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1、醋制延胡索对延胡索乙素含量及镇痛作用的影响戴新新，孙文杰（南京中医药大学 江苏 南京 210023）摘要 目的：掌握延胡索的炮制方法及炮制原理；通过延胡索炮制前后生物碱的含量测定及镇痛实验了解延胡索炮制的意义。方法：延胡索乙素的含量研究：通过HPLC法测定醋制延胡索与净制延胡索中延胡索乙素的含量。镇痛作用研究：利用醋酸扭体法比较延胡索炮制前后的镇痛作用。结果：醋制延胡索中延胡索乙素的含量高于生品;醋制延胡索的镇痛作用强于生品。结论:实验证明，延胡索经醋炙后，其水煎液中延胡索乙素的含量显著增加；药理实验表明，延胡索乙素含量的高低与止痛作用成正比。关键词 醋炙延胡索；延胡索乙素；镇痛作用Compa
2、rative Study between Rhizoma Corydalis processing with vinegar and Cleansing Rhizoma Corydalis in determination of tetrahydropalmatine and analgesic effect Dai xin xin,Sun wen jie (Nanjing University of Traditional Chinese Medicine , Nanjing 210023 , China)ABSTEACT Objective:To explore the effect of
3、 different processes on the contents of active ingredients in Corydalis yanhusuo W.T.Wang. Methods:Use HPLC to determine the total alkaloid content of crude yanhusuo .Also abirritation of the samples on mice are compared experimentally. Results:In the sample extracted by water, the contents of activ
4、e ingredients in processed products were higher than in corydalis and chlorofomed extract as well as its abirritation. Conclusion:Assay of Tetrahydropalmatine in Yanhusuo after processing was higher than before treatment.Key words: Rhizoma Corydalis processing with vinegar ; tetrahydropalmatine; Ana
5、lgesic action 前言：延胡索为罂粟科植物延胡索(Corydalis yanhusuoW.T.Wang) 的干燥块茎,具有活血、利气、止痛功效,临床用于治疗胸胁、脘腹疼痛、经闭痛经、产后瘀阻、跌扑肿痛等症,主产于浙江。延胡索中主要有效成分为生物碱,生物碱在药材中多数以结合态的生物碱盐存在,少数碱性极弱的以游离态形式存在。延胡索的药理作用表现为镇痛、催眠、降低冠脉阻力及增加血流量等,另外亦对心血管系统有较好的药理活性。延胡索多炮制后入药,主要炮制方法为醋煮、醋炙和酒炙1。本实验采用醋炙法。这种方法的优点是醋充分与原药接触,增加了醋与生物碱充分结合的机会,增强了有效成分的煎出,且节省了燃
6、料,增加了工作效率。我们采用高效液相法对其进行了定量分析。药理实验证明，延胡总生物碱、延胡甲素、乙素、丑素均有较强的镇痛作用，以乙素镇痛作用最强2。现代研究主要以总生物碱、元胡乙素、季铵碱的含量为成分指标，以镇痛及小鼠耐缺氧实验为药理指标，对其炮制原理、炮制工艺进行探讨3。本研究为探讨生延胡索和醋延胡索的镇痛药效作用，进行了镇痛的实验研究，现报道如下。1 .仪器与试药高效液相色谱仪；延胡索乙素对照品，延胡索药材；小白鼠：体重18-22g，由南京中医药大学动物中心提供。2.方法与结果2.1延胡索炮制品的制备 延胡索生品：取延胡索药材（适量）切成小碎块，打粉，过三号筛。 醋制延胡索：取延胡索粗药材
