生化检测基础

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1、关爱生命创新无限生化检测常识目录第一章 生化检测基本常识 (2) 第二章 常规生化检测项目简介 (2)第三章 生化仪参数测量原理(3)(5) ( 6) ( 9) ( 10)3.6 定标参数和浓度的计算 ( 17)21)( 21 )21)( 21 )( 21 )21)第四章 几个重要概念51 试剂空白52 样本空白53 水空白54 样本55 质控物质56 底物控制第一章 生化检测基本常识生化检测是医院检验科(或化验室)常用的检测手段,通常以人的血清为标本,通过测量血清中 各生化成份的含量,为临床诊断提供依据。一般要求病人空腹时采静脉血(全血)。全血经过离心机离心,分层为血清和血细胞,正常情况下,

2、 上层颜色浅且透明(血清),下层颜色深且不透明(血细胞)。有的血清较为特殊,或分层不明显(融 血),或血清不透明(脂血,呈牛奶状)。第二章 常规生化检测项目简介 丙氨酸氨基转移酶(ALT):又称为谷丙转氨酶(GPT)是衡量肝功能的重要指标,许多低端医 疗机构在做体检时仅测此一项生化项目。正常人一般在40U/L以内。干粉试剂复溶后为单试剂, 液体试剂一般为双试剂,应用动力学法可计算结果。 蛋白:通常测白蛋白(ALB)和总蛋白(TP),终点法。一般用单试剂,有的TP试剂为双试剂, 可用两点终点法测。蛋白质是血清的主要成份,大部份由肝细胞合成。通过蛋白的测定可以协助 某些疾病的诊断。 血糖:mmol

3、/L。市场上单、双试剂的商品化试剂盒都有,可用终点法(单试剂)或两点终点法测 量(双试剂)。 门冬氨酸氨基转移酶(AST):又称为谷草转氨酶(GOT),主要用于心肌和肝胆疾病及骨骼肌病 的诊断。是肝功能测试的常用指标之一。正常人一般在40U/L以内。同ALT 一样,无论单、双 试剂,用动力学法可计算结果。 碱性磷酸酶(ALP):主要用于肝胆疾病及骨骼病的诊断。是肝功能测试的常用指标之一。正常 人一般在240U/L以内。用动力学法计算结果。 Y-谷氨酰转移酶(GGT):主要用于肝胆疾病诊断。是肝功能测试的常用指标之一。正常人一般 在50U/L以内。用动力学法计算结果。 胆红素(BiL):胆红素的

4、测定,能准确反映黄疸的程度,判断黄疸的类型。一般测量总胆红素(TBil) 和直接胆红素(DBil)。甘油三酯(TG):其含量测定是血脂分析的重要内容之一。 总胆固醇(CHOL):是游离胆固醇和胆固醇酯的总称,其测定对高脂蛋白血症和冠心病的诊断 及发病机理的研究有一定意义。 高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C):主要在肝脏中合成,是血清中颗粒数最多的脂蛋白。其含量是 冠心病诊断的重要依据之一。肌酐(CREA):是肌酸代谢的最终产物,由肾脏排出。是肾功能的重要指标之一。尿素(Urea):是蛋白质分解代谢的终产物。血尿素测定是肾功能的最敏感指标。 载脂蛋白 A1(APOA1): 是高密度脂蛋白的主要组成

5、成分,临床上主要用于脑血管病风险度的估 计。载脂蛋白B(APOB):是低密度脂蛋白的主要组成成分,临床上主要用于冠心病的风险度的估计。 肌酸激酶(CK):肌酸激酶通常存在于动物的心脏、肌肉以及脑等组织的细胞浆和线粒体中,是 一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要激酶。可用于早期诊断急性心肌 梗,常见肌病(如进行性肌营养不良发作期、病毒性心肌炎、多发性肌炎、挤压综合征等严重肌肉 损伤)及脑血管疾病的诊断。 a-羟丁酸脱氢酶(HBDH):与肌酸激酶相同,用于诊断心肌梗死。 a-淀粉酶(AMY):在临床应用方面,a-淀粉酶活力升高与急性胰腺炎、胰腺管道阻塞、腹内疾病、流行性腮腺炎

