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1、动物实验根本技术内容：l 实验动物抓取保定方法 l 实验动物标记编号方法 l 实验动物被毛去除方法 l 实验动物给药途径和方法 l 实验动物体液和采血方法 l 实验动物麻醉方法 l 实验动物处死方法 实验动物抓取固定方法一、小鼠的抓取固定1、小鼠性情较温顺，挣扎力小，比拟容易抓取和固定。抓取时，用左手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部放在格板或铁笼上。 2、趁着小鼠试图挣脱的瞬间，迅速用另外三个手指压住小鼠的尾巴根部握入手掌。 3、放松拇指和食指，用另外三个手指控制小鼠，然后用食指和拇指捏住小鼠头部两边疏松的皮肤提起小鼠，完成抓取固定。 n 4、小鼠性情较温顺,一般不咬人,比拟容易固定。通常是用右手提
2、起小鼠的尾部，将其放在鼠盖或其它粗糙外表上，在小鼠向前爬行时，迅速用左手拇指和食指捏住其双耳及颈后部皮肤，将小鼠置于左手掌心上，再以右手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。考前须知：抓小鼠尾巴应抓住尾巴中部或根部，不能仅捏住小鼠尾巴的尾端，因为这时小鼠的重量全部集中到尾端，如果小鼠挣扎，有可能弄破尾端。在进行解剖、手术、心脏采血、尾静脉注射时，可将小鼠用线绳捆绑在木版上，或固定在尾静脉注射架及粗试管中。二、大鼠的抓取固定 抓取大鼠前最好戴上防护手套，右手轻轻抓住大鼠尾巴的中部并提起，迅速放在笼盖上或其他粗糙面上，左手顺势按、卡在大鼠躯干背部，稍加压力向头颈部滑行，以左手拇
3、指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤，其余三指和手掌握住大鼠背部皮肤，完成抓取固定。三、豚鼠的抓取固定 n 捉拿时，实验人员可先用手轻轻扣、按住豚鼠背部，顺势抓紧其肩胛上方皮肤，拇指和食指环其颈部，用另一只手轻轻托住其臀部，即可将豚鼠抓取固定。 四、兔的抓取固定抓取固定方法是用右手把两耳拿在手心并抓住颈后部皮肤，提起家兔，然后用左手托住臀部。另一种方法是使用家兔固定栏，翻开固定栏的前盖，抓取家兔放进栏内，右手抓住家兔耳朵将头部拉过固定栏的开孔，迅速关上栏门 。五、犬的抓取固定犬性情凶猛、咬人，但通人性。如果犬在动物实验前曾与实验人员有接触，受过驯养调教，抓取固定就比拟容易。受过驯养的犬或哔格犬的
4、抓取固定，实验人员应弯下膝盖，一只胳膊绕着它的胸部，另一只胳膊绕着后肢的大腿，两只胳膊一起绕着将犬抱起。取固定比拟凶猛的犬时，应使用特制的长柄犬头钳夹住犬颈部，注意不要夹伤嘴或其他部位。夹住犬颈后，迅速用链绳从犬夹下面圈套住犬颈部，立即拉紧犬颈部链绳使犬头固定。再用1米长的绷带打一活套从犬的反面或侧面将活套套在其嘴面部，迅速拉紧活套结，将结打在颌上，然后绕到下颌打一个结，最后将绷带引至颈后部打结固定。实验动物标记编号方法一、染色法染色法是用化学药品在实验动物身体明显的部位，如被毛、四肢等处进行涂染，以染色部位、颜色不同来标记区分实验动物，是最常用、最易掌握的经济犯罪分子方法。1、常用染色剂13
5、%5%苦味酸溶液，可染成黄色。20.5%中性红或品红溶液,可染成红色。32%硝酸银溶液，可染成咖啡色涂染后在可见光下暴露十分钟。4煤焦油酒精溶液，可染成黑色。2、染色方法染色法适用于被毛白色的实验动物如大白鼠、小白鼠等。1单色涂染法。单色涂染法是用单一颜色的染色剂涂染实验动物不同部位的方法。常规的涂染顺序是从左到右、从上到下。左前肢为1号、左侧腹部2号、左后肢3号、头部4号、背部5号、尾根部6号、右前肢为7、右侧腹部8号、右后肢9号、不作染色标记为10号。此法简单、易认，在每组实验动物不超过10只的情况下适用。2双色涂染法 双色涂染法是采用两种颜色同时进行染色标记的方法。例如用苦味酸黄色染色标
