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1、第六章 革兰阳性球菌第一节 葡萄球菌属一、生物学特性：1、革兰阳性， 球形,，葡萄状排列 2、营养要求不高 3、菌落较大，可有色素，脂溶性4、可有溶血圈，菌体表面可有SPA 5、触酶阳性 6、甘露醇发酵+7、产生血浆凝固酶和毒素。 血浆凝固酶：使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质。意义：鉴别有无致病性的重要指标。抵抗吞噬细胞的吞噬。使化脓性病灶出现典型特点：浓汁粘稠、病灶局限、不易扩散、界限分明。8、可产生耐热核酸酶9、抵抗力较强，耐10-15%氯化钠，对碱性染料敏感。10、耐药菌株多见二、分类：1、按色素分：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。2、按血浆凝固酶有无分类：血浆凝固
2、酶阳性和血浆凝固酶阴性葡萄球菌。3、根据噬菌体分型：26型。三、临床意义：四.微生物学检验 1、标本采集:应在抗菌药物治疗前采 集细菌增殖部位的标本, 如脓, 血, 脑 脊液, 呕吐物等。2、直接涂片: 有参考价值。3、分离纯种: 接种血平板,或高盐平板。根据菌落及镜下形态挑选。鉴定： 菌落及镜下形态、触酶试验阳性、血浆凝固酶试验阳性、耐热核酸酶试验阳性、甘露醇发酵试验阳性 。（1）血浆凝固酶试验 玻片法：检测菌体表面的凝固酶。 直接将菌落混于人或兔血浆中,立即观察有无凝固。 试管法：检测菌体外的凝固酶。 培养物和血浆混合，37 C 4h 后观察结果。（2）耐热核酸酶试验 在含核酸甲苯胺蓝平板
3、上打孔；培养物沸水浴15min后加入孔中；35 1h 观察结果。甲苯胺蓝变为红色者为阳性 4、肠毒素检测：病人分离株培养物，煮沸30min，接种幼猫腹腔，4小时内出现症状为阳性。第二节 链球菌属一、生物学特性1、革兰阳性，球形，呈链状排列。2、多数在培养早期有荚膜。3、营养要求高, 需血液或血清4、血平板上形成灰白色、小菌落。5、血平板上分别形成、三种特征性溶血现象。6、触酶阴性7、可产生透明质酸酶等多种酶：扩散因子是浓汁稀薄，病灶扩散，病灶界限不清。8、可产生多种毒性物质9、抵抗力较差，耐药菌株少见。二、分类1、按溶血情况分 乙型溶血链球菌:致病力强甲型溶血链球菌:致病力差丙型溶血链球菌:
4、无致病力 2、按细胞壁多糖C抗原抗原性分为20群 (A-Z)， 90%病原菌在A群三、临床意义四、微生物学检验 n1、标本采集：主要是咽拭子,脑脊液，痰，脓等。2、直接涂片：有参考价值。3、分离纯种：接种血平板，根据菌落及镜下形态挑选。4、鉴定（1）菌落及镜下形态（2）触酶试验阴性（3）杆菌肽敏感试验：A群敏感。 将0.04U杆菌肽药敏纸片贴在涂布有待测菌的羊血琼脂平板上，35 孵育过夜后，观察抑菌环以判断是否为敏感。10mm敏感，10mm不敏感。 （4）CAMP试验：B群阳性。 B群链球菌能产生CAMP因子，它可促进葡萄球菌溶血的能力。先将金黄色葡萄球菌沿直径划线接种，再沿该线垂直方向接种
