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1、08一、填空题：(20分，每空1分)1、淀粉水解方法有 酸法 、 酶法 和 酸酶结合法 。2、根据微生物生长速度与产物合成速度之间的关系，可以将发酵分为三种类型，分别是 生长偶联型 、 非生长偶联型 和 混合生长偶联型 。3、呼吸抑制发酵的现象叫 巴斯德效应 。4、高温灭菌的原理是 高温使微生物蛋白质变性失活 。5、常用的干燥方法有 对流加热干燥 、 接触加热干燥 和 冷冻升华干燥 等。6、发酵醪中菌体分离可采用 离心分离 和 过滤分离 方法。7、发酵热包括 生物热 、 搅拌热 、 蒸发热 和 辐射热 。8、发酵过程中，调节PH值常用方法有 添加CaCO3法 、 流加尿素 、加缓冲剂法 等。
2、二、名词解释：（15分，每题3分）1、 分解代谢物阻遏当菌体利用葡萄糖作C源进行生长时（1分），葡萄糖分解产物能阻遏参与次级代谢产物的合成的酶系生成（1分），从而影响次生代谢物的合成（1分）。2、 对数残留定律3、在高温灭菌时，菌的死亡速率与任一瞬间残留的活菌数N成正比（3分）。3、反馈抑制酶促反应的终产物（1分）抑制代谢途径第一个酶的活性（2分），这称反馈抑制。4、 限制性基质微生物生长速率与底物浓度有一定的依赖关系（1分），当底物浓度很小（1分）， 微生物生长速率与底物浓度成正比，此时基质叫限制性基质（1分）。5、 次级代谢产物从初级代谢途径中形成分枝代谢途径（1分），并用初级代谢产物生成
3、与菌体生长繁殖无关的物质或功能还未明的化合物（2分），这个过程称次级代谢。二、 判断题（对的在下面的表格中打“”，错的打“”，10分）1、 柠檬酸发酵主要防止前期染菌。2、 疫苗深层培养，如果中期染菌不严重，考虑继续发酵。3、 介质过滤除菌，必须保证介质之间的孔径小于细菌直径，才能达到除菌目的。4、 发酵醪需先进行菌、液的分离，才能进行后续的提取和精制过程。5、 谷氨酸发酵中，加速DCA循环有利于产物积累。6、 发酵生产单细胞蛋白，需要供氧。7、 在发酵过程中，随着通气量的提高，溶氧系数也增大。8、 为了提高发酵效率及便于控制，在整个发酵期内，我们要选定一个最适温度，控制发酵在该温度下进行。9
4、、 一般来说，种子培养基的碳氮比低于发酵培养基的碳氮比。10、消毒不一定能达到灭菌的要求，而灭菌则可达到消毒的目的。题号12345678910得分答案每题1分四、简答：（40分，每题5分）1、微生物工程的发展经历了哪几个时期？答：1.自然发酵时期（1分）2.纯培养技术的建立（1分）3.通气搅拌好气性发酵工程技术建立（1分）4.人工诱变育种与代谢调控发酵工程技术的建立（1分）5.发酵动力学、发酵的连续化自动化工程技术的建立6.基因工程阶段。或答微生物酶反应生物合成和化学合成反应相结合工程技术建立。（1分）2、谷氨酸生产如何防止噬菌体污染？答：注意环境卫生（1分），防止菌种流到发酵罐等设备以外（1
5、分），发酵液必须经灭菌等处理措施才能排放（1分），选育抗噬菌体菌株，将不同生产菌轮流使用（1分），定期进行菌种复壮，注意检查溶原菌。3、糖蜜原料有何特点？糖蜜预处理的常用方法有哪些？答：糖蜜原料特点：1.糖蜜中含干物80，其中含糖50，不稀释，渗透压大，不能发酵（1分）2.含512的胶体物质，果胶、焦糖会产生泡沫（1分）3.含灰份516管道阻塞，设备积垢（1分）糖蜜预处理常用方法有：加酸通风沉淀法，热酸处理法，加絮凝剂沉淀法等（2分，回答合理的方法两种以上即可）。4、发酵过程杂菌污染的途径有哪些？如出现杂菌污染，应如何处理？答：发酵过程杂菌污染的途径有1.种子带菌，2.培养基及设备消毒不够，3
