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1、毕业设计（论文）开题报告题 目: 黑莓叶水溶性多糖部分性质研究 学 院： 海洋学院 专业班级： 食品科学与工程 食品082 学生姓名： 缪丽丽 学 号： 040811219 指导教师： 周鸣谦（副教授） 2012 年 6月 6 日淮海工学院毕业设计（论文）开题报告1.课题研究的意义，国内外研究现状、水平和发展趋势1.1课题研究的意义国际化妆品技术者联盟 （IFSCCInternational Federation of Societies of Cosmetic Chemists） 发布一项最新研究表示，黑莓叶提取物可能成为抗皮肤衰老领域一种全新的原料。据称由于该原料中含有胶原质和弹性蛋白等成
2、分，有助于防止皮肤皱纹的出现，从而具有较大的抗衰老功效通过研究，科学家发现，黑莓叶萃取物可起到抑制金属蛋白酶（MMP），特别是MMP1酶的作用。具体研究的许多数据都证明了这一新原料成分的抗衰老功效。另外，该研究小组人员还研究了其抗氧化性能，发现它基本能达到与绿茶相似的抗氧化功效。他们还表示，黑莓叶萃取物是由许多功能型原料组成的，如多酚物质和黄酮类化合物等，因此这种新型原料成分将受到产品生产商的欢迎是不无原因的。1.2国内外研究现状、水平和发展趋势近年来己风靡日本、欧州、美国及中东等国家市场，我国沿海发达地区也开始使用，据预测，随着人们生活水平的提高和保健意识的增强，以及工业发展、环境污染严重，
3、黑莓叶必将会成为保健治疗又一常规主导消费品，市场消费量大，前景看好。日本对黑莓叶也进行深入研究，证明黑莓叶含有天然止咳痰物质，富含抑制环氧酶、透明质酸酶活性物质及抑制过敏物质组胺游离的物质，能抑制血管透过性亢进，达到缓和鼻、眼、脸过敏，其功效明显优于木瓜、桔梗等植物；对花粉症等鼻炎过敏反应有明显疗效，日本是花粉过敏症流行的国家，特别是每到樱花盛开的季节，那些因花粉过敏而致鼻炎、咳喘的人，纷纷喝黑莓叶以祛痰保安康，近年来黑莓叶己被日本推祟为第二代保健饮料而钟爱有加，黑莓叶作为防治花粉过敏的原料，其保健食品在日本也颇为畅销。另外，研究人员发现采用黑莓叶提取物的制成的化妆品可改善皮肤的瘙痒，并抑制皮
4、肤及血管壁内透明质酸的下降，间接地湿润皮肤，达到美容效果。资生堂制成欧珀莱-“柔和洁面膏”,主要成份是黑莓叶提取液，可抑制透明质酸的分解，防止皮肤保湿功能的下降，使肌肤保持嫩滑富有弹性。香港天鑫集团公司开发成功“黑莓叶靓白面膜”，主要成分是黑莓叶中富含具有抑制黑色素的天然还原物质，能分解沉积在生长层的黑色素，有效阻碍酪氨酸酶的活性，防止色斑形成，淡化色素，阻止皮肤衰老，使皮肤更自然更美白更有弹性。这一研究的结果将于今年年底公开，届时有望为社会各行业带来更多更有效的关于这一新原料的利好消息。他还表示，这一提取物适用于一系列的抗衰老产品配方中，包括脸部和身体用的各种霜、露和乳状物质等。目前市场上尚
5、未出现含有该成分的产品，但已经进入了消费者产品实验阶段。也有专家表示对这一研究结果非常满意，相信在不久的将来，黑莓叶萃取成分将不仅出现在传统的医药领域，业绩成分很多抗衰老型化妆品及护理品中广受欢迎的成分。淮海工学院毕业设计（论文）开题报告2.课题的基本内容，可能遇到的困难，提出解决问题的方法和措施2.1课题的基本内容2.1.1 黑莓叶水溶液多糖的提取工艺流程：前处理浸提取上清夜重复提取三次，合并上清液减压浓缩乙醇沉淀离心分离提取物初步鉴定粗多糖2.1.2 黑莓叶水溶性多糖的纯化工艺流程：多糖粗品去蛋白、脱色透析上DEAE纤维素柱层析进行梯度洗脱蒽酮硫酸法进行跟踪检测合并主峰真空浓缩、透析上Se
