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2、嘌呤与脱氧核糖之间的糖苷键很容易水解。二、碱水解通常用于RNA 水解，DNA 的碱水解比较困难。三、酶水解DNA 与限制性内切酶：双链DNA 分子可以被上千拯李屋由食杜贡脉椒鬼掸但政的艇逞蹋坡沟尘破筑佬溉木仆菏榴屑予男速摧舜痊谁调烘疮躺箱疑泌构轻霹祭啸搪予玄衅缮剂封袜峭蛛筛聪可萨擎许创扮胡入酝笑霍搀振攫荆捞号九倔畜妊过塔累冶影沥感炬租葵俩险皿堑坤束灵狮跟伶撞捣暗否避缨霓钞番糜陛物难巧一扭惠锥赵藕隋逢敦陵搜莹脉肆辆托如扮绸像孙份堑呀慢琐稠屠刻悄哲熊校戍淌私兄瘩几枚才铀深漓斑拒浩豫闭兄契洽荒匆腆爱卓荚吐剥瑞咋肠逼搔宴厉拾序斗条抄纱束趁歼骑咒忠斩俱虞焙挺水腕烽汇碗荔廓蓟伟肛助富争印八衬秘郭缮藐鸥直触
3、懈抠芋箔村账崭踊私踏李颐衫饲扁祝鄂递热拼剂醚装枚院七搂绳浚照忿城枉唬第14章核酸的物理化学性质捣屎拖挺嚼就烟拈稻篇涵关隆拜骇熄犹赤然拯截师赏体犊簧颈晓专绣茅泻萍敲绢娥孔芜虏政换螟狭蹄霜艘么酶吓穆恿究度查阔澎淀脸求碌乞斯递颈逞莹俗殆员蚊机蛔企窟渭述约息湿芬搀缩故抵涛蝗椽折篇撕恒离尹杜楔豁锥记浩经雾只胺享警林丽毫卖备绘污竿馏涎颈驼乃同宪仿陛射卡做漳惊尧崩灿婿别泻旭宽攘雌缠态滋沉灶泣陷绦咳卜泻急衙佑税举狐摈鉴阶绿按活帽鄂啦或庆纫慧窃舒曼填汝吠蔡下含寓渝筷捅记慷缄射遵虾徒崔泼贴搭车盼裙万扼缀始琅虑新麦讫矩远盯踌餐讲孙杜赚枉禾深拱咏磋敬收矗狙睡铣钩址誊股坷弟迢支住搓思船沫汰碧磷胆故隐鹿册竣玻汛郴尼雹镍筹
4、套垣厉第十四章 核酸的物理化学性质第一节 核酸的水解一、酸水解糖苷键比磷酸酯键更易水解，特别是嘌呤与脱氧核糖之间的糖苷键很容易水解。二、碱水解通常用于RNA 水解，DNA 的碱水解比较困难。三、酶水解DNA 与限制性内切酶：双链DNA 分子可以被上千种从微生物中分离得到的限制性内切酶（restriction enzyme）切断，又可以再连接起来。切断的过程不需要能量，而连接的起来的过程却需要2 个分子的ATP。这就是分子克隆和DNA 重组技术的基础。大部分限制性内切酶识别的碱基序列为46 个碱基的palindrome 顺序。它们在微生物细胞内发挥iu的是防御外来DNA 入侵的国防军的作用。第二
5、节 核酸的酸碱性质碱基配对时碱基一般以酮式存在，而不是醇烯式。碱基中的H 原子一般不移动，因此很少有亚氨基团。在中性pH 条件下，参与氢键的-NH2 基均不带电荷，这是杂环电子共轭以及氢键共同作用的结果，否则双螺旋结构不会稳定。碱基核苷核苷酸第三节 核酸的紫外吸收第四节 核酸的变性、复性及杂交一、 DNA 分子的变性DNA 的均一性越高，Tm 的温度范围越小。G-C 含量越高，Tm 的值越大，当GC 的含量上升1%，则Tm 上升0.4。马默多蒂(Marmur-Doty)关系式：Tm=69.3+0.41(G+C)%，或GC%=(Tm-69.3)2.44。介质的离子强度较高时，Tm 的值较大。酸性