6、及细菌性腮腺炎。钙、氯、铁、钾、钠、镁、磷:这 7 项都属于离子组合,用于诊断人体中离子的含量。常用检测项目表序号项目名称缩写组合参考值1.白蛋白ALB肝功能3555g/L2.总蛋白TP6080g/L3.碱性磷酸酶ALP15 112U/L4.门冬氨酸氨基转移酶AST (GOT)8 37U/L5.丙氨酸氨基转移酶ALT (GPT)0 65U/L6.Y -谷氨酰转移酶GGT0 50U/L7.直接胆红素DB0 6umol/L8.总胆红素TB0 18umol/L9.肌酐CREA肾功能53 115 卩 mol/L10.尿酸UA210 430umol/L11.尿素UREA12.胆固醇CHOL血脂13.甘油

7、三酯TG14.高密度脂蛋白HDL15.低密度脂蛋白LDL16.载脂蛋白A1APOA117.载脂蛋白BAPOB18.脂蛋白Lp (a)0 30mg/dL19.肌酸激酶CK心肌酶类21 190U/L20.肌酸激酶同工酶CK-MB0 25U/L21.a -羟丁酸脱氢酶HBDH70 180U/L22.乳酸脱氢酶LDH114 240U/L23.钙Ca离子24.氯Cl95 105mmol/L25.铁Fe9 30 卩 mol/L26.钾K27.镁Mg28.钠Na135 145mmol/L29.磷P30.a -淀粉酶AMY其它100 220U/L31.葡萄糖GLU第三章生化仪参数测量原理连续流动式自动化分析仪

8、也叫管道式分析仪,其特点是测定项目相同的各待测样本与试剂混 合后的化学反应,是在同一管道中经流动过程完成的。这类仪器一般可分为空气分段系统式和非 分段系统式。所谓空气分段系统是指在吸入管道的每一个样品、试剂以及混合后的反应液之间, 均由一小段空气间隔开;而非分段系统是靠试剂空白或缓冲液来间隔每个样品的反应液。在管道 式分析仪中,以空气分段系统式最多,且较典型,整套仪器是由样品盘、比例泵、混合管、透析 器、恒温器、比色计和记录器几个部件所组成。管道内的圆圈表示气泡,气泡可将样品及试剂分 隔为许多液柱,并起一定的搅拌作用。但气泡影响比色,必须在比色前除去。将几个单通道管道式分析仪结合起来,对一个样

9、品同时测定几个项目。著名的有12通道分析 仪,命名为顺序多项自动分析仪(sequential multiple auto analyzer)简称SMA12/60。同时发展为SMAC,C为计算机(computer)的缩写。这类大型分析仪至今仍有使用者。它对每个样品可同时 分析12个项目,每小时可分析60个样品。后来发现不加入空气泡,更有利于结果的检测,发展 为流动注射分析法(flow injection analysis)。试剂的流动仍用比例泵驱动,样品用转动阀加入液流, 反应后比色检测。离心式分析仪是1969年以后发展起来的一种分析仪,由Anderson设计,其特点是化学反应 器装在离心机的转

10、子位置,该圆形反应器称为转头,先将样品和试剂分别置与转头内,当离心机 开动后,圆盘内的样品和试剂受离心力的作用而相互混合发生反应,最后流入圆盘外圈的比色槽 内,通过比色计进行检测。离心式分析仪主要由两部分组成,一为加样部分,二为分析部分。加样部分包括样品盘、试 剂盘、吸样臂(或管)、试剂臂(加液器)和电子控制部分(键盘和显示器等)。加样时转头置于 加样部分。加样完毕后将转头移至离心机上。分析部分,除安装转头的离心机外,还有温控和光 学检测系统,并有微机信息处理和显示系统。1. 3分立式生化分析仪所谓分立式,是指按手工操作的方式编排程序,并以有节奏的机械操作代替手工,各环节用 传送带连接起来,按