6、phadex-100凝胶柱层析洗脱蒽酮硫酸法进行跟踪检测分子量测定(1)提取液中蛋白质的去除。(2)小分子化合物的去除。2.1.3 黑莓叶水溶性多糖糖基组成的分析(1)不同展层系统对分离效率的影响(2)不同体积比对分离效率的影响(3)不同展层时间对分离效率的影响2.1.4 溶解度实验2.2可能遇到的困难在做实验的过程中，我们会遇到一些实验仪器不会用，测量方法不正确等问题，我们是一群未经过专业培训的学生，实验测量的数据肯定会偏离实际，停留在理论上。2.3提出解决的方法和措施当遇到设计技术难题时，老师必定是解决问题的首选，我们要多与我们的导师交流沟通，把我们在实验过程中遇到的问题向老师反馈，并麻烦
7、导师时时检查我们的实验结果和进程，做到有错误立马纠正，不要等到事后返工。实验过程中我们还要与身边的同学多交流，我们时刻相信集体的智慧是无穷的。3.课题拟采用的研究手段（途径）和可行性分析3.1研究手段做实验的前提必须要掌握许多实验原理，在大学前三年，我们有生物化学、食品分析等专业课的铺垫，在实验过程中我们得学以致用。在做实验之前我们得阅读大量关于植物提取多糖方面的论文，从中总结一些分离、纯化方法。再结合实验确定具体的方法，查阅大量书籍，争取做到把每个知识点都能掌握。3.2可行性分析随着人们生活水平不断提高，人们有条件去追求高品质的物质生活，这就给保健品市场创造了极大的利润空间，也保证了保健品企
8、业的生存空间。而且在大学课程中已学习了生物化学、食品化学、食品分析等专业课程，加上对提取多糖步骤也有一定的了解，并且本设计的指导老师在多糖方面进行了深度研究并取得一定成果，所以本设计是可行的。淮海工学院毕业设计（论文）开题报告指导教师意见（对课题的深度、广度及工作量的意见和对设计结果的预测）指导教师（签名） 年 月 日系审查意见：系主任(签名)： 年 月 日毕业设计(论文)外文资料翻译学 院： 海洋学院 专业班级： 食品科学与工程 食品082 学生姓名： 缪丽丽 学 号： 040811219 指导教师： 周鸣谦(副教授) 外文出处：Carbohydrate Polymers 83(2011)：
9、19471951 附 件：1.外文资料翻译译文； 2.外文原文 指导教师评语：签名： 年 月 日干枸杞水溶性多糖的分离、结构特点和抗氧化活性摘要本实验的目的是研究纯化枸杞多糖（PLBP）的保护效应。枸杞多糖能抵抗组织氧化损伤，它是从枸杞干果中通过沸水提取而来。粗多糖通过离子交换柱分成七个小成分和一个主要成分。其主要成分即为枸杞多糖。将枸杞多糖进行了分析，结果表明平均相对分子质量是1.21105.糖类主要的吸光率主要出现在3400.38、2930.49、1629.66、1411.40、1151.44、1078.24、1032.50、920.72、864.33、817.08、777.04cm-1
