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1、中南林业科技高校高校生探讨性学习和创新性试验安排项 目 结 题 报 告项目名称一种同时测定药用植物虎杖中6种活性成分的分析方法建立与应用项目主持人向荣所在学校与院系中南林业科技高校 生命科学与技术学院项目级别国家级 省级 校级立项年份2014年指导老师王元清 余蓉联系电话（主持人）；（指导老师）填表日期2015年3月20日中南林业科技高校教务处制填写说明一、本表要按要求逐项仔细填写，填写内容必需实事求是，表达明确严谨。空缺项要填“无”。二、格式要求：表格中的字体用小四号仿宋体，1.5倍行距；需签字部分由相关人员以黑色钢笔或水笔签名。均用A4纸双面打印，于左侧装订成册。三、本页不装订。一、基本状
2、况项目名称一种同时测定药用植物虎杖中6种活性成分的分析方法建立与应用立项时间2014年完成时间2016年项目主要研究人员序号姓 名学号专业班级所在院（系）项目中的分 工1向 荣20120525生物技术1班生科院项目负责人、试验设计2孙 琴20120559生物技术2班生科院采样与试验分析3乔志斌20130495生物技术2班生科院数据分析与成果整理4周钰珂20130513生物技术2班生科院数据分析二、探讨成果简介项目成果类型产品 系统软件 论文 专利 其它（注：请在相应成果复选框内打“”，其它请详细说明）项目成果名称1.王元清，韩 彬，向 荣，孙 琴，张 陈，乔志斌，周钰珂，等. 总量统计矩结合聚
3、类分析与主成分分析评价虎杖饮片的一样性与差异性J. 中草药, 2015, 46(19): 2863-2869.2. 王元清，严建业，余蓉，向 荣，孙 琴，乔志斌，周钰珂，等.高校生探讨性学习与创新性试验活动探讨J.药学教化，2016,32（1）：71-74.项目探讨的目的、意义；探讨成果的主要内容、重要观点或对策建议；成果的创新特色、实践意义和社会影响；探讨成果和探讨方法的特色。限定在2000字以内。1.项目探讨的目的意义药用植物虎杖为蓼科多年生草本植物虎杖(Polyonum Cuspidatum Siebet Zucc)的干燥根茎和根，性味苦寒，归肝、胆、肺经，有利胆退黄，清热解毒，活血化瘀
4、，祛痰止咳等功效，临床主要应用于治疗湿热黄疸、淋浊、带下、烧烫伤、痈肿疮毒、毒蛇咬伤，血瘀经闭，跌打损伤，肺热咳嗽，热结便秘等疾病。虎杖药源丰富，我国大部分地区均产，主产于江苏、江西、山东、四川等地。始终以来，虎杖的成分、药理药效等方面都是探讨的重点。虎杖中主要含蒽醌类和二苯乙烯（芪）类成分，其中蒽醌类成分主要为大黄素苷、大黄酸、大黄酚、大黄素和大黄素甲醚等蒽醌类衍生物，芪类成分主要为白藜芦醇、虎杖苷等，具有抗炎、抗氧化、抗癌、抗肿瘤、抑制血小板凝合、调整脂蛋白代谢等功效。如何建立一种简洁、灵敏的方法同时测定虎杖中的蒽醌类成分与芪类成分来限制虎杖的质量是虎杖现代探讨的必定要求。因此，本项目在前
5、期广泛调研与预试验的基础上建立同时测定虎杖中6种活性成分并对不同产地虎杖与虎杖的不同部位中活性成分进行分析，为虎杖的质量评价与应用供应科学依据。2.探讨成果的主要内容、重要观点探讨过程中对分钟的色谱条件（包括色谱柱、流淌相、检测波长、流速等）进行摸索、对样品处理方法（包括样品处理方法、样品处理时间等）进行摸索，建立了虎杖中6种活性成分虎杖苷、白藜芦醇、大黄素、大黄酸、大黄素苷、大黄素甲醚同时测定的分析方法；并将这种方法用之于不同产地虎杖的含量测定与质量评价之中。在评价过程中采纳总量统计矩方法对虎杖中的全成分与定量成分进行了总量统计矩分析，获得各成分定量分析的总量统计矩参数。3.项目探讨成果的意
6、义虎杖中质量限制方面虽有指纹图谱定性与多成分含量测定的探讨，但没有采纳总量统计矩法对其指纹图谱进行定性定量分析的探讨报道；传统指纹图谱的分析方法大多是将指纹图谱的特征峰响应值分割不连的数据信息元，采纳相对应特征峰的多维向量方法进行计算推断。但由于中药特征峰的信息元简洁受到试验条件的干扰，同一组合成分难以出现完全相同的峰形和峰数，给峰峰相应特征峰的分析带来困难。而总量统计矩法是将指纹图谱作为众多高斯曲线叠加而成的概率密度函数曲线，用统计学的方法来分析指纹图谱的内在特征。本项目的探讨成果在多成分定量分析中建立虎杖化学指纹图谱后首次采纳总量统计矩结合聚类分析与主成分分析评价虎杖饮片一样性与差异性，从
7、而为虎杖饮片质量限制供应参考方法。4.探讨成果与探讨方法的特色采纳HPLC法建立同时测定虎杖多成分（虎杖苷、白藜芦醇、大黄素、大黄酸、大黄素苷、大黄素甲醚等）的含量测定方法，并以此方法评价不同产地虎杖中多种活性成分的含量差异；该项目探讨为含蒽醌类成分与芪类成分中药质量限制供应借鉴。在数据分析中首次采纳总量统计矩分析方法评价虎杖中各成分的总量统计矩参数差异，为中药质量限制供应了新模式。三、项目探讨总结报告预定安排执行状况，项目探讨和实践状况，探讨工作中取得的主要成果和收获，探讨工作有哪些不足，有哪些问题尚需深化探讨，探讨工作中的困难、问题和建议。（字数不限，可加页面）项目的执行状况1.查阅了大量
