酶作用的动力学观察 一、目的和要求1．了解温度，PH值对酶活性的影响2．了解酶促反应的激活与抑制二、实验原理酶，有的是单纯蛋白质，有的是结合蛋白质，因此，凡是能够引起蛋白质变性的因素，都可以使酶丧失活性，温度，PH值，激活剂和抑制剂对酶的活性都有显著的影响酶活性通常是通过测定酶促反应的底物或产物量的变化来进行观察本实验用唾液淀粉酶为材料来观察酶活性受理化因素影响的情况淀粉在该酶的催化作用下会随着时间的延长而出现不同程度的水解，从而得到各种糊精乃至麦芽糖、少量葡萄糖等水解产物碘液能指示淀粉的水解程度： 淀粉 糊精 麦芽糖 + 少量葡萄糖加碘后： 蓝色 紫红色、暗褐色或红色等 棕黄色（碘本身颜色）淀粉遇碘可呈紫色、暗褐色与红色，而麦芽糖与葡萄糖遇碘则不呈颜色反应，仅显示碘液的原色 1．温度对酶活性的影响酶的催化作用受温度的影响很大，一方面与一般化学反应一样，酶促反应速度随着温度的升高而增大当温度升高到一定程度时，酶促反应的速度达到最大值此时的温度称为该酶的最适温度另一方面酶是一种蛋白质，温度过高会引起蛋白质变性，导致酶的失活，因此，反应速度达到最大值以后，随着温度的升高，反应速度反而逐渐下降，以至完全停止反应。
2．PH值对酶活性的影响酶的活性受环境PH的影响极为显著通常酶只有在一定的PH范围内才表现活性，一种酶表现活性最强时的PH值，称为该酶的最适PH，偏离最适PH时酶的活性逐渐降低，偏离越远，其活性越低，不同的酶最适PH不同，例如，胃蛋白酶的最适PH为125－25，淀粉酶的最适PH为68，但是酶的最适PH还受底物性质和缓冲液性质的影响，在磷酸缓冲液中，淀粉酶的最适PH为63．酶的激活剂和抑制剂酶的活性受某些物质的影响，有些物质能使酶的活性增加，称为酶的激活剂；有些物质能使酶的活性降低，称为酶的抑制剂，例如，氯化钠为唾液淀粉酶的激活剂，硫酸铜为抑制剂，激活剂和抑制剂通常是具有特异性的 三、试剂和器材 1．试剂（1）1％淀粉溶液（2）PH50的磷酸氢二钠一—柠檬酸缓冲液3）自制唾液淀粉酶（见实验一）（4）碘化钾―碘液：将碘化钾20克及碘10克溶于100毫升蒸馏水中，用时稀释10倍5）1％氯化钠溶液（6）2％硫酸铜溶液2．器材（同实验一） 四．操作方法1．温度对唾液淀粉酶活性的影响 取三支试管，编号，按下表操作 试管号试剂1231％淀粉溶液（滴）555PH6.6缓冲液（滴）101010自制唾液淀粉酶溶液（滴）55／煮沸过的唾液淀粉酶溶液（滴）／／5混匀，1号管放入冰水中，2，3号管放置37℃恒温水浴中保温，10分钟后三管同时取出各加碘试剂1滴，摇匀；观察各管颜色有何不同，解释之。
2．PH值对唾液淀粉酶活性的影响取5支试管，编号，按下表操作 试管试剂123451％淀粉溶液（滴）55555缓冲液（滴）PH5.010PH5.810PH6.610PH7.410PH8.010自制唾液淀粉酶溶液（滴）55555混匀，置37℃水浴箱中保温，10分钟后取出碘试剂（滴）11111摇匀，观察各管颜色有何不同，解释这种现象3．抑制剂和激活剂对唾液淀粉酶活性的影响取三支试管，编号，按下表操作 试管试剂1231％淀粉溶液（滴） 5 55PH6.6缓冲液（滴） 10 10101％氯化钠溶液（滴） 4 //2％硫酸铜溶液（滴） / 4/自制唾液淀粉酶溶液（滴） 5 55混匀，置37℃水浴箱中保温，10分钟后取出碘试剂（滴） 1 1 1摇匀，观察各管颜色有何不同，试说明原因。