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1、现场样品的采集、保存和运输在现场调查中，很重要的一项工作是现场样品的采集、保存和运输。正确采集、妥善保存、和尽快送检样品，以及随后对样品检测结果进行正确的判读和分析。一、样品采集的目的、作用和原则现场调查的目的主要可分为两大类：一是查明突发公共卫生事件或疾病暴发流行的原因，二是进行卫生质量监测和评价。尽管根据调查目的、检测对象和样品种类不同，采样具有其特殊性，但应该遵循如下总原则：1.注意生物安全：采样中避免造成人员感染、标本和环境的污染。采用防护装备，注意安全操作和安全包装样品。需要采取的具体措施包括如下两方面：个人防护：采样时要戴手套，接触不同患者时不能重复使用一副手套，以免交叉感染，并注
2、意手套是否有小的破损；采样中尽可能穿防护服，根据所估计的疫情级别，选择不同的防护服；采样后消毒要穿戴防护服和厚橡胶手套，对污染区表面和溢出物进行消毒；如怀疑有高度传染力的病原，需使用护目镜、呼吸面罩等；为了防止意外，确保安全，采样应备有急救包，供意外泄露时应急使用。恰当处理污染废弃物：污染的可废弃设备和材料应先消毒后废弃；用过的针头妥善收集消毒，并按规定销毁或损毁；在暴发疫点使用过的防护服、设备、材料等使用化学消毒剂消毒后再清洗，特殊情况也可在现场建简易焚烧炉焚烧。2.注意采样的代表性或针对性：以卫生质量评价为目的的样品采集，影响采样代表性的因素包括采样量、采样部位、采样时间、采样的随机性和均
3、匀性，以及按批号抽样。同时还应考虑原料情况（来源、种类、地区、季节等）、加工方法、运输、保藏条件、销售中的各个环节（例如有无防蝇、防污染、防蟑螂及防鼠等设备）及销售人员的责任心和卫生认识水平等对样品可能的影响。以查明突发公共卫生事件或疾病暴发流行的原因为目的的样品采集，不要求样品的代表性，强调针对性，尽可能采集病原微生物含量最多的部位和足够检测用的样本；根据疾病表现和流行病学调查资料，指导采集正确的样品。3.注意采样时间和种类：一般原则是根据不同疾病的特点和临床表现，确定采样时间和标本种类。以分离培养细菌为目的，则应尽量在急性发病期和使用抗生素之前采集标本，如果已使用抗生素，采样和分离培养最好
4、加入相应的中和剂（中和样品中残存的抑菌物质）或进行其他处理，避免抗菌药物对细菌培养的干扰。作病毒分离和病毒抗原检测的标本，应在发病初期和急性期采样，最好在发病12天内采取，此时病毒在体内大量繁殖，检出率高。4.注意避免采样引入新的污染或者对微生物的杀灭因子：所有采样用具、容器需严格灭菌，并以无菌操作采样。对容器基本要求是选耐用材料制成，容器包装好后可防渗漏，能承受空中或地面运送过程中可能发生的温度和压力变化。对微生物样品，应避免采样时对微生物的杀灭作用和引入新的抑菌物质，如容器是否有消毒剂的残留，或使用刚烧灼未冷却的采样工具。并注意保护目的微生物，注意使用正确的采样液和加入中和剂。5.注意对样
5、品的详细标记：用于卫生质量评价的样品，应标明样品名称、编号、采样时间、采样量、采样者、检测项目等。 二、样品采集的方法和注意事项1.用于微生物分离培养或抗原检测的生物性样品：主要用于查明突发公共卫生事件或疾病暴发流行的原因。（1）咽拭子、洗漱液或痰液标本：咽拭子的采集：让患者仰头张口，用压舌板压舌，用无菌棉拭子在咽部涂抹数次后，放入含2mlHank液的试管中，棉拭子接触手的部分应及时折断或剪断去掉，然后盖紧试管。洗漱液的采集：用生理盐水或自配淡盐水约15ml作为洗漱液，让患者咳嗽后，倒入灭菌生理盐水或自配淡盐水约15ml，反复洗漱咽部1分钟，直接将洗漱液吐入灭菌容器内。痰液标本：肺部感染应采取
