数量多、结构完整、易成苗和繁殖速度快, 有的胚状体存在一定变异。原球茎发生型兰科植物茎尖原球茎具有完整的结构，易成苗和繁殖速度快, 再生后代变异几率小。生 境光照温度相对湿度养分气体试管苗弱，易调控适宜且恒 定高湿丰富光下CO2低，有害气体量高野生苗强,波

3、动大波动性大较低，波动大较贫瘠各种气体成分较恒定试管苗与实生苗生境的比较苗的类型叶片及其功能根系及其功能试管苗角质层薄，水孔多，气孔的生理活性差，保水能根系不发达，吸水能力力差；此外，叶绿体的光合性能也差。差。野生苗角质层较厚，水孔少，气孔的生理活性强；叶根系发达，吸水能力绿体的光合性能好。强。试管苗与实生苗形态结构与功能上的差异组培苗观察的内容与方法观察项目 外植体接 种后的变 化愈伤组织 诱导观察内容外植体的颜色、形态变化；灭菌效果；外植体成活率。愈伤组织形成的时间；长势；长相：颜色、形态、质地、大 小、位置；组织细胞有无变异；诱导率（或出愈率）。不定芽生 长与分化生根情况不定芽开始分化时

4、间；长势；长相：数量、颜色、形态、大 小、位置、苗高；组织细胞有无变异；分化率和增殖率、增 殖系数等。开始生根时间；长势：生长状态，根系发达程度；驯化移栽长相：根长、根数、根粗、根色、位置；生根率。 试管苗长势；有无变异；计算驯化移栽成活率。存在问题污染类型及污染率；褐化及褐变率；玻璃化及玻璃化苗发生 率；其他问题等。组培苗观察记录表观 察 记 录 时 间污 染 类 型污染率出愈率分化率增殖率生根率移 栽 成 活 率接种人或小组：外植体：接种时间：诱导培养基：分化培养基观察方法 目视观察目视；照相； 显微观察；计 算目视；照相； 显微观察；计 算目视观察；计 算目视观察；计算目视观察；实 际计

5、算生长分化情况处理建议接种瓶数：增殖培养基每瓶接种数：生根培养基：初始培养阶段的常见问题及调控措施常见问题产生原因调控措施培养物长期培养几乎无反应基本培养基不适宜，生长素不当或用量不足，温度不适宜。更换基本培养基或调整培养基成分，尤 其是调整盐离子浓度，增加生长素用 量，试用2,4-D，调整培养温度。培养物呈水渍状、变色、坏死、茎断面附近干枯表面杀菌剂过量，消毒时间过 长，外植体选用不当（部位或 时期）。调换其他杀菌剂或降低浓度，缩短消毒时间，试用其他部位，生长初期取材。愈伤组织过于致密、平滑或突起，粗厚，生长缓慢细胞分裂素用量过多，糖浓度过高，生长素过量。减少细胞分裂素用量，调整细胞分裂素与

6、生长素比例，降低糖浓度。愈伤组织生长过旺、疏松，后期水浸状激素过量，温度偏咼，无机盐含量不当。减少激素用量，适当降低培养温度，调 整无机盐（尤其是铵盐）含量，适当提 高琼脂用量增加培养基硬度。侧芽不萌发，皮层过于膨大,皮孔长出愈伤组织枝条过嫩,生长素、细胞分裂素用量过多。减少激素用量，采用较老化枝条。培养基和材料变褐产生原因及调控措施见下次课内容增殖培养阶段的常见问题及调控措施常见问题产生原因调控措施苗分化数量少、速度慢、分枝少、个别苗生长细高细胞分裂素用量不足，温度偏高，光照不足。增加细胞分裂素用量，适当降低温度，改善光照，改单芽继代为团块（丛芽）继代苗分化过多，生长慢，有畸形苗，节间极短，

7、苗丛密集，微型化细胞分裂素用量过多，温度不适宜。减少或停用细胞分裂素一段时间，调节温度。分化率低,畸形,培养时间生长素用量偏高，温度偏高。减少生长素用量，适当降温。叶增厚变脆生长素用量偏高，或兼有细适当减少激素用量，避免叶片接触培养基。胞分裂素用量偏高。幼苗淡绿，部分失绿无机盐含量不足，PH值不适宜，铁、锰、镁等缺少或针对营养元素亏缺情况调整培养基，调好PH值,调控温度、光照。比例失调，光照、温度不适。幼苗生长无力、发黄、落瓶内气体状况恶化，PH值变化过大，久不转接导致糖及时转接、降低接种密度，调整激素配比和营养 元素浓度，改善瓶内气体状况，控制温度。叶、有黄叶、死苗夹于丛已耗尽，营养元素亏缺

8、失调,生芽苗中温度不适，激素配比不当。再生苗的叶缘、叶面偶有 细胞分裂素用量偏高，或表不定芽的分化明该种植物不适于该种再生适当减少细胞分裂素用量，或分阶段地利用这一 再生方式。减少细胞分裂素用量，不用赤霉素，延长光照时 间，增强光照，及时转接，降低接种密度，更换 封瓶纸的种类。方式。丛生苗过于细弱，不适于细胞分裂素浓度过高或赤霉生根或移栽素使用不当，温度过高，光照短，光强不足，久不转移, 生长空间窄。生根阶段的常见问题及调控措施调控措施改进培养程序，选用适宜的生长素或增 加生长素用量，适当降低无机盐浓度， 改用滤纸桥液体培养生根等。常见问题培养物久不生根，基部切口没有适宜的愈伤组织产生原因生长素种类、用量不适宜；生 根部位通气不良；生根程序不 当；PH值不适，无机盐浓度 及配比不当。愈伤组织生长过快、过大，根 茎部肿胀或畸形，几条根并联 或愈合。生长素种类不适，用量过高, 或伴有细胞分裂素用量过高, 生根诱导培养程序不对。