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1、临床细菌检验标本采集指南 1所有标本的采集、运送和处理应在无菌操作，防止污染原则下认真进行。2已采集原始标本都应置于、密封的容器中运送，含有明显区分各部门文字标志。 3带针头的注射器运送标本到实验室，用无菌试管或防护装置套住注射针，再置于防漏塑料袋中运送。 4避免来自寄生菌的污染，应当保证每份标本代表感染过程。健康宿主在感染的许多部位也可出现的正常菌丛，主要来自皮肤、黏膜和呼吸道，它若过早、过度生长，掩蔽了真正的病原菌，干扰培养结果解释。5采集足够量标本，材料不足可能产生假阴性结果。 6已采集标本，常规性细菌学检验，不超过1h送交实验室，延迟运送影响病原菌检出。 血液和骨髓标本的采集 1菌血症
2、患者多数为间歇性，病原菌是周期性出现在血液中，随之无细菌时期。不管临床症状经历的严重程度，但患者血液中病原菌浓度水平相当低，据此要求临床多次采集血液标本进行培养，但24h内一般不超过3次，成人每次血量10-20ml可提高阳性检出率。 2血标本接种到培养瓶后，轻轻混匀以防血液凝固。立即送检，如不能立即送检，需室温保存或置3537孵箱中，切勿冷藏。3一般患者出现以下一种体症时可作为采血的重要指征：发热(38)或低温(36)，寒战，白细胞增多，皮肤粘膜出血，昏迷，多器官衰竭，血压降低，CRP升高及呼吸快，特殊患者(如血液病)出现粒细胞减少，血小板减少等，或同时具备上述几种体症的临床可疑菌血症应采集血
3、培养。新生儿菌血症，应该增加尿液和脑脊液培养。对入院危重感染患者在未进行系统性抗菌药物治疗之前，应及时采集血培养。 4采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行，在24h内采集23份血培养(一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养)。对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前0.51h采血液，或于寒战或发烧后lh进行。 5不明原因发热，如隐性脓肿，伤寒热和波浪热，先采集23份血标本，2436h后估计体温升高之前(通常在下午)再采集2份以上。 6急性脑膜炎炎、骨髓炎、关节炎、细菌性肺炎和肾孟肾炎发热患者，应在抗生素治疗或更换前，从不同部位采集血液标本，做2次血液培养(应在抗生素治疗前完成)。
4、7疑似心内膜炎患者：急性病例，在抗生素治疗或改变前1-2h，从各个不同部位采血3次做血液培养。亚急性病例，第一天24h内，相隔1h连续采集3次血标本培养，若24-48h全部阴性，再采集2-3次血标本培养。若已经抗生素治疗患者，连续3天，每天取2次血液标本。 8皮肤消毒程序：严格执行以下三步法：1）70酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。 2)12碘酊作用30s或10碘伏60s，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达3cm以上。 3)70酒精脱碘。对碘过敏的患者，用70酒精消毒60s，待酒精挥发干燥后采血。 9培养瓶消毒程序 1)70酒精擦拭血培养瓶橡皮塞，作用60s。 2)用无菌纱布或无菌棉签清
5、除橡皮塞子表面残余酒精，然后注入血液。如果是自配带塞子的三角瓶，此步骤可免去。10静脉穿刺和培养瓶接种程序 1)在穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手套固定静脉，不可接触穿刺点。 2)用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头(如果行第二次穿刺，应换针头)直接注入血培养瓶，如果是自配带塞子的三角瓶，严格无菌操作将血液注入三角瓶内，应烧瓶口，避免采血针头与三角瓶瓶口和瓶塞接触。 11采血量：成人采血量是5l0ml，儿童l5ml,骨髓l2ml。血液和肉汤之比为1：5l：10为宜。附血管内导管尖端培养 1.用酒精清洁导管周围皮肤。 2.无菌手续移动导管，剪取尖端末段5cm，直接置入无菌试管中。 3.立
6、即运送到细菌实验室，防止干燥，常规培养不超过15min,4保存不越过2h。 4只有当做血液培养的同时，做血管内导管尖端培养，确定患者菌血症的来源。或是抽取新鲜脓性标本培养，确定软组织相关感染，并做在附近有插入导管的尖端段培养。 脑脊液标本的采集 CSF采集后，置于无菌带塞试管中，15min内运送实验室，绝不可冷藏。一般细菌培养检验最小量1ml，真菌2ml。尿液标本的采集 1有下列情况之一者，应进行尿培养(1)有典型的尿路感染症状；(2)肉眼脓尿或血尿； (3)尿常规：白细胞和或亚硝酸盐阳性；(4)不明原因的发热，无其他局部症状；(5)留置导尿管的病人出现发热；(6)膀胱排空功能受损；(7)泌尿
