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1、2007生化名词解释30分1.肽单元：肽单元（peptide unit），肽键中的4个原子及相邻的2个-C原子重复形成的长链结构。对肽链的一级结构而言，是肽链中的氨基酸残基；对肽链的高级结构而言，则是肽键组成的肽平面。 2.模体：模体(motif)属于蛋白质的超二级结构，由2个或2个以上具有二级结构的的肽段，在空间上相互接近，形成一个特殊的空间构象，并发挥专一的功能。一种类型的模体总有其特征性的氨基酸序列。 3.抑癌基因：抑癌基因也称为抗癌基因。正常细胞中存在基因，在被激活情况下它们具有抑制细胞增殖作用，但在一定情况下被抑制或丢失后可减弱甚至消除抑癌作用的基因。正常情况下它们对细胞的发育、生长
2、和分化的调节起重要作用。4.核内小RNA：small nuclear RNA;snRNA。它参与真核生物细胞核中RNA的加工。snRNA和许多蛋白质结合在一起成为小核核糖核蛋白（snRNP即small nuclear ribonucleoproteins），参与信使RNA前体（pre-mRNA）的剪接，使后者成为成熟mRNA。真核细胞核内参与剪接的富含U的小分子RNA。5.酶原酶原：（zymogen） 某些酶在细胞内合成或初分泌时没有活性，这些没有活性的酶的前身称为酶原(zymogen),使酶原转变为有活性酶的作用称为酶原激活(zymogen activation)。 6.LCAT：卵磷酯胆固
3、醇酯酰转移酶，通过抽血检测肝脏疾病及代谢性疾病的一项医学检测。急性肝炎病人的血浆LCAT活性减弱，酒精性肝病患者血浆LCAT活性增高。7.guantly binding protein：(共十个，不全，一半为英文)二、填空20分(简单)三、判断20分三、简答70分1. 蛋白质结构与电泳，电泳分离同工酶的原理蛋白质分子是由氨基酸首尾相连而成的共价多肽链，但是天然蛋白质分子并不是走向随机的松散多肽链。每一种天然蛋白质都有自己特有的空间结构或称三维结构，这种三维结构通常被称为蛋白质的构象，即蛋白质的结构。 一级结构：构成蛋白质的单元氨基酸通过肽键连接形成的线性序列，为多肽链。 一级结构稍有变化，就会
4、影响蛋白质的功能。 二级结构：一级结构中部分肽链的弯曲或折叠产生二级结构。多肽链的某些部分氨基酸残基周期性的空间排列。 卷曲所形成的二级结构称为-螺旋，折叠所形成的二级结构称为折叠片。这两种二级结构的形成都是 由于距离一定的NH基团和C=O基团之间形成氢键的。 三级结构：在二级结构基础上进一步折叠成紧密的三维形式。三维形状一般都可以大致说是球状的或是纤维状的。 四级结构：由蛋白质亚基结构形成的多于一条多肽链的蛋白质分子的空间排列。 超二级结构：是指在多肽链内顺序上相互邻近的二级机构常常在空间折叠中靠近，彼此相互作用，形成规则的二级结构聚集体。能催化同一反应而蛋白质结构不同的酶，称为同工酶。同工
5、酶的蛋白结构既然有差别，它们的理化性质也就有所差异。因此可用电泳或其他方法将它们分离开来。2. 基因工程的步骤，其与DNA重组的关系，基因工程的理论意义与现实意义1.获取目的基因是实施基因工程的第一步。 2.基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。 3.将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。 4.目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。基因工程（genetic engineering)是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制