6、记作为个位数，用品红红色染色标记作为十位数。个位数的染色标记方法同单色涂染法；十位数的染色标记方法参照单色涂染法，即左前肢为10号、左侧腹部20号、左后肢30号、头部4 0号、背部50号、尾根部60号、右前肢70号、右侧腹部80号、右后肢90号，第100号不作染色标记。比方标记第12号实验动物，在其左前肢涂染品红红色，在其左侧腹部涂上苦味酸黄色即可。双色法色法可标记100位以内的号码。3直接标号法直接标号法是使用染色剂直接在实验动物被毛、肢体上编写号码的方法。实验动物太小或号码位数太多时，不宜采用此方法。染色法虽然简单方便，不会给实验动物造成损伤和痛苦，但是长时间实验会使涂染剂自行褪色，因而染
7、色法对慢性实验不适用。如果所做慢性实验只能采用此种染色方法，那么应注意不断地补充和加深染色。另外，常用染色剂的毒性对实验动物的影响也是需要注意的一个问题。 二、孔法耳孔法是用打孔机直接在实验动物的耳朵上打孔编号，根据打在动物耳朵上的部位和孔的多少，来区分实验动物的方法。用打孔机在耳朵打孔后，必须用消毒过的滑石粉抹在打孔局部，以免伤口愈合过程中将耳孔闭合。耳孔法可标记三位数之内的号码。另一种耳孔法是用剪刀在实验动物的耳郭上剪缺口的方法，作为区分实验动物的标记。三、烙印法 烙印法是直接把标记编号烙印在实验动物身体上的方法，尤如盖印章一样。烙印方法有两种，对犬等大动物，可将标记号码烙印在其皮肤上如耳
8、、面、鼻、四肢等部位，对家兔、豚鼠等动物，可用数字号码钳在其耳朵上刺上号码；烙印完成后，伤口涂抹酒精黑墨等颜料，即可清楚读出号码。烙印法对实验成绩动物会造成轻微损伤，操作时宜轻巧、敏捷，必要时麻醉，以减少痛苦。四、挂牌法挂牌法：是将编好的号码烙印在金属牌上，挂在实验动物颈部、耳部、肢体或笼具上，用来区别实验动物的一种方法。金属牌应选用不生锈、刺激小的金属材料，制成轻巧、美观的小牌子。实验人员可根据实验动物品种、实验类型及实验方式，选择适宜的标记编号方法。一般来说，大、小鼠多采用染色法，家兔宜使用耳孔法，犬、猴、猫较适合挂牌法，犬还可用烙印法。 实验动物被毛去除方法一、拔毛法实验动物被固定后，用
9、食指和拇指将暴露部位的毛拔去。进行采血或动、静脉穿刺时，常用此方法暴露血管穿刺的部位。拔毛不但暴露了血管，而且刺激了局部组织产生扩张血管的作用。如作兔耳缘静脉和鼠静脉采血，就要拔去上述静脉外表的被毛。二、剪毛法实验动物被固定后，用水湿润局部被毛，绷紧局部皮肤，用剪刀紧贴皮肤外表剪去被毛。这是家兔和犬颈部手术，家兔胸、腹部手术，局部皮肤需要去除被毛时常采用的方法。注意剪毛过程中切不可提起被毛，以免剪伤皮肤。同时为了防止被毛到处飞扬，应预先准备一个盛有自来水的杯子装载剪下来的被毛。 三、剃毛法实验动物固定后，用刷子蘸温肥皂水将需要暴露部位的被毛湿透，用剪刀剪去被毛，然后用剃毛刀逆被毛生长方向剃去残
10、留被毛。剃毛时必须绷紧局部皮肤，尽量不要剃破皮肤。剃毛法常用于大动物手术区域皮肤的术前准备。剃毛刀除专用刀具外，尚可用止血钳夹持半片新剃须刀片代替，但要小心不要割破皮肤或血管。四、脱毛法脱毛法是采用化学脱毛剂进行脱毛的方法。此法常用于大动物无菌手术，局部皮肤刺激性实验，观察实验动物局部血液循环等实验。1、常用脱毛剂配方1配方1：硫化纳8g溶于100ml水中。2配方2：硫化纳：肥皂粉：淀粉的比例为3：1： 7，再加水调至糊状。3配方3：硫化纳10g和生石灰15g溶于100ml水中。2、脱毛方法使用脱毛剂前应剪去局部被毛，但剪毛前不能用水湿润被毛，以免脱毛剂流入毛根造成损伤。脱毛时用镊子夹棉球或纱
11、布团蘸脱毛剂涂抹一层在已剪去被毛的部位，35分钟后，用温水洗去脱下的毛和脱毛剂。再用干纱布将水擦干，涂上一层油脂。注意操作时动作应轻巧，以免脱毛剂沾在实验人员的皮肤、粘膜上，造成不必要的损伤。实验动物给药途径和方法一、皮下注射注射时以左手拇指和食指提起皮肤，将连有51/2号针头的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、猫多在大腿外侧，豚鼠在后大腿的内侧或小腹部；大白鼠可在侧下腹部。兔在背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。二、皮内注射皮内注射时需将注射的局部脱去被毛，消毒后，用左手拇指和食指按住皮肤并使之绷紧，在两指之间，用结核菌素注射器连4(1/2)细针头，紧贴皮肤表层刺入皮内，然后再向上挑