11、顺序依次操作。分立式分析仪与管道式分析仪在结构上的主要区别为:前者 各个样品和试剂在各自的试管中起反应,而后者是在同一管道中起反应;前者采用由采样器和加 液器组成的稀释器来取样和加试剂,而不用比例泵;前者一般没有透析器,如要除蛋白质等干扰, 需另行处理。恒温器必须能容纳需保温的试管和试管架,所以比管道式分析仪的体积要大。除此 以外,其它部件与管道式的基本相似。分立式分析仪的基本结构如下图所示。Depout公司还推出 一种袋式分析仪,即试管变为塑料袋,反应在袋内进行,也以袋作比色杯。这种袋只能一次性使 用。抓怦LBODM $ I辐码反暫等IJT加唏腎穩堰勻 力|;试舸帰匀IW转恿卞比也蒔川己试酋

12、赴汪洁也麻岀比鱼心、上色的/也色卄或 忖尤光虞it干片式分析仪是80年代问世的。首先Eastman kodak公司以其精湛的化学工艺造出了测定血 清中血糖、尿素、蛋白质、胆固醇等的干式试剂片。当加上定量的血清后,在干片的前面产生颜 色反应,用反射光度计检测即可进行定量。这类方法完全革除了液体试剂,故称干化学法。 Boehringer Mannheim公司推出了用全血的干征试剂。即将血细胞排除于滤膜之外,而血浆与试剂 发生反应后显色检测。匣鱼区反应烛2察捷试和屋7阳r网 血浆分离层毀7600系列全自动生化分析仪是日立公司于1998年开发出来的系列分析仪。它是由各种不同 功能的模块组合而成,功能模

13、块包括有样本投入部、电解质测定的ISE模块、常规实验项目测定 的D模块、特殊实验项目测定的P模块、复查样本缓冲部和样本收纳部。根据D模块和P模块数 目组合成不同型号的分析仪。模块组合式实验室自动化系统包括:样品前处理系统,样品输送系统和样品后处理系统(生化分析,电解质分析,血液分析等)。 样品前处理系统由能独立工作,不同功能的各模块以同一标准来连接,通过计算机控制运行。由 样品投入部,离心分离部,开栓部,在线分注部,非在线分注部,贴条码部,盖栓部,样品分注 收存部,标本接收部等模块构成前处理系统,每一模块既是系统的一部分,又是独立的单元,可 根据不同需要选择使用,具有灵活性和扩展性。后处理系统

14、有电解质分析系统,生化分析系统以及血液分析系统等。1. 6全实验室自动化分析系统从检验标本处理开始,即标本的识别、传输、处理(分离血清等)、分注、分类(按项目分类)、 检测和收费的自动化流水作业,到分析后自动储存标本,检验结果的自动分析、报告与传送,自 动提示异常值或危险值,申请检验医师随时查询检验结果的全过程实现自动化、网络化。必Btrrr公伺aer(jset 2000仪器剤徇全自动生化分析仪一般由以下部分构成:探针系统、搅拌和冲洗系统、恒温系统、反应盘、 光路系统构成。2. 1探针系统液面检测技术:通过检测阻抗或电容、电流的变化,感知到空气和液面,可保证探 针的感应装置至液面时会自动停止下降,即可增加速度也可减少污染,防止堵塞。2. 2搅拌和冲洗系统搅拌系统是让样品和试剂混合后迅速分布均匀,保障测试正常进行。常用的搅拌方 法为冲入空气、搅拌、振荡等,但是都容易产生气泡和外溢等问题。目前最好的方法是 螺旋式搅拌棒附着

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