6、.设备破损，4.空气系统，5.操作不当（取样、补料、消泡、控制）等。（2分）如出现杂菌污染，应对染菌时间、种类、染菌规模进行分析根据具体情况处理，（1分）如：1.种子带杂菌灭菌，排掉。（0.5分）2.发酵前期严重：实消后补种、料。不严重：运转并观察。（0.5分）3.发酵中期分析微生物数量、种类、物料性质，再做处理。（0.5分）4.发酵后期同中期，并考虑产率与成本关系，考虑放罐。（0.5分）5、连续发酵有何优缺点？答：（1）、设备生产能力大、利用率高、没有中间清洗杀菌、没有发酵适应期。（1分）（2）、连续化、自动化、人平生产率高、成本降低。（1分）（3）、发酵稳定、便于管理。（1分） 缺点：营养
7、利用率略低、控制要求高。（2分）6、 泡沫对发酵有何影响？常用的消泡方法有何优缺点？答：泡沫对发酵的影响有：（1）泡沫持久存在，妨碍CO2的排除，影响微生物对氧的吸收，破坏正常生理代谢，不利发酵和生物合成。（2）泡沫大量产生，使发酵罐有效容积大大减少，影响设备利用率。（3）泡沫过多，控制不好，会引起大量跑料，造成浪费和环境污染（4）泡沫升到灌顶，可能从轴封渗出，增加染菌机会（5）泡沫过多也会影响氧传递、通风与搅拌效果。（3分，答出3点以上即可）化学消泡优点：化学消泡剂来源广泛，消泡效果好作用迅速可靠，用量少，不需改造设备，大小规模适用，易实现自动控制。缺点：消泡剂对微生物生长有毒性。（1分）物
8、理消泡优点：不用在发酵液中加其他物质，节省原料，减少由于加消泡剂引起的污染机会。缺点：不如化学消泡迅速、可靠，需一定设备及消耗动力，不能从根本上消除引起稳定泡沫的因素。（1分）8、细胞内代谢调节的主要类型有哪些？发酵工业中突破代谢调节的常用方法有哪些？答：细胞内代谢调节的主要类型有：酶的活性调节，（1分）酶的合成调节 （1分）发酵工业中突破代谢调节的常用方法有1、 应用营养缺陷型菌株，（1分）2、 应用抗反馈调节突变株，（1分）3、 改变细胞膜通透性。（1分）7、 改变细胞膜通透性的方法有哪些？答：（1） 选择生物素缺陷型限制生物素用量，（2） 生物素过量时采用油酸缺陷型菌株，限制油酸用量，（
9、3） 添加含高级脂肪酸的表面活性剂，拮抗脂肪酸的合成，（4）选育甘油缺陷型，限制甘油含量，（5）添加青霉素控制细胞壁后期合成。（每点1分）五、分析问答题：（15分）1、在某菌种发酵生产中，最近发现发酵过程中糖氮的消耗减慢了，发酵周期延长了，产品得率下降，试分析可能的原因，并进一步验证和提出解决的办法。答：经分析很可能发生了菌种衰退。（3分，写出分析的根据）验证方法：1、显微镜镜检，观察菌种形态上有无发生变异，2、平板培养，观察菌落生长情况，3、摇瓶培养，测定相关生理指标。换过菌种或进行菌种复壮，看上述现象是否消失。（5分）要解决好菌种衰退问题要做到：（1）做好菌种的保藏工作（5分，回答5点以上即可，每点给1分）A、使菌种在保藏中处于休眠状态，孢子、芽孢。低温、干燥、缺氧、营养缺乏、代谢活动下降。B、要纯粹，要作无菌检查C、新鲜的斜面，生长要丰满，取幼龄菌接种D、接种量要适当，斜面生长不过密E、保藏培养基，C源比例少，营养贫乏一些，否则产酸，产生代谢产物，引起变异。保藏培养基不加或少加葡萄糖，活化用0.1葡萄糖F、尽量减少传代次数G、培养条件中，营养、温度、水分要合适，稳定。活化使用培养基要与保藏使用培养基基本相同（2）定期进行菌种选育工作（2分）通过自然选育和诱变育种的方法，选育遗传性能稳定的高产菌株。3
