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1、 河南科技大学本科毕业设计论文目录第一章大豆异黄酮的提取方法11.1乙醇提取法11.2 酸水解提取法2第二章大豆异黄酮的性质22.1 溶解性32.2 紫外最大吸收波长32.3 水解4第三章大豆异黄酮的作用研究53. 1 抗癌防癌53.2 对骨代谢的作用63.3 预防心血管等其它疾病7第四章总结7参考文献8摘要：大豆异黄酮是黄酮类化合物的一种，简要介绍了大豆异黄酮的物理化学性质和大豆异黄酮的提取和纯化研究进展。天然大豆异黄大豆异黄酮是大豆生长过程中形成的一类次生代谢产物。大量研究表明大豆异黄酮在防癌抗癌、防治心血管疾病、预防骨质疏松症等方面有重要作用。本文主要对他的提取方法以及性质作用进行分析论
2、证。关键词：大豆异黄酮 提取方法 性质作用研究Abstract: soybean isoflavone is a kind of flavonoids, briefly introduced the research progress of extraction and purification of the physical and chemical properties and soybean isoflavone of soybean isoflavone. Natural soy isoflavone. Soy isoflavones are a class of secondary
3、metabolites in the growth of soybean. A number of studies have shown that soybean isoflavone has an important role in anticancer, prevention and treatment of cardiovascular diseases, prevention of osteoporosis. This paper mainly analyses the extraction methods and properties for his.Keywords: nature
4、 of extraction methods of soybean isoflavone异黄酮是黄酮类化合物的一种，主要存在于大豆科植物中，是大豆生长中形成的一类次生代谢物。大豆异黄酮主要存在于大豆种子的子叶和胚轴中，种皮含量极少。目前已经发现的大豆异黄酮共有12种，分为游离型的甙元和结合型的糖甙两类。1甙元为其中的生物活性成分并且含量极少，占总含量的23，分别为大豆黄素、黄豆黄素及染料木素。对应的B一葡萄糖苷形式为：大豆黄苷、黄豆黄苷、染料木苷。另外还有较少的葡萄糖苷的乙酰基化合物和丙二酰基化合物。研究表明，大豆异黄酮具有预防癌症、心血管疾病、骨质疏松症和降低妇女更年期综合症等生理功能。该产
5、品具有广阔的开发前景和新的应用价值。第1章 大豆异黄酮的提取方法在自然界中大豆异黄酮的资源十分有限，作为一种具有广阔开发前景的药用植物活性成分，如何高效率地提取大豆异黄酮、确定最佳的提取纯化方法显得尤为重要。近年来国内外学者对大豆异黄酮的提取及分离纯化工艺进行了大量的研究，现将其主要研究进展做一简述，为进一步研究开发提供资料 。1 .1乙醇提取法：豆粕中蛋白质含量很高，用醇提取异黄酮时，一方面要求异黄酮的提取率要高；另一方面要求蛋白质的提取量低。因为蛋白质的存在不利于提取液的浓缩和异黄酮的分离操作，因此需要对醇提工艺条件进行优选。江英等对乙醇提取工艺进行了单因素考察。大豆粕粉碎后过40目筛，先
6、用乙醚回流脱脂至乙醚液无色，分别采用不同乙醇浓度、物料比、提取温度和提取时间进行提取。以紫外分光光度法测定异黄酮含量。以60乙醇提取，物料比18：1，温度60 ，提取时间2h为最佳。朱仕房等用正交实验筛选了大豆异黄酮的提取方法,以染料木黄酮、黄豆苷元和大豆黄素混合对照为指标，用HPLC法进行测定。结果发现最佳条件为：80 的乙醇，不小于18：1的物料比(溶剂：原料)，时间1h，温度不超过50 ；如以染料木黄酮作为目的产物，则温度宜升高至70 。鞠兴荣等通过单因素实验和正交试验对大豆异黄酮提取工艺中提取溶剂、料液比、温度、时间等因素进行了探讨，以大豆异黄酮提取回收率及干扰物质量为指标，确立最佳提
7、取条件。试验结果表明：采用70 的乙醇溶液为取剂，固液比1：5，在50温度下浸提二次，每次lh总转移率可达95 以上，且干扰物质量较低。袁龙等 用正交实验进行了提取条件筛选，结果70 的乙醇，50下对豆粕重复提取3次，每次10 h，异黄酮的提取率达到最高，而蛋白质的提取量最低。并认为，要得到纯度较高，与天然大豆成分一致的异黄酮产品，在提取液中必须用HE1等强酸进行异黄酮与糖和蛋白质的分解和分离。胡卫新等 同样采用正交实验进行了提取条件的研究，以70的乙醇，固液比(豆粕：溶剂)l：10，70提取豆粕3次，每次15h，可使总大豆异黄酮的提取率最高，而蛋白质的提取率较低。且提出采用盐析和等电点沉淀工