6、痰标本，以清晨第一口痰为最佳。采取标本的时间一般在发病的第一日采集，最迟不得超过3日，最好选择体温在38以上时采集。（2）粪便标本：对黏液脓血便应挑取黏液或脓血部分，液状粪便采集水样便或含絮状物的液状粪便25ml；成形粪便至少取蚕豆大小粪便1块（约5g）放于灭菌容器内，最好加有保存液或增菌液。若无法获得粪便时，可用保存液或增菌液湿润过的棉拭子插入肛门45cm深处（小儿23cm）轻轻转动一圈，取直肠表面的黏液后取出，盛入运送培养基或保存液中送检，为保证多个检验项目的开展，同一患者应至少采集2支肛拭。采样时注意勿将尿液或水混入粪便或容器内，采样后尽快塞紧或旋紧容器，所采取的粪便标本应尽快送检，运送
7、时间不得超过2小时，否则应保存在48条件下送检；集体腹泻或食源性疾病暴发患者粪便采集，应根据患者人数决定采取标本的数量；尽量在急性腹泻期及用药前采集。（3）血液标本：作血液病原培养时，严格无菌采静脉血，一般成人采血1015ml，儿童25ml，婴儿0.52ml，放入无菌的加入抗凝剂的有螺口容器或培养瓶中送检。作血片、暗视野检查可采耳垂血或指尖血。（4）尿液标本：主要采用中段尿采集法，先用肥皂水清洗外阴部，再以无菌水洗净，一般取首次晨尿的中段尿1020ml于无菌容器内。结核分枝杆菌集菌检查时，以一清洁容器留取24小时尿，取沉渣1015ml送检。注意无菌操作并在用药前采集，最好在23小时内送到实验室
8、检测，否则应在48条件下保存运送样品。（5）脑脊液：在无菌条件下由腰椎穿刺抽取35ml，放于无菌试管或厌氧瓶内（需厌氧培养时）。用于细菌培养时标本采集后应立即送检；用于病毒培养时在48最多可维持48小时，否则需在-70保存；本操作最好在医院内由有经验的医生按腰椎穿刺术进行。（6）皮肤标本：有时需要采集皮疹或皮肤病变标本帮助诊断。如怀疑皮肤炭疽或淋巴腺鼠疫时可从病变皮肤（焦痂和腹股沟淋巴结）取样做细菌学培养。出现囊疱疹或脓疱疹时可直接从囊疱或脓疱采集液体用于镜检或培养。采集疱疹标本时要注意无菌操作，刺破疱囊后用无菌拭子尽量拭抹足够量的疱疹内液体。（7）尸体标本：进行解剖和取样。解剖前观察并记录外
9、观状态，如新鲜程度、皮肤粘膜、淋巴结、尸僵程度和自然孔有无血性渗出物等。剖开后应观察皮下有无出血，胶样水肿，淋巴结、肝、脾是否大和有无其他病变，肺部有无充血，肝样实变、化脓和结节性病灶等。如需要采血则需进行心脏穿刺。采脑组织样本时，如不开颅，可用穿刺长针由鼻孔插入，一直刺到脑干和间脑部位吸出脑组织少许。剖检森林脑炎尸体时，可采取丘脑和小脑部分，其他型别脑炎可采海马回部位的脑组织块。如取脏器组织，先用灼热的金属压舌板接触一下采样部位，瞬时烙焦表面，清除杂菌，用剪刀剪取深部组织块。供分离病毒的组织要在死后5小时内取样。尸体如已腐烂，可锯一段带骨髓的股骨送检。至少取12g感染部位标本，放入单独的装有
10、相应液体或培养基的无菌容器中（注意贴牢标签和拧紧螺口），这些液体如：用于组织病理学切片的固定液，用于制备免疫荧光显微技术所需的冷冻切片的无菌盐溶液，用于分离细菌或病毒所需的各种转运培养基。装样本的容器封口后，表面用碘酒涂擦消毒后送检。为了避免尸体和解剖时的污染物成为传染源，解剖后尸体最好火化；不能火化则应离村庄和交通要道1Km以外，深挖2m以上土坑，坑内和尸体周围撒生石灰，先填入可能被污染的土，后用净土填平；所用器材和隔离衣，凡耐热者均煮沸消毒40分钟，橡胶和塑料制品用15含氯消毒剂浸泡6小时以上。2.用于病原体抗体检测的标本：通常包括血液和脑脊液。采集血清样本可将1Oml静脉血移入无抗凝剂的
11、无菌螺口管，室温静置30分钟使之凝集，然后置48至少12小时（在此温度下可存放4872小时），离心收集血清。如能立即检测，采集的血液应在室温下尽快分离血清。如用于微量法试验，可用三棱针刺手指或耳垂部，再用毛细管采集，一般不少于0.3ml.用于检测IgM的血清一般采于发病1个月内；用于检测IgG的血液应于发病初期（13天）和恢复期（第一次采血后34周）各采集1次。脑脊液采集方法同前所述，一般于出现神经症状时采集，查IgM、需采1份脑脊液，而查IgG则需收集2次，采集时间如前所述。3.环境样品：可用于检测环境被污染的状况，并对其进行卫生学评价，也可作为食源性疾病、突发公共卫生事件的原因样本。这里主
