斐林试剂和双缩脲试剂区别1、试剂的浓度和配制方法不同斐林试剂：甲液：0.1g/mL 的 NaOH 溶液；乙液： 0.05g/mL 的 CuSO4 溶液使用前临时配制，在2mL 的甲液中滴入 4 滴～ 5 滴乙液，振荡使混合均匀后即可双缩脲试剂： A 液： 0.1g/mL 的 NaOH 溶液； B 液： 0.01g/mL 的 CuSO4 溶液分别配制好 A 液和 B 液即可2、试剂的作用和鉴定原理不同斐林试剂：作用：可鉴定可溶性还原糖原理：甲液和乙液混合后产生Cu( OH)2 沉淀，Cu( OH ) 2 与含醛基（—CHO ）的可溶性还原糖，在加热条件下反应，将Cu(OH )2 还原为砖红色的Cu 2O 沉淀双缩脲试剂：作用：可鉴定蛋白质溶液原理：在碱性溶液（NaOH ）中，双缩脲（H 2NCONHCONH2 ）能与Cu 2反应，形成紫色络合物由于蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键（—因此，蛋白质都可以与双缩脲试剂发生反应而使溶液呈现紫色CO— NH —），3、试剂的使用方法不同斐林试剂： 使用时现配现用， 要水浴加热 如果斐林试剂放置一段时间，因 Cu( OH)2 沉淀在溶液底部而无法使用。
使用时，甲液和乙液不可分别加入到待测液中，否则，待测液（苹果组织样液）中的有机酸会中和 NaOH ，使产生的 Cu(OH ) 2 不足而影响鉴定双缩脲试剂： 使用时， 双缩脲试剂 A 液和双缩脲试剂 B 液要分别先后加入到待测液中，不需要加热双缩脲试剂 A 液和双缩脲试剂 B 液不可以混合后再加入待测液如先混合，则会产生Cu(OH ) 2 沉淀而无Cu2产生加入的双缩脲试剂B 液（ CuSO4 ）也不能过量，否则蓝色的 Cu(OH ) 2 会遮盖产生的紫色4、反应中出现的颜色不同斐林试剂鉴定可溶性还原糖，出现的颜色变化为：浅蓝色→棕色→砖红色待测液加入刚配制的斐林试剂，溶液是浅蓝色；水浴加热后，一部分 Cu(OH ) 2 被还原为砖红色的 Cu 2 O ，溶液呈现两种颜色的混合色——棕色；随着反应的完成， Cu( OH) 2 全部被还原为 Cu 2 O ，溶液呈砖红色双缩脲试剂鉴定蛋白质，出现的颜色变化为：无色→浅蓝色→紫色加入双缩脲试剂 A 液，溶液无色；再加入双缩脲试剂B 液，有 Cu2形成，溶液呈浅蓝色；振荡均匀后，反应完成，溶液呈紫色。