7、系统疾病手术前。 2注意尽量采集晨尿标本，睡前少饮水，以免稀释尿液，应保证尿液在膀胱内停留4h以上。 3中段尿采集清洁外阴反尿道口周围，自然排尿，让尿流不间停，截留中段尿，置于无菌容器中，不少于1ml。 4直接插导管采集尿标本一般插入导管后。先让尿流弃15ml再留取培养标本。尽情不采用导管采集标本，极容易将尿道细菌丛进入膀胱，增加医源性感染危险。 5滞留导管集尿用70%酒精消毒导管口，用针筒抽取5-10ml尿，置于无菌容器中送实验室。操作时注意防止混入消毒剂。不能采集收集袋中的尿液。滞留导管会使膀胱带有细菌，尽可能不采用。6标本采集后，常规2h送交实验室。下呼吸道标本的采集 有以下任何一种情况
8、时建议采集标本进行培养：(1)咳嗽；(2)咯血；(3)呼吸困难； (4)发热伴白细胞增高尤其是中性粒细胞或CRP明显增高情况者。 1自然咳痰法以晨痰为佳，采集标本前应用清水、冷开水漱口或牙刷清洁口腔和牙齿，有假牙者应取下假牙。尽可能在用抗菌药物之前采集标本。用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖的容器中，标本量应lml。咳痰困难者可用雾化吸入加温至45的100gLNaCl水溶液，使痰液易于排出。标本应尽快送检，不能及时送检的标本，室温保存2h。 2支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针穿刺吸引法和支气管肺泡灌洗法均由临床医生按
9、相应操作规程采集，但必须注意采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。 3小儿取痰法用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方，以诱发咳痰。粪便标本的采集 当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本，进行细菌培养：(1)粪便涂片镜检白细胞5HP；(2)重症腹泻；(3)体温大于38.5；(4)血便；(5)便中有脓液；(6)未经抗菌药物治疗的持续性腹泻患者；(7)来自疫区的患者。1标本采集尽可能在发病早期和使用抗菌药物治疗之前。在不同的时间采集23个标本可以提高致病菌的分离率。 2自然排便采集粪便标本时，取有脓
10、血、粘液、组织碎片部分的粪便13g。液体粪便则取絮状物，一般取l3ml，直接装入粪便容器中送检。 3直肠拭子采集粪便标本，适于排便困难患者或婴幼儿。可将肛门周围洗净，用无菌盐水湿润的棉拭子插入肛门，成人约45cm，儿童约23cm，在肛门括约肌处柔和地旋转拭子，可在拭子上明显见到粪便。 4粪便标本置于清洁、干燥广口容器中(不宜使用纸盒)尽快送检，室温条件下不能超过2h。 眼、耳、鼻、喉标本的采集1.眼结膜标本预先沾湿拭子，在结膜上滚动采集标本。标本在15min内送达实验室。 2.眼角膜标本采集在麻醉下，用刮勺在溃疡或创伤边缘刮取碎屑，在接种在培养基平饭上培养和涂片。眼部感染所获取的标本量很少，建
11、议医师取样后直接种在培养基平板上培养和涂片。 3.口腔咽部标本先用一个试子揩去溃疡或创面浅表分泌物，第二个试子采集溃疡边缘或底部，常规培养2h运送实验室。 4.患有外耳炎患者，需要深部耳拭子，因为浅表拭子可能遗漏链球菌引起的蜂窝织炎。 5.鼻标本留取用一根无菌棉拭子，伸进一侧鼻孔约2.5cm，与鼻黏膜接触，轻轻地旋转拭子蘸取黏膜上分泌物，缓慢抽出，置于运送培养基或将拭子直接送检。 脓液标本的采集(病灶分泌物) 1开放脓肿用无菌生理盐水或70%乙醇擦去表面渗出物，用拭子深入溃疡基底部或边缘部，采集二个拭子。置无菌容器中送检。 2闭合性脓肿用注射器抽取，刺入无菌橡皮塞中送检。 无菌体液标本的采集 1无菌体液是指除血液、骨髓和脑脊液外的羊膜液、后穹隆穿刺液、透析液、心包液、腹膜穿刺液和滑膜液。 2当留取标本时，防止无菌体液凝固，在无菌容器内预先加入灭菌肝素0.5mg(可抗凝5ml标本)再注入各种穿刺液，轻轻混合。生殖系统标本的采集 阴道、子宫颈凹陷、子宫内膜、生殖道创伤、前庭大腺、羊水膜及前列腺等分泌物应由医师采集，收集于无菌试管内送检。淋病奈瑟菌检查时，不论男女尿道及子宫颈均需用拭子插入尿道及子宫颈3cm深取样送检，要避免受阴道分泌物污染拭子。 眼、