12、要介绍空气、水、土壤样品的采集方法。（1）空气样品：一般需要用空气采样器采集，用于检测微生物或化学因子，包括毒物。空气中细菌和真菌还可使用平板沉降法。空气采样器有不同的分类方法，种类繁多，如按流量的不同，采样器可分为大、中、小三类：500Lmin为大流量，49911Lmin为中流量，10Lmin为小流量；根据采样器所用介质性质可分为固体采样器和液体采样器；根据采样器的工作原理可分为撞击式、沉降式、过滤式、静电吸附式、旋风式和离心撞击式六种。平板沉降法由于方法简单，不需要特殊设备，虽然准确性低于仪器法，但仍被广泛应用，采样方法是将琼脂平板置于各采样点，打开平皿盖，扣放于平皿旁，暴皿于规定时间后立
13、即盖好盖送检；注意根据房间面积确定采样布点，室内面积30m2时，设内、中、外对角线3点，距墙壁1m，距地面高1.5ml；30m2者，设4角及中央5点，距墙壁1m，采样高度距地面高1.5m处。（2）水样：水样来源主要是河水、湖水、地下水和自来水，在疫区还包括稻田、塘水、井水和邻近畜舍、厕所的积水点。采样器具有用于手工采样的采样瓶和自动采样器。手工采样是将水样瓶用铁架固定，塞住瓶口，待瓶沉入到一定深度时拉开瓶塞，让水样进入。自动采样是用自动采样器在一定间隔时间中或连续采集样品，分别放入样品瓶或合并于一个样品瓶中成为混合样。疫区传染病病原污染的上述水体，采集时最好采非日光直射处的表层水。采集自来水样
14、品时，先用酒精灯将水龙头烧灼消毒，然后将龙头打开，放水510分钟，再采集水样。采样量因工作条件和样品处理方法不同而不同，如直接用于增菌可采2501000ml；先作絮凝或离心浓缩处理时，以每个采样点取100200ml为宜。生活饮用水样微生物检验的采集和盛装容器均须无菌，如水中有余氯，在容器灭菌前应向内加入硫代硫酸钠以还原余氯。用于化学因子检测的水样盛装容器可以不灭菌，但应彻底清洗干净。（3）土壤样本：根据检测目的选择有代表性的土壤，确定采样地点。按对角交叉（五点法）取样；用灭菌工具先除去地表枯枝落叶，再铲除1cm左右表层土，以避免地面微生物与土样混杂；用烧灼过的勺或铲取土样约200300g，装于
15、灭菌容器内，并注意保留适当空间，混合后，标明采样地点、深度、日期后送检。综上可见，样品类型很多，而不同微生物，需要采集的样品和采样要求各异，表2-5、表2-6为主要法定报告传染病检验标本采集的相关要求，供参考。4.产品样本：包括食品、化妆品、涉水产品、消毒及卫生用品等，主要用于卫生理化和卫生微生物指标检测，对其进行卫生学评价及产品效果评价。应注意包装的完整性和抽样的随机性。5.用于调查中毒的样品：中毒的因子可分为化学性、生物性和物理性三类，中毒的途径主要有消化道和呼吸道，而中毒的表现也各种各样，如急性胃肠炎、呼吸道症状、神经系统症状或者全身多器官损坏等，因此调查中毒的样品既包括食品、水、空气和
16、食品接触的相关人员的样品，又包括中毒者的呕吐物、排泄物、血液等临床标本，而中毒的原因样品往往只能一次性提供。分述如下：（1）胃内容物：是确定中毒的最好样本之一。可以通过收集患者呕吐物、洗胃液、胃内抽取液和尸体解剖获得。在采集时要注意避免污染，洗胃液最好采集最初抽出的，用高锰酸钾洗胃后的胃液意义要小些。在收集尸检材料中的胃内容物时，要注意胃的底部胃液的收集，因为比重大、溶解度低的物质往往沉淀于底部，如毒鼠强。采集的胃内容物量较大时，可取出后倾倒入一较大的玻璃漏斗内，漏斗的出口先塞住，混杂在胃内容物中的结晶和粉末将沉淀在漏斗底部，然后将上层液体和下层固体分别收集。在尸检中，对中毒迁延一段时间后才死亡的患者或生前已经进行洗胃的患者，要注意收集肠内容物。胃内容物的收集时效性强，错过了时机不能弥补。所采集的样本可用玻璃、聚乙烯或聚四氟乙
