《卡托普利及SNP对VSMC中ET-1释放的作用.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《卡托普利及SNP对VSMC中ET-1释放的作用.doc（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、卡托普利及SNP对VSMC中ET-1释放的作用卡托普利及SNP对VSMC中ET-1释放的作用2010-01-14 丛洪良黄体钢周丽娟宋昱马向虹王伟刘洪梅 【摘要】目的探讨卡托普利及SNP对培养的大鼠VSMC释放ET-1的影响及相互关系。方法在大鼠VSMC培养液中置入不同浓度卡托普利及/或SNP后，用放免法测定ET-1。结果卡托普利及SNP均可减低因Ang引起VSMC分泌增加的内皮素量，Ang水平与VSMC分泌ET-1量呈正相关。结论ET-1通过抑制VSMC内源性NO的产生加速AS的发生及发展，ACEI或NO抑制ET-1释放，可减缓AS形成。 【关键词】卡托普利硝普钠内皮素一氧化氮血管平滑肌细胞
2、 The releasing effected of captopril and sodium nitroprusside on endothelin-1 in vascular smooth muscle cell Cong Hongliang, Huang Tigang, Zhou Lijuan, et al. Tianjin Cardiovascular Institute, Tianjin 300211 【Abstract】ObjectiveInvestigating the influence of captopril and SNP on releasing ET-1 in cul
3、tured VSMC of rat. MethodsMeasuring the endothelin-1 level through radioimmunology assay in various concentration of captopril and/or sodium nitroprusside in cultured vascular smooth muscle cell of rat. ResultsThe results show that both captopril and SNP could reducing the high ET-1 level of VSMC wh
4、ich were caused by Ang. There were a linear relationship between Ang level and ET-1 production (r=0.760 1,P0.001).ConclusionEndothelin-1 maybe accelerating the atherosclerosis formation and developing through inhibiting endogenous NO produced by VSMC. ACEI or NO, inhibiting ET-1 release, may reduce
5、atherosclerosis formation. 【Key words】Captopril Sodium nitroprusside Endothelin-1 Nitric oxide Vascular smooth muscle cell 血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)已被公认为高血压、冠心病有效药物之一，并已广泛应用。硝普钠(Sodium Nitroprusside, SNP)为血管扩张剂，由于在体内产生NO，被认为是一种NO供体。NO抑制血小板聚集、血管平滑肌细胞(VSMC)增生及白细胞对内皮细胞(EC)粘附，对限制动脉粥样硬化(AS)的局部血管损伤起重要作用1。但ACEI及一氧
6、化氮(NO)对局部损伤所起的保护作用是否与VSMC释放的内皮素(ET-1)减少有关，尚少见报道。本研究的目的是探讨卡托普利及SNP对培养大鼠VSMC释放ET-1的影响及相互关系。 材料与方法 1.大鼠VSMC培养、鉴定与分组 大鼠VSMC培养为组织贴块法2。应用透射电镜鉴定VSMC，待VSMC长满呈亚融合状，消化成细胞悬液铺24孔板，每孔为3.1104细胞数，于CO2孵育箱静置48小时，弃上清液，设定每六孔为一组。实验组分别予以含Ang80 pg/mL、160 pg/mL、320 pg/mL、640 pg/mL,Ang640 pg/mL+卡托普利100g/mL,Ang640 pg/mL+卡托普