12、起并再稍刺入，即可注射药液，此时可见皮肤外表鼓起一白色小皮丘。三、肌肉注射肌肉注射应选肌肉兴旺，无大血管通过的部位，一般多项选择臀部。注射时垂直迅速刺入肌肉，回抽如无回血，即可进行注射。给小白鼠、大白鼠等小动物作肌肉注射时，用左手抓住鼠两耳和头部皮肤，右手取连有51/2针头的注射器，将针头刺入大腿外侧肌肉，将药液注入。 四、腹腔注射用大、小白鼠做实验时，以左手抓住动物，使腹部向上，右手将注射针头于左或右下腹部刺入皮下，使针头向前推0.51.0cm，再以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液，为防止伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。假设实验动物为家兔，进针部位为下腹部的腹白线离开1
13、cm处。 五、静脉注射1、兔：兔耳部血管分布清晰。兔耳中央为动物，耳外缘为静脉。内缘静脉深不易固定，故不用。外缘静脉表浅易固定，常用。先拔去注射部位的被毛，用手指弹动或轻揉兔耳，使静脉充盈，左手食指和中指夹住静脉的近端，拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面，右手持注射器连6号针头尽量从静脉的远端刺入，移动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液注入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。 2、小白鼠和大白鼠 一般采用尾静脉注射，鼠尾静脉有三根，左右两侧及背侧各一根，左右两侧尾静脉比拟容易固定，多采用，背侧一根也可采用。操作时先将动物固定在鼠筒内或扣在烧杯中，使尾巴露出，尾部用4550的温水
14、浸润半分钟或用酒精擦拭使血管扩张，并可使表皮角质软化，以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧，使静脉充盈，用中指从下面托起尾巴，以无名指和小指夹住尾巴的末梢，右手持注射器连4(1/2)号细针头，使针头与静脉平行小于30，从尾下四分之一处约距尾尖2-3厘米处进针，此处皮薄易于刺入，先缓注少量药液，如无阻力，表示针头已进入静脉，可继续注入。注射完毕后把尾部向注射侧弯曲以止血。如需反复注射，应尽可能从末端开始，以后向尾根部方向移动注射 3、狗狗静脉注射多项选择前肢内侧皮下头静脉或后肢小隐静脉，狗静脉注射多项选择前肢内侧皮下头静脉或后肢小隐静脉注射。注射前由助手将动物侧卧，剪去注射部位的被毛，用胶皮带扎紧或用手
15、抓紧静脉近端，使血管充盈，从静脉的远端将注射针头平行刺入血管，待有回血后，松开绑带或两手，缓缓注入药液。实验动物体液和采血方法一、常用的采血方法有割剪尾采血、眼眶静脉丛采血、断头采血、心脏采血、颈静脉动脉采血、股动脉静脉采血、耳静脉采血、前肢头静脉采血、后肢小静脉采血等。小鼠摘眼球采血：左手抓住小鼠颈部皮肤，轻压在实验台上，取侧卧位，左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈后压，使眼球突出。用眼科弯镊迅速夹去眼球，将鼠倒立，用器皿接住流出的血液。采血完毕立即用纱布压迫止血。每次采血量0.6-0.1ml。兔心脏采血：兔仰卧位固定，剪去胸前区被毛，皮肤消毒后，用左手食指在左侧第3-4肋间触摸到心搏处，右手持带有4-5号针头的注射器，选择心搏最强处穿刺，当刺中心脏时，血液会自动进入注射器。每次采血量20-25ml。兔耳中动脉采血每次采血量15ml。二、尿液的采集1、用代谢笼采集尿液: 代谢笼用于收集实验动物自然排出的尿液，是一种特别设计的为采集实验动物各种排泄物的密封式饲养笼，有的代谢笼除可收集尿液外，又可收集粪便和动物呼出的CO2。一般简单的代谢笼主要用来收集尿液。防在