10、PLBP中的清除自由基检测出来。此外，给动物服用PLBP30天后会发现丙二醇和抗氧化酶活性水平明显下降。结果清除地表明PLBP能抗氧化和保护皮肤不受氧化损伤。1.简介皮肤是一种保护层，使有机体免受外界环境的感染。生物体内抗氧化剂保护组织不被氧化。然而组织内部抗氧化剂的水平随着寿命慢慢下降。因而导致对组织氧化的保护减少。随着时代的发展，氧化应激开始抑制组织的反应能力，导致微妙变化的累积，从而加快老化的过程和慢性炎症的产生。罗斯参加过许多皮肤紊乱的研究例如：皮肤癌、着色性干皮病、皮肤老化。近些年来，人们更多的关注于天然抗氧化剂，特别是植物多糖，对于由于年龄引起的氧化损伤具有很好的保护作用。枸杞是常
11、年生的具有地方性种植的植物。在韩国、日本、中国广泛应用于医药中，作为功能性食品已经有25年的历史。现代研究表明，从枸杞中分离的多糖具有生物活性，包括抗氧化活性。然而许多报告表明随着年龄的增长，人的皮肤不断受到氧化损伤，为了阐述这些变化如何产生，我们研究年龄相关的变化和PLBP的抗氧化活性。2.材料和方法2.1材料枸杞干果，一般生长在中国宁夏，原料风干在室温下，其他分析纯是商业上可用。2.2多糖的提取 把枸杞干果（200g）放在装有石油醚（沸点60-90）索氏抽提器中进行脱脂，已经处理过的用80%乙醇回流两次去除有色物质、单糖、多聚糖、小分子物质。用蒸馏水浸泡2小时，用水提取4小时，浓缩后提取物
12、进行冻干，粗多糖在-20保藏，残渣风干。2.3多糖的纯化多糖的纯化采用DEAE-纤维素柱层析，50毫克粗多糖溶解在10毫升水中，加入到已经用蒸馏水平衡的DEAE-纤维素柱中（3厘米45厘米），用NaCl（0-3M）洗脱，直到糖不能检出。利用硫酸-蒽酮法测出每种成分中的糖的含量，把洗脱后收集的糖合并起来在水中透析（截留量14000）24小时并且低压冻干，其中一共检测出七种小成分和一个主要成分，主要成分是纯化的枸杞多糖。2.4分子量的测定PLBP的分子量采用凝胶液相色谱法.凝胶填料柱（30cm0.32cm）保持在35,泵（沃特世590号）。流动相是0.7%Na2SO4缓冲溶液，流速是0.5ml/m
13、in.在分析前样本采用0.45m的过滤膜进行过滤，再把过滤好的样品注入到注射器中，注射器的容量是25毫升，在35下通过示差折光检测器进行检测，用标准右旋糖苷键将柱进行校正，通过软件进行分子量推算。2.5红外光谱 光谱通过重法探测器收集在750福利叶变换红外光谱仪中，样品溶于溴化钾中（每200mg溴化钾中有2mg个样品），溴化钾圆盘作为底色。2.6 DPPH自由基清除活性 提取物的自由基活性，以稳定的1,1-二苯基苯肼（DPPH）作为抗氧化剂评价标准。将提取物（0.1ml）添加到3ml0.004%甲醇DPPH溶液中。30min后在517nm处进行吸收测定，抑制活性的百分比通过(A0-A1) 10
14、0/A0估算而来，其中A0是吸光度，A1是吸收精华液、标准2.7动物实验 将来自中国沈阳小动物繁殖中心的雄性的鼠36020g(超过24月)或14523g(2个月)放在一个能被控制的环境下一个星期，此环境可以自由使用食物和水。根据中国医科大学机构动物伦理委员会的规则和法规处理动物。 动物体重约14523g(2个月)作为正常年轻控制组（1组）。动物体重大约36020g(超过24个月)作为老龄动物组（2组），第二组被分为三个小组，每组有六种动物，三个组分别为：未处理的、服用低剂量的多糖组（200和400mg/kg）、服用高剂量的多糖组（3组和4组）。在老龄动物组中的两组中服用多糖，每日一次，连续30天。同样，动物在年轻组合老龄组两组对照组中加入蒸馏水进行控制。在最后加入剂量的24小时后，动物死亡。从腹