7、30g，加人6ml米醋拌匀，闷润至醋被吸尽后，置煮制容器内，加入适量清水(以平药面为宜)，用武火加热至沸，沸腾后，文火保持微沸至透心，醋液被吸尽时，取出，切成碎片，置60烘箱中烘干，取出放凉。2.2各炮制品中延胡索乙素含量测定 2.2.1色谱条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇一0.1%磷酸(用三乙胺调pH至6.0)(85:15)为流动相，检测波长:280nm;理论塔板数按照延胡索乙素峰不应低于3000.2.2.2对照品溶液的制备 精密称取延胡索乙素对照品适量，加甲醇制成每1mL含50.88mg的溶液，作为对照品溶液。2.2.3供试品溶液制备 取延胡索各炮制品粉末(过三号筛)约1g，精
8、密称定，置100ml三角烧瓶中，精密加人纯净水50ml，称定重量，超声30min，放冷，再称定重量，用纯净水补足减失的重量，摇匀，用脱脂棉滤过至烧杯中，精密吸取续滤液2.5mL,蒸干，残渣加甲醇溶解，定量转移至1mL容量瓶中，并稀释至刻度，摇匀高速离心，即得。2.2.4各炮制品中延胡索乙素的含量测定 精密吸取各炮制品的供试品溶液10uL注人色谱柱，按外标峰面积法计算延胡索乙素的含量，结果见表1。 表1延胡索乙素含量测定结果 样品延胡素乙素(ug/ml) 延胡索乙素对照品 50.88延胡索生品 111.7912.24醋制延胡索 120.1019.70由有表1数据可见，延胡索经醋制后其中的延胡索乙
9、素的含量有所提高.2.3小鼠镇痛实验2.3.1样品液的制备 称取延胡索生品及炮制品各10g，分别置于250mL烧杯中，加水150ml武火煎煮，保持微沸25min，用脱脂棉过滤，浓缩至100rnL,，备用。2.3.2扭体法 取体重18-22g小鼠42只，随机分成3组，分别灌胃给予生理盐水,生品及醋制品0.3ml/10g，40min后，各鼠腹腔注射0.7%醋酸0.1ml/10g，观察并记录15min内各鼠产生扭体反应(小鼠腹部受化学刺激后出现伸展后肢，腹部收缩，扭曲身体;腹部内凹呈蜂腰状，躯干与后肢伸张，臀部高起)的次数，结果见表2.表2 生延胡索及醋制延胡索对醋酸扭体法小鼠疼痛反应的影响（xs）
10、 组别 动物数 （只）剂量（g/kg）扭体次数P生理盐水组26-10.210.27-生品组26310.159.090.4480.05醋制组2635.196.950.0150.05注：P为各制品组与生理盐水组比较。P(生品/醋品)=0.0160.15.由表2数据可见，醋炙延胡索对小鼠阵痛作用有显著作用。3. 讨论中药饮片是在中医药理论指导下,根据辨证用药及调剂、制剂的需要,对中药材进行加工炮制的成品。炮制工艺包含着深厚的中医药理论与丰富的经验技艺,是中医药的特色,也是具有民族特色的独特制药技术,必须继承其中的精髓,勇于创新,使其应用科学化、规范化,正是基于此,本实验对比延胡索生品及其醋制品中延胡
11、索乙素的含量变化,并进行了小鼠镇痛实验,结果表明:延胡索经醋炙后提高了延胡索乙素的含量,从而证明了醋品的止痛作用增强的原因,扭体法镇痛实验表明,醋制延胡索的镇痛作用明显(P0.05),且醋制延胡索的镇痛作用明显优于延胡索生品(P0.05),从药理实验结果来看是有效的,从而为延胡索加工炮制的规范化提供了新的可以借鉴的方法。参考文献1曹柳,窦志英.不同炮制方法对延胡索中有效成分含量的影响J.中国中医药信息杂志,2009,16(6):42-44.2Liu Guang-jun,Zhang Li-hua,Chen Shi-lan.The successive changes andmodern study in the processing of corydalis tuber J. LishizhenMedicine and Materia Medica Research, 1999,10(7):525.3Tang Fa-yin, Nie Ai-guo, Li Yan-ling. The Research progression ofRhizomaCorydalisYanhusuoJ.JournalofClinicalandExperimental Medicine, 2006,5(2):185-186