6、、转录、翻译表达的操作。它是用人为的方法。从广义上讲,任何造成基因型变化的基因交流过程,都叫做基因重组。而狭义的基因重组仅指涉及DNA分子内断裂复合的基因交流。遗传工程的用途主要是用来形成自然界中没有的生物新品种、新物种，进而利用这些生物生产人类所需要的其他产品，可用于医疗。如基因工程干扰素，基因工程乙型肝炎疫苗等等。3. 何谓操纵子？乳糖操纵子模型？操纵子（operon）：指启动基因、操纵基因和一系列紧密连锁的结构基因的总称。转录的功能单位。很多功能上相关的基因前后相连成串，由一个共同的控制区进行转录的控制，包括结构基因以及调节基因的整个DNA序列。主要见于原核生物的转录调控，如乳糖操纵子、
7、阿拉伯糖操纵子、组氨酸操纵子、色氨酸操纵子等。乳糖操纵子包括调节基因、启动基因、操纵基因和结构基因。当在培养基中只有乳糖时由于乳糖是lac操纵子的诱导物，它可以结合在阻遏蛋白的变构位点上，使构象发生改变，破坏了阻遏蛋白与操纵基因的亲和力，不能与操纵基因结合，于是RNA聚合酶结合于启动子，并顺利地通过操纵基因，进行结构基因的转录，产生大量分解乳糖的酶，这就是当大肠杆菌的培养基中只有乳糖时利用乳糖的原因。4.？5.？（人名）试验的原理6. HMGCOA I与II的比较合酶 还原酶 HMGCoA还原酶（HMGCoAreductase）是合成胆固醇的限速酶，存在于小胞体膜，催化合成甲基二羟戊酸（mev
8、alonicacid），并生成体内多种代谢产物，称之为甲基二羟戊酸途径。7. southern blotSouthern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。一、 待测核酸样品的制备 （一）制备待测DNA（二） DNA限制酶消化二、 琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品Southern印迹杂交是先将DNA样品(含不同大小的DNA片段)先按片断
9、长短进行分离，然后进行杂交。这样可确定杂交靶分子的大小。因此，制备DNA样品后需要进行电泳分离。在恒定电压下，将DNA样品放在0.81.0%琼脂糖凝胶中进行电泳，标准的琼脂糖凝胶电泳可分辨7080000bp的DNA片段，故可对DNA片段进行分离。但需要用不同的胶浓度来分辨这个范围内的不同的DNA片段。原则是分辨大片断的DNA需要用浓度较低的胶，分辨小片段DNA则需要浓度较高的胶。经过一段时间电泳后，DNA按分子大小在凝胶中形成许多条带，大小相同的分子处于同一条带。另外为了便于测定待测DNA分子量的大小，往往同时在样品邻近的泳道中加入已知分子量的DNA样品即标准分子量DNA （DNA marke
10、r）进行电泳。DNA marker可以用放射性核素进行末端标记，通过这种方式，杂交后的标准分子量DNA也能显影出条带。步骤：1. 制备琼脂糖凝胶2. 分子质量标志物（DIG标记）上样3. 电泳，使DNA条带很好的分离。4. 评价靶DNA的质量。在电泳结束后，0.25-0.50g/mlEB染色15-30min，紫外灯下观察凝胶。三、电泳凝胶预处理四、转膜 即将凝胶中的单链DNA片段转移到固相支持物上。而此过程最重要的是保持各DNA片段的相对位置不变。DNA是沿与凝胶平面垂直的方向移出并转移到膜上，因此，凝胶中的DNA片段虽然在碱变性过程已经变性成单链并已断裂，转移后各个DNA片段在膜上的相对位置
11、与在凝胶中的相对位置仍然一样，故而称为印迹（blotting）。用于转膜的固相支持物有多种，包括硝酸纤维素膜（NC膜）、尼龙（Nylon）膜、化学活化膜和滤纸等，转膜时可根据不同需要选择不同的固相支持物用于杂交。其中常用的是NC膜和Nylon膜 五、探针标记探针标记的方法有随机引物法、切口平移法和末端标记法。六、预杂交（prehybridizafion）七、Southern杂交步骤 1.将标记的DNA探针置沸水浴10min，迅速置冰上冷却1-2min，使DNA变性。 2.从水浴中取出含有滤膜和预杂交液的塑料袋，剪开一角，将变性的DNA探针加到预杂交液中。 3.尽可能除取袋中的空气，封住袋口，滞留在袋中的气泡要尽可能地少，为避免同位素污染水浴，将封好的杂交袋再封入另一个未污染的塑料袋内。 4.置42水浴温育过夜（至少18h）。八、洗膜九、放射性自显影检测五、计算10分简单，计算配制某一浓度的液体所需溶剂的量