7、利100 g/mL+SNP 10-5mol/mL及加入含SNP 10-5mol/mL的M199培养液；对照组加入正常M199培养液。CO2孵育箱孵育36小时后取细胞培养液进行鉴定。 2.主要试剂及测试盒 Ang粉剂(购自北京同正生物技术公司)，ET-1放免分析药盒(购自北京东亚放免所)。ET-1测定，此方法是采用均相竞争法直接测定血浆或组织中的ET含量。取培养液100L与125I-ET、PR-试剂混匀37放置15分钟后，3 000转/分,20分钟离心，吸弃上清液，在r计数器上测定沉淀cpm数，以Bi/Bo(%)为纵坐标，以ET标准浓度为横坐标，125I-ET与标准或样品竞争性地与ET-抗体结合
8、，根据样品管中放射性含量直接从标准曲线上查找出相应的结果。SNP(北京生物化学厂)，卡托普利注射液(常州制药厂)。 3.统计学方法 所有计量资料均以（s）表示，应用SPSS统计软件进行多组间两两比较轶和检验，P0.05有统计学意义。 结果 随着Ang水平升高VSMC释放ET-1量增加，SNP和卡托普利降低VSMC的ET-1释放量(见图1)；VSMC释放ET-1的量与VSMC培养液中Ang的浓度关系(见图2)。 图1卡托普利及SNP对SMC释放ET的影响 A:Ang0 pg/mL, B:Ang80 pg/mL, C:Ang160 pg/mL, D:Ang320 pg/mL, E:Ang640 p
9、g/mL, F:Ang640 pg/mL+Captopril 100g/mL, G:Ang640 pg/mL+Captopril 100g/mL+SNP 10-5mmol/mL, H:SNP 10-5mmol/mL A和D、F比P0.05(q=3.426,3.337), A和E比P0.01(q=4.559), B和D、E、F比P0.05(q=2.775,3.132,2.722); C和D、E、F比P0.05(q=2.731,3.115,2.694), D和G、H比P0.05(q=2.663,2.869);E和G、H比P0.05(q=2.811,2.934), F和H比P0.05(q=2.691
10、) 图2不同Ang水平与ET水平的相关关系 讨论 内皮素为一种21氨基多肽，包括ET1、ET2及ET3。ET1是目前所确定的最强的血管收缩剂3。近来研究表明ET1血浆水平在症状性AS及经皮冠状动脉内血管成形术(PTCA)后升高，在人AS损害时，ET1表达增高，ET1功能与磷酯酶C(PLC)调节的磷酸肌醇水解和蛋白激酶(PKC)激活有关4。ET1调节血管收缩性及促使VSMC增生，在高血压及AS发病机理中起重要作用。然而ACEI及NO对VSMC释放ET1的影响，尚少见报道。本研究结果显示，NO供体SNP及ACEI卡托普利单独或联合使用均降低VSMC对ET1的释放，对抗Ang诱发的ET1生成增多。S
11、NP与卡托普利联合应用时降低的ET1较单独应用卡托普利更明显，而单纯SNP不影响基础ET1含量。Ang浓度与ET1释放呈正相关(P0.01)。Ikeda认为，ET1可降低细胞因子如白介素-1(IL-1)引起的NO生成增多，其降低的作用被ET1受体拮抗剂BQ-485减弱，表明ET抑制VSMC NO生成增多作用在ETA受体，并部分通过PKC依赖途径5。本实验结果则反过来证明NO的增多也可以抑制ET1的生成，改善血管收缩或VSMC功能状态。ET1为EC分泌的强烈血管收缩剂，其与血管疾病有关。内皮素受体分两种，ETA和ETB。所有VSMC对ET1的反应受ETA或ETB受体调节，VSMC收缩和增殖依赖于
12、ET1；ETB受体扩血管作用可以通过ET1与ETB受体接合6。Nakahashi认为ET1既不影响基础也不影响IL-1诱导的NO生成，因此推论ET1对NO合成抑制作用是通过PKC依赖途径，而其他PKC激活剂，如Ang、精氨酸血管加压素，已显示减低细胞因子诱导的亚硝酸盐堆积7。Groves研究认为NO供体抑制PTCA后血小板聚集、VSMC增殖及EC产生细胞因子8。本文认为Ang使ET1生成增多可能与PKC途径激活有关，ACEI减低ET1的生成与其抑制Ang产生及促进NO生成有关，在血管组织经历各种病理状况时，NO也许会产生并抑制血管内膜损伤的形成，而应用NOS抑制剂可加速新内膜的形成，NO前体L-Arg可预防家兔冠状动脉粥样硬化，ETA及ETB受体在颈动脉血管成型术模型中明显上调9。