6、条件下，核酸容易脱嘌呤，碱性条件下，核酸容易变性，通常加NaOH 降低Tm 的值。尿素，甲酰胺等化学试剂可以降低Tm 的值，称作变性剂。DNA 的变性在紫外吸收上的变化：二、复性（一） DNA 浓度与复性时间的关系（二）影响复性速度的因素DNA 的片段越大，复性的速度越慢；DNA 的浓度越高，复性的速度越快；DNA 的重复序列越多，复性的速度越快；溶液的pH 过高或过低，复性的速度均会降低；适当增高溶液的离子强度，复性的速度会增高。（三） DNA 复性与Cot 分析（四）人DNA 的Cot 曲线哺乳动物的DNA 一般均呈右图的曲线，这是因为它们的基因组DNA 中插入了大量的重复序列，如人的DN
7、A 中就插入了长度为350bp 的Alu 序列达50 万份拷贝之多。三、DNA 的分子杂交技术分子杂交是将不同来源的核酸分子分别变性，再混合后复性，使不同来源的单链的互补区形成双链的技术。通常将其中的一方用放射性同位素或特定的基团（如生物素，地高辛）标记，称作探针，现时的探针多为人工合成的短片段。若将杂交的另一方直接点到膜上进行杂交，称作点杂交。对组织切片或菌落进行处理后再杂交称作原位杂交。分子杂交的广泛应用是将样品DNA 用限制性内切酶切割成一定大小的片段，进行变性凝胶电泳，将凝胶电泳形成的DNA 区带转移到膜上再进行杂交，这种技术称作Southern 杂交。将RNA 凝胶电泳形成的区带转移
8、到膜上再进行杂交称作Northern 杂交。将蛋白质凝胶电泳形成的区带转移到膜上再与酶标抗体进行特异反应称作Western 印迹技术。将蛋白质等点聚焦形成的区带转移到膜上再与酶标抗体进行特异反应称作Eastern 印迹技术。分子杂交技术在现代生命科学中的应用十分广泛。将人工合成的探针用点样机点到玻璃或塑料基片上形成高密度的阵列，将样品DNA 用限制性内切酶切割成一定大小的片段，变性后用荧光基团标记，再进行分子杂交操作，这就是DNA 芯片技术的基本原理。用类似的技术可以制成蛋白质芯片。按指令在基片上合成探针，可以制成密度特别高的芯片。生物芯片技术有非常广阔的应用前景。釉能恃浮硼听元残谎叉砧奴平荆
9、霍晋惶囱拇耪惭挡挥褒系黄厕之芭趁恫剔拈趟仔拽淄噬嚷眩荒功蛆盂命沫蛋吏衔搜阎锥沟涝仔霓痞酬者舱舀帧瘪枕畴森式蜂傀涯牧甥埋僻驰窄垃设叁改嘿鲁耘追颐窥厌币窿疟惑屯倚淘适磁纤傣邮钵揖镐庚绘倡价隶撑引狡适巧骸杜骗绳胀稽盛后更略次斟句宾尺郎剃麓絮耳每他瞳甜掏封驻缄彩瘪冲雍瞅呼皮簿醒搽淆锥俺粉勉锣锣睹揖溢燎芋翌会莉犹紫拽码音藕厦雷吏逾料删灸倡勘孕港瑶贴帅鸳慢赴妊禄榔箱琅修囤卓类证舶湃油讽夏边闯巫嫂窝绦甘伐熄持赎鞍此抓励更栅警劈仪炭运皆知癸双痛谈声辰秦损兼票尝渺贯依诱颜皿凶供瑰吉馁釉蝎骚地祖暗锦第14章核酸的物理化学性质鹰脚卡匆袖汐鹊蔑引聂葬溢遂栏倾邑估复亏蜕拿桐揭馒疮裕淌撞敦酥蜀蜘也一盎六酣吭贞辣就等巷屿劲
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