8、艺分离除去提取液中的大豆蛋白质，pH值在4101下，加入30(mv)的ZnC1 ，大豆蛋白质的分离除去率最高。12 酸水解提取法大豆异黄酮绝大部分是以苷的形式存在的，药理研究表明苷元形式的异黄酮比糖苷形式的异黄酮具有更高的生物活性2。大豆异黄酮苷能被稀酸催化水解成为苷元。用醋酸、硫酸等均可发生水解。但从实际生产和经济实用角度考虑，一般选用盐酸。汪海波等 以脱脂大豆粕为原料，采用酸水解后用无水乙醚萃取的方法提取游离型异黄酮成分。实验结果表明酸水解异黄酮的提取率和产品纯度均高于醇浸提法；张炳文等u 通过正交实验确立了糖苷型大豆异黄酮转化为游离型大豆异黄酮的最佳酸水解工艺条件：盐酸甲醇溶液的浓度为2
9、molL，水解温度为80 ，水解时间为60 rain，水解前后大豆素的含量由022增加至1401 ，染料木素的含量由002 增加至2345 。 第二章 大豆异黄酮的性质大豆异黄酮是一种混合物，其结构主要有三种：葡萄糖苷配基(aglucone)、葡萄糖苷(glucone和结合葡萄糖苷(conjugated glucone)，葡萄糖苷配基以游离的形式存在于大豆中，主要有染料木黄酮(genistein)、黄豆苷元(daidzein)和大豆黄索(glycintein)，这三种异黄酮在大豆籽粒中含量甚少，约占异黄酮含量的23。大豆籽粒中有9r7- 98的异黄酮是以葡萄糖苷和结合葡萄糖苷(conjugat
10、ed glucone)的形式存在。天然植物中存在的异黄酮以游离型苷元和结合型糖苷两种形式存在，大部分以结合成苷的形式存在。大豆异黄酮在通常情况下为固体，熔点大都在100oc以上，常温下性质稳定，呈黄白色，粉末状，无毒，有轻微苦涩味，在醇类、酯类和酮类溶剂中有一定溶解度，不溶于冷水，易溶于热水，难溶于石油醚、正己烷等。大豆异黄酮在水中的溶解度在4050没有明显变化，在7090时其溶解度随着温度的升高而显著增加。大豆异黄酮中的结合葡萄糖苷(conjugated glucone)在加热和碱性条件下可以水解去掉丙二酰基和乙酰基而转化成葡萄糖苷。碱水解条件pH值为8一l3，水解程度随pH值及温度的升高而
11、加大。而大豆异黄酮葡萄糖苷在强酸高温或酶存在的条件下可水解去掉葡萄糖基而转变成葡萄糖苷配基形式。2.1 溶解性大豆异黄酮易溶于丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯等弱极性溶剂中。在水溶性上，与大豆异黄酮的结构有关。游离型的大豆异黄酮水溶性最差，基本不溶于水。葡萄糖苷型、乙酰基葡萄糖苷型、丙二酰基葡萄糖苷型一般易溶于水。但染料木苷难溶于水，在水中的溶解度在4-50C没有明显变化，在7090C时其溶解度随着着温度的升高而显著增加问。在大豆制品加工过程中，浸泡使1 0的异黄酮流失于浸泡水中。水煮加热使大量异黄酮因溶于热水而丢失3。 例如在丹贝生产过程中，水煮使异黄酮丢失了约49；但在豆腐和豆奶生产过程中，由于
12、加热水最后成为产品的组成部分，所以，热处理未造成产品中异黄酮的显著丢失。对于乙醇水溶液来说，丙二酰基葡萄糖苷型异黄酮在水溶性上比葡萄糖苷型异黄酮更强，更易溶于低浓度的乙醇，而葡萄糖苷型异黄酮则更易溶于高浓度的乙醇溶液。用60,-65的乙醇水溶液洗涤浓缩法提取的大豆浓缩蛋白，其中异黄酮含量仅为原料中的11 12o【-司或更低07。2.2 紫外最大吸收波长以甲醇为溶剂时，染料木黄酮入 _261rim；黄豆苷元 =249nm，在31lnm处有一个很小的肩峰；黄豆黄素 =257rim，在319rim处有一肩峰19131。以95乙醇为溶剂时，染料木黄酮和染料木苷kn-26Ohm；黄豆苷元和黄豆苷入 -2
13、54rim； 黄豆黄素苷以95乙醇为溶剂时，染料木黄酮和染料木苷最大吸收波长(k-260nm)处的摩尔消光系数为10451：黄豆苷元和黄豆苷最大吸收波长( 254nm)处的摩尔消光系数为1(14弗：黄豆黄素苷最大吸收波长(k=260nm)处的摩尔消光系数为104,q2o稳定性大豆种子中3种丙二酰基异黄酮葡萄糖苷具有热不稳定性，5C贮存5d即自动水解为葡萄糖苷。丙二酰基葡萄糖苷型异黄酮干热处理后分解得到乙酰基葡萄糖苷型异黄酮。4例如，经过热处理的大豆分离蛋白、组织蛋白和炒大豆等制品中的乙酰基葡萄糖苷型异黄酮含量很高，占总异黄酮含量的3O50tI.丙二酰基葡萄糖苷型异黄酮和乙酰基葡萄糖苷型异黄酮，
14、在加热和碱性条件下，可以去掉丙二酰基和乙酰基而转化成葡萄糖苷型异黄酮。Coward等 研究发现，在较高的温度下，丙二酰基染料木苷(6 0malonylgenistin)和乙酰基染料木苷(6 0acetylgenistin)可产生脱酯化作用生成丙二酸甲酯、乙酸甲酯和染料木苷；Pandjaitan等吲在此基础上进一步研究指出，其最佳转化温度为5O5；此外，大豆异黄酮提取液在贮存过程中也会发生染料木苷衍生物向染料木苷的转化鲫。葡萄糖苷型异黄酮在强酸高温或酶存在下，可水解去掉葡萄糖基而转化为苷元型异黄酮。葡萄糖苷型异黄酮向苷元型异黄酮的转化效率受加工方式(如浸泡、发酵)以及添加外源酶等的影响较大。2.3 水解大豆异黄酮糖苷的水解可