5、B群链球菌，两线不得相接，间隔0.5cm，37 孵育过夜，两种划线交界处出现箭头状溶血，即为阳性反应。（5）血清学试验定群：群特异性Ag（6）抗O溶血素试验：活动性风湿热抗体效价1:400五、肺炎链球菌鉴定1、革兰阳性，个体成对排列，矛尖状，有荚膜。2、菌落为草绿色溶血，有自溶酶，菌落顶部可下陷（脐窝状）。3、胆汁溶菌试验阳性：胆盐能通过活化肺炎链球菌的自溶酶而将肺炎链球菌溶解。将0.5ml的麦氏浓度细菌悬液和等量的2%去氧胆盐置于试管内，35C 孵育2h后， 菌液变清为阳性。4、对Optochin 敏感：5g,14mm 六、总结1、链球菌是人和某些动物的寄生菌。2、草绿色链球菌为正常菌群的成
6、员, 可 引起内源性感染。3、A群化脓性链球菌菌落为溶血,可引 起多种疾病,诊断时,可分离细菌,也可检 测ASO。4、肺炎链球菌菌落为溶血,但在生物学 性状和致病性上与绿链有差异。第八章 肠杆菌科第一节 概述一、共同特征1、可能存在于人和动物肠道的革兰阴性杆菌，有的是正常菌群，有的是病原菌。可引起肠道外或肠道内的感染。临床检出率最高。2、多有周鞭毛，能运动，有的有菌毛。3、有H,O,K等抗原。4、能发酵多种糖，乳糖有鉴别意义。5、能抵抗胆汁和某些染料。6、镜下形态几无鉴别意义,鉴定以生化反应和抗原性为主。二、肠杆菌常用培养基培养基 鉴别物 抑制物 指示剂l MAC 乳糖 胆盐 中性红l EMB
7、 乳糖 伊红美兰 伊红l SS 乳糖 胆盐 中性红,枸櫞酸 l 铁 KIA 乳糖,葡萄糖 酚红，硫酸亚铁l 糖发酵 糖 酚红l 枸橼酸 枸橼酸 溴麝香草 酚兰2、KIA（克氏铁琼脂）上层下层解释黄色黄色葡+，乳+ （KA）红色黄色葡+，乳（AA+）红色黄色，黑色葡+，乳，H2S+ （KA+）3、MIU： 半固体培养基加尿素,酚红,孵育后观察 M(MOTILE):观察半固体培养基中接种线情况 I(INDOL):加试剂 U(UREA): PH升高,指示剂变红4、IMVC I:胨水基培养物加试剂,红色为阳性 M(甲基红):葡萄糖胨水基培养物,加甲 基红,红色为阳性 V-P:葡萄糖胨水基加试剂,红色为
8、阳性C:以枸櫞酸为碳源,生长,变兰为阳性三、肠杆菌科和类似菌的区别： 葡萄糖发酵 氧化酶 鞭毛肠杆菌 + 周弧菌 + + 单/丛非发酵菌 + 单/丛/周第二节 大肠埃希菌一、生物学特性：1、G-杆菌,有周鞭毛,能运动。2、营养要求不高,菌落较大。3、发酵乳糖,产酸产气,MAC上为红色菌 落,EMB上菌落为粉红色,有金属光泽。KIA为AA + -；MIU为 + + -；IMVC为 + + - -4、抗原有菌体（O）抗原、鞭毛（H）抗原和表面（K）抗原。二、分类： 大肠埃希菌(E.coli)是本属中主要从人类分离的菌种。 引起肠内感染的大肠埃希菌可分为5类: 肠毒素型大肠埃希菌ETEC 肠致病性大
9、肠埃希菌EPEC 肠侵袭型大肠埃希菌EIEC 肠出血型大肠埃希菌EHEC 肠凝聚型大肠埃希菌EaggEC三、临床意义：(一)致病因素 菌毛: 粘附 K抗原: 抗吞噬 内毒素: 致发热 肠毒素: 分耐热肠毒素和不耐热肠毒 素,通过不同机制,使肠液分泌增加,造成腹泻 VERO毒素: 体外能破坏VERO细胞(二)所致疾病 肠外感染:可发生于泌尿系,腹腔,胆道, 疮面等处引起相应炎症；也可引起败血症,脑膜炎等。 肠内感染:引起腹泻。包括 年轻动物的急性胃肠炎: 包括婴儿,小猪,小 牛,小羊。各年龄人群的急性胃肠炎: 主要发生于热 带,如旅游者腹泻。各年龄人群的痢疾样疾病。各年龄人群的出血性结肠炎引起肠
