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1、中学高效课堂 高二生物选修1导学案 课 题 专题2 课题1 微生物的实验室培养 导学案备课时间授课时间编号备课教师备课组长课型学习目标1.了解培养基的用途、种类及一般成分，2.掌握培养基制作的一般的步骤，3.掌握微生物分离中的划线法和涂布法。4.学会一般的消毒、灭毒的方法，进行无菌技术的操作。德育渗透通过本节学习，了解和掌握生物技术在日常生活中的应用，所以要认真学好生物知识。学习重点培养基的制备、微生物的培养的操作。学习难点培养基的制备和微生物的分离。学法指导课前预习，完成自主学习内容。课前阅读教材，完成自主学习部分，为课上合作探究作好准备。自主学习内容教师活动（一）培养基1概念：人们按照微生
2、物对 的不同需求，配制出供其 营养基质称为培养基 。可分为 培养基和 培养基。 2营养构成：各种培养基一般都含有水、 、 和无机盐，此外还要满足微生物生长对 、特殊营养物质以及氧气的要求。 3培养乳酸杆菌时需在培养基中添加 、培养霉菌时需将培养基PH调至 、培养细菌时需将PH调至 、培养厌氧微生物则需提供 条件。（二）无菌技术 A、获得纯净培养物的关键是防止外来 的人侵，具体操作如下： 1对实验操作的 、操作者的 和 进行清洁和消毒。 2将用于微生物培养的 、接种用具和培养基等器具进行 。 3为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 附近进行。4实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接
3、触。B、消毒和灭菌1消毒是指使用较为 的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。常用的方法有 消毒法和 消毒法。2灭菌是指使用 的理化因素杀死物体内外 的微生物。常用的方法有： 灭菌、 灭菌、 灭菌。（三）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 步骤：计算称量溶化灭菌倒平板1.计算：根据 比例，计算100mL培养基各成分用量。2.称量：牛肉膏较黏稠，可用玻棒挑取，同 一同称量。称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。3.溶化：加水加热熔化牛肉膏与称量纸取出称量纸加入蛋白胨和氯化钠继续加热加入 用蒸馏水定容到100mL（整个过程不断用玻棒搅拌，目的是
4、防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）。4.灭菌：将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加塞包扎后用 灭菌锅灭菌；所用培养皿用报纸包扎后用 箱灭菌。5.倒平板：待培养基冷却至 左右时在 附近操作进行。其过程是：在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰；左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖。待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。（四）纯化大肠杆菌 微生物接种最常用的是 划线法和 涂布平板法。1平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续 的操作，将聚集的菌种逐步 分散到培养基的表面。其操作步骤是：将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。在酒精灯火焰旁冷却接
5、种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的。将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划35条平行线，盖上皿盖，不要划破培养基。灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将第五区的划线与第一区划线相连。将平板倒置放在培养箱中培养。2稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度 ，然后将不同稀释度的菌液分别 到琼脂固体培养基的表面，进行培养。3.培养：将接种后的培养基和一个 的培养基都放入 恒温箱中，培养12h和24h后喷喷别观
6、察并记录结果。4.菌种的保存(1)对于频繁使用的菌种，可以采用_保藏的方法。临时保藏方法将菌种接种到试管的固体_上，在_的温度下培养。当菌落长成后，将试管放入_的冰箱中保藏。以后每_个月，都要重新将菌种从旧的培养基上_到新鲜的培养基上。缺点：这种方法保存的时间不长，菌种容易_或产生_。(2)对于需要_保存的菌种，可以采用_管藏的方法。在3mL的甘油瓶中，装入1mL甘油后_。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在_的冷冻箱中保存。合作探究问题1：无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？问题2：利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？问题3：在制备
7、牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？问题4：牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质？问题5：锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？问题6：倒平板完成后，为什么要将冷凝后的平板倒置？问题7：若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？问题8：取菌种前灼烧接种环的目的是什么？ 为什么除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环？ 取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是？当堂检测一、选择题、1下列有关培养基的叙述正确的是( ) A培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B培养基只有两类：液体培养基和固体培养基
8、 C固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基 D微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌5制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( ) A计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 C计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D计算、称量、灭菌、溶化、倒平板8有关稀释涂布平板法，叙述错误的是( ) A首先将菌液进行一系列的梯度稀释 B然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面来源:Zxxk.Com C再放在适宜条件下培养 D结果都可在培养基表面形成单个的菌落10将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37恒温箱的目的是( ) A对比观察培养基有没有被微生物利用
9、 B对比分析培养基是否被杂菌污染C没必要放人未接种的培养基 D为了下次接种时再使用11关微生物营养物质的叙述中，正确的是A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量12作为自养生物唯一碳源的是（ ）A糖类 B 石油 C 二氧化碳 D 花生粉饼13大肠杆菌的代谢类型是（ ）A 自养需氧 B异氧严格厌氧 C异养需氧 D 异养兼性厌氧15下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是（ ）A含碳有机物 B蛋白胨 C含碳无机物 D花生粉饼等天然物质16平板冷却凝后要将平板倒置，其意义是（ ）A利于大肠杆菌的接种 B防止杂菌污染 C利于培养的冷却
10、D 防止皿盖冷却水倒流入培养基二、非选择题119世纪中期，关系到法国经济命脉的酿造业曾一度遭受毁灭性的打击。在生产过程中，出现了葡萄酒变酸、变味的怪事。(1)根据你所掌握的知识分析导致生产失败的根源是什么?(2)由此得出研究和应用微生物的前提是防止 2在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?3在做第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线?分层作业课后训练案反思反馈课题1 微生物的实验室培养 导学案答案 【当堂检测】15 ACDBD 69 CDCD 二、非选择题10(1)导致生产失败的根源在于发酵物中混入了杂菌。(2)杂菌入侵，获得纯净的培养物。 11不能 因空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 12因划线后线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，这样最终就能得到由单个细菌繁殖而来的菌落 第1页（共6页） 第2页（共6页）
