液相色谱测定双酚A摘 要：由于双酚A在水样中通常为微量甚至痕量级，且水样基体复杂，干扰物 多，往往难以直接测定，必须经过样品富集处理(包括萃取、洗脱、净化、浓缩、 定容等步骤)后才可进行分析，本实验采用了高效液相色谱法对水样中双酚A 的测定关键词：双酚A；高效液相色谱；水样双酚A(BPA)是一种重要的有机化工原料主要用于生产环氧树脂、聚碳酸 酯、聚砜树脂的单体；又可用作酚醛树脂、可塑性树脂的生产原料和橡胶、 塑料、农药、油漆、油墨等的抗氧化剂及稳定剂；在食具、食品包装材料、 塑料制品、防腐涂料、外科修补术用的填充物、输配水及贮水材料等方面应 用广泛…BPA在一定条件下会因溶出、迁移、排放及事故等原因进入水体 研究表明BPA不仅对水生生物有急性毒性，而且还具有雌激素的特性，是环境 内分泌干扰物之一，可影响人或动物的中枢神经系统和生殖免疫系统，降低人 或动物的生殖繁衍能力，并被怀疑诱发生殖系统和心血管系统的癌变等因 此，水样BPA的测定具有十分重要的意义目前，水样中BPA的常规测方法主要有气相色谱一质谱联用法(GC—MS)、 液相色谱一质谱联用法(LC一MS)、液相色谱一多级质谱联用法(LC一MS一MS)以 及高分辨色谱一高分辨质谱法(HRGC/LC —HRMS)No］等，Gomes…、任仁…、 赵利霞等先后对此进行了评述。
基于色谱或色一质联机的BPA检测方法灵敏度 高、选择性好，因此，本实验采用高效液相色谱法测定水中的双酚A高效液相色谱法(High Performance Liquid Chroma tography \ HPLC )又 称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色 谱”等高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输 液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵 入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实 现对试样的分析该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领 域中重要的分离分析技术高效液相色谱有高效液相色谱法有“四高一广”的特点：①高压：流动相为液 体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高 压②高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分 析一个样品在15〜30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时 ③高效：分离效能高可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏 塔和气相色谱的分离效能高出许多倍④高灵敏度：紫外检测器可达0.01 ng,进 样量在yL数量级。
⑤应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相 色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显 示出优势色谱柱还有可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点，但也有缺点，与气 相色谱相比各有所长，相互补充高效液相色谱的缺点是有'柱外效应”在从进 样到检测器之间，除了柱子以外的任何死空间(进样器、柱接头、连接管和检测 池等)中，如果流动相的流型有变化，被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地 导致色谱峰的加宽，柱效率降低高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱1.实验部分1.1仪器及试剂主要仪器：Agilentl200液相色谱，固相萃取装置，天平，旋转蒸发仪， 氮气吹干仪，PH计，冷冻干燥机试剂：BPA标准品，乙腈、甲醇、正己烷、二氯甲烷、四氯化碳、均为色 谱纯，高纯水1.2标准溶液的配制称取0.1 g的BPA，配制成500 mg・L-1BPA甲醇储备液，保存于4°C冰箱待 用实验时逐级稀释配制成低浓度的BPA水溶液1.3环境样品的米集水样采集后立即放入2-8C保温箱中保存1.4液相色谱分析条件色谱柱：30mx0.25mm（内径）X0.25 （膜厚），HP-5MS固定相；柱温：80°C（保持 lmin）,以 20°C/min,至 300°C（保持 3 min）；进样口温度：250 C；色谱/质谱接口温度：280C；载气：氦气，纯度〉99.99%, 柱流量1.0mL/min；流速：lml/min进样量：5 L比例相：90%1.5工作曲线称取0.1009g BPA固体粉末溶解于甲醇中，定容至lOOmL作为储备液后用流 动相逐级稀释，配制成一系列浓度的双酚A对照溶液，进行测定。
以峰面积对浓 度作图，得到工作曲线如下表线性方程为y = 4.5138x +12.7962，线形相关 系数为：R2 =0.999932•水样的前处理水样采用液-液萃取法将水样过0.45 口 m滤膜，量取1L倒入分液漏斗中，分 次加入30、30、20 mL CH2C12，摇匀，合并萃取液，后用旋转蒸发仪浓缩到约 0.5 mlmL，氮气吹干，用甲醇定容到1mL，4°C下保存，备用3.环境样品中BPA含量的测定温度：25 °C 流速：lml/min 进样量：5 L 浓度：lppm比例相80%85%90%93%95%出峰时间5.0314.1473.6523.4393.363峰面积4953.24727.44635.64648.64680.8峰高752.5841.3842.6685.5636.3峰宽0.10080.08560.08420.10410.1098比例相：90% 流速：lml/min 进样量：5 口 L 浓度：lppm温度/C20232425出峰时间3.6693.6523.633.652峰面积4619.14594.54570.34635.6峰高823.9818826.1842.6峰宽0.08640.08550.08450.0842比例相：90% 进样量：5 口 L温度：25C 浓度：lppm流速(ml/min)0.50.81.0出峰时间7.1024.4593.652峰面积9004.35641.24635.6峰高967.2859.5842.6峰宽0.14620.10060.0842比例相：90% 流速：lml/min 温度：25°C 浓度：1ppm进样量/ 口 L35710出峰时间3.5913.6523.583.575峰面积2725.44635.663479048峰高546.2842.6893.71112.2峰宽0.07620.08420.11390.1289标准曲线：比例相：90% 流速：lml/min进样量：5 口 L温度：25C浓度/ppb1510501005001000出峰时 间3.5593.563.563.5593.5583.5453.558峰面积10.328.151.9241.9474.223114504.8峰高1E03.56.833.667330.9841.1峰宽0.14420.11760.11280.10810.10660.11050.0825y = 4.5138x +12.7962 R2 =0.99993利用以上方法对水样进行检测，具有简便、快速、灵敏度高等特点，适用于水中 痕量双酚A的快速测定。
参考文献：[1 ] HEATHERM.STAPLETON,JOSEPHG.ALLEN, et al. Alt erna te and New Brominated Flame Retardants Detected in U.S. House Dust [J] .Environ.[2]林少彬，廖岩，张淼，等.液相色谱一串联质谱法快速鉴定输配水 材料中双酚A[J].中国卫生工程学，2007, 6(3)： 138—140.[3 ]庄惠生，唐舒雅.微量环境荷尔蒙类物质双酚A的荧光分析研究 [J].中国环境监测，2006，22(3)： 17—19.。