10、内感染的大肠埃希菌可分为5类：ETEC:因不耐热或耐热肠毒素引起的发展中国家儿童腹泻和旅游者腹泻,大便水样。EPEC:引起婴幼儿腹泻,大便水样可带有粘液。EIEC:类似志贺菌,侵犯肠粘膜,破坏上皮细胞,腹泻的大便中有脓血。痢疾样腹泻。EHEC:可引起出血性结肠炎。EaggEC:这些菌株可粘附于Hep-2或HeLa细胞上,和慢性腹泻有关。四、微生物学检验： 标本采集:腹泻者采粪便或肛拭子,肠外感 染采集相应标本,尿标本需做细菌计数 直接涂片:只能判定有G-杆菌感染 分离:粪便或肛拭子用选择培养基,其他的用血平板,或先进行增菌 鉴定:生化反应和血清学试验第三节 沙门菌属一.微生物学特性：1、革兰阴
11、性杆菌,有周鞭毛,能运动。2、乳糖发酵阴性。3、发酵葡萄糖:伤寒沙门菌不产气,其他沙门菌产气。4、生化反应和抗原成分是鉴定本属细菌的主要依据。 伤寒沙门菌KIA（KA-+），MIU（+ -)。沙门菌IMViC试验（+）5、能引起人或人和动物的感染。6、抗原成分（1）O抗原:分群以阿拉伯数字排序,现有58种以共同抗原分群,用英文表示如 . O2群(A群)；O4群(B群)；O9群(D 群) 能刺激机体产生IgM类抗体，颗粒状凝集。（2）H抗原:是定型基础, 刺激机体产生IgG类抗体。分两相：第一相抗原,特异性较高,称特异性抗原相,用英文小写字母表示。第二相抗原,特异性低,称非特异性抗原相,用阿拉伯
12、数字表示。位相变异:双相H抗原的沙门菌的不同菌落可带有两相或一相H抗原,后者即发生了变异。絮状凝集。（3）Vi抗原：位于菌体表面,具有抗吞噬能力能阻止O抗体对O抗原的凝集。不耐热,传代中亦易丢失。阳性菌株可用噬菌体分型。二、分类： 沙门菌属以O抗原分群,以H抗原定型临床常见菌种有： 菌种 O S.typhi 伤寒沙门菌 H- 1 H-29.12 (Vi) S.paratyphi A d 甲型副-伤寒沙门菌 1,2,12 a S.parayuphi B - 乙型副伤寒沙门菌 1,4,5,12 b 1,2S.typhimurium 鼠伤寒沙门菌 1,4,5,12 i S.choleraesuis
13、1,2 猪霍乱沙门菌 6,7 c S.paratyphi C 1,5 丙型副伤寒沙门菌 6,7(Vi) c 1,5三、临床意义：(一)致病因素 表面抗原:Vi抗原能抗吞噬,并使伤寒 沙门菌能在白细胞中存活。内毒素肠毒素:某些沙门菌如鼠伤寒沙门菌 能产生类似ETEC的LT。(二)所致疾病：1、胃肠炎(食物中毒):食入污染食物后,经4-6h潜伏期发病。2、菌血症或败血症3、伤寒,副伤寒:消化道传播,细菌在肠道淋 巴结增殖,入血流,至肝,脾等处增殖,再次 入血,引起全身中毒症状, 胆道细菌排入肠道,致肠壁潰疡。4、带菌状态四、微生物学检查：1、标本采集:可疑食物,呕吐物,粪便,血等2、伤寒病程不同阶段应采集的标本有异：发病第一周取血；第2、3周取粪便；第3周也可取尿液；全病程均可作骨髓培养。3、分离培养: 血:增菌后转种。 粪便等:选择培养基上乳糖不发酵,H 2 S 阳性菌落第四节 志贺菌属一、微生物学特性