8、关于虎杖的文献资料，了解虎杖的探讨进展；2.收集了不同产地的虎杖药材，并进行了品种鉴定3.建立了不同批次样品的HPLC指纹图谱与定量分析方法。探讨工作中的成果1.查阅了大量关于虎杖的文献资料，了解虎杖的探讨进展；撰写了“虎杖探讨进展”的综述2.收集了不同产地的虎杖药材，并进行了品种鉴定图1 虎杖原植物表1 不同批次与不同产地虎杖饮片来源1号（东塘药店）2号（中医附二药房）3号（中医附一药房）4号（济仁堂药房）5号（菁苹果药房）6号（九芝堂药房）201401201403201312201402201404201403甘肃湖南湖南广西安徽河北7号（老百姓药房）8号（万众药房）9号（探讨院药房）10
9、号（养天和药房）11号（药海棠药房）201311201402201312201311201312陕西湖南湖北安徽四川3. 建立了不同批次样品的HPLC指纹图谱与定量分析方法3.1色谱条件 色谱柱为安捷伦C18 柱（250 mm4.6 mm，5m）；以乙腈-0.1%磷酸水为流淌相，梯度洗脱；检测波长为变波长；流速为0.8 mL/min；柱温为30。见图2.图2 不同批次虎杖药材的指纹图谱3.2 样品处理 称取虎杖粗粉约0.5 g，置于50 mL量瓶中，加入甲醇超声30 min，冷却，静置，定容，摇匀，0.45 m微孔滤膜过滤即得供试品溶液。图3 不同成分不同提取时间考察3.3共有峰的保留时间与相
10、对峰面积以各批次的4号峰(白藜芦醇)为参照峰，计算同一图谱中各共有峰的相对峰面积，其结果见表2。表2 不同批次虎杖样品各共有峰的保留时间与相对峰面积峰号tRmin各批次样品相对峰面积平均值123456789101119.483.30140.96590.46807.20811.67820.85801.62942.13182.24751.65643.29442.3124212.750.27190.15540.08580.67580.20300.09520.13780.16590.25380.23570.24590.2299315.480.11470.05870.02070.40630.11630.
11、04340.10980.14070.14300.08200.19170.1292S20.011.00001.00001.00001.00001.00001.00001.00001.00001.00001.00001.00001.0000522.710.08870.02700.01520.18750.05510.02820.04610.07550.13870.03790.08780.0712623.892.27790.98940.56606.81482.18200.78331.49882.22592.94101.38133.38082.2760727.670.46850.15210.15780.
12、52180.19100.14860.21310.29190.48380.20170.42470.2952829.550.34700.14000.08840.90980.32850.12530.17070.29550.44450.24000.42760.3194933.070.34680.15150.14060.34860.09050.08850.21440.24410.53190.14030.24340.231610034.330.07430.01650.01520.32520.09550.01760.02630.03400.01340.05580.06240.06761135.000.005
13、40.00300.00220.04850.00370.01070.00430.00240.00460.00380.00610.00821236.671.78381.11760.97956.80771.40750.56851.25271.51241.17561.01242.92541.86791339.330.31130.17290.22701.25290.20560.13830.19810.26340.23780.22960.50240.33953.4总量统计矩分析采纳指纹图谱的一种定性定量探讨新方法：总量统计矩分析法计算不同批次的虎杖样品的总量统计矩参数，如总量零阶矩（AUCT）、总量响应率(AUCPWT)、总量一阶矩(MCRTT)、总量二阶矩(VCRTT)等，计算结果见表3 。表3 各批次虎杖样品的总量统计矩参数样品号参 数AUCT(AUmin)AUCPWT(AUminmLmg-1)MCRTT(min)VCRTT(min2)1号1.411062.331032.011011.191022号1.711062.581032.211011.161023号1.561062.121032.451011.081024号1.321061.911032.301011.261025号1.94
