《试剂盒实验问题总结》由会员分享，可在线阅读，更多相关《试剂盒实验问题总结（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、技术咨询问题灵敏度:试剂盒能检测到待测抗原的最低浓度。（最小检出量）检测下限试剂盒使用该样本的处理方法，能检测到样本中待测药物 的最低含量（检测下限=灵敏度*稀释倍数）交叉率指在同一测定方法中有两种以上的不同抗原对一种抗体 同样特异性结合回收率（添加管浓度-空白管浓度）/添加量*100%添加范围：检测下限以上 曲线最大浓度最佳添加浓度：第三标准 第四标准浓度之间:单位换算：咼标准 100ppb 添加10ul等于添加1ppb样本处理采取样本：去除脂肪的匀浆样本样本解冻：严禁直接放入水中解冻（由于多个样本和水的 原因，可能造成假阳性），可室温放置或密封后放入水中 解冻试剂的配制，加入有机溶液的量，
2、震荡时间严格按照说明 书操作:离心：最终分离效果好，需要相层清澈透明取相：靠壁轻吸所需相层，严禁吸到其它相层（其它相层 可造成假阳性）净化：加入正己烷净化，复溶液提取，充分混匀酶免步骤加样点板洗板酶标仪的使用（450nm ）试剂盒注意事项详见说明书参见网址： 常见问题处理出现问题出现问题的原因解决办法试剂盒未回温试剂盒回温到25 C温度控制不好控制正确温度孵育时间不准确控制孵育时间曲OD值不正常洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、 洗涤次数增加洗涤4-5次，每孔250ul ,然后拍干阳光直射，对着风直接吹避风避光酶标仪的波长错误酶标仪的波长450nm抗体的稀释错误正确的稀释抗体水质问题用娃哈哈矿泉
3、水代替洗涤液配制错误正确的配制洗涤液线白板少加液体（抗体、酶标记物、A液、B液）正确的步骤加液体错加液体无梯度标准品也污染换标准品点板OD值不正常控制温度时间在做一次人为点板/线性不好OD值不正常控制温度时间在做一次人为点板/回收率空白管阳性高样本本身就是阳性样本换阴性样本做回收率空白管在实验中被污染实验中防止交叉污染水质原因用娃哈哈矿泉水代替偏高添加量不准确精准的添加量添加浓度不适合添加合适的浓度取液吹干量多准确的取液吹干取到其它相层液体取需用相吹干复溶液未稀释或加入量少正确的稀释复溶液偏低添加量不准确精准的添加量添加浓度不适合添加合适的浓度取液吹干量少准确的取液吹干复溶液稀释错误或加入量多
4、正确的稀释复溶液出现问题出现问题的原因解决办法假阴、阳性水质原因点复溶液验证用娃哈哈矿泉水代替实验操作原因吸取到其它相吹干准确的取液吹干离心不彻底延长离心时间样本的污染更换样本孚L化未处理完全温浴（70 C）处理乳化现 象仪器试剂原因离心管未清洗干净正确的洗涤器具有机溶剂的影响做试剂空白看影响结果衍生化试剂原因（长时间衍生化试剂变质）更换衍生化试剂与曲线好坏相关保证曲线的正常金标检测（T）线颜色 较浅尿液pH偏碱性用0.01M HCI 调节尿液 pH值到7.0左右。尿样滴加过多重新测定，尿样按照说明 书，控制在2滴尿液过于混浊将尿液离心后，取上清液 重新测定金标质控（C）线不出 现检测卡由于咼
5、温、受潮等原因失效尿样需要重新检测。过了有效期失效。该批号的金标应丢弃处 理，尿液需要重新检测操作过程中检测卡没有平放，导致液体样品直接 冲过检测区尿样需要重新检测，且检 测卡平放于桌面上再加 样。尿液样品中含有较高的抑制或者干扰抗原抗体反 应的物质（比如明矶、小苏打、氧化剂、肌酐等）该尿液的检测结果无效金标卡上在除了 T和C 线之外的其他地方出线金标卡上的划痕；胶体金在跑板过程中没有完全 跑干净而遗留在卡上的痕迹；该检测卡结果不可信，尿 液需要重新检测。实验重复性不好操作人员的不一致，取样的不一致，样本数量的 多少，加样时间的长短，洗涤条件不一致，加样 量不一致尽量保持的实验一致性分析软件的
6、使用不能设置和保存正确的设置和保存如何判断曲线的好坏和分析结果正确的判断曲线的好坏 和分析结果5771001803090012095 5790368228596330825771001803090012386 5761373997357606965771001803090013594 5780775799025155125771001803090012387 5771649826018180515771001803090012138 5721311921589183265771001803090012359 5790368223610760535771001803090012356 57613
7、52861437917425771001803090012355 57508786970469327917088100343355274 10122994432583337917088100343355275 10186673293883200817088100343356107 10158115250150052217088100343356108 10100018005987173217088100343354295 10107419414268701717088100343356184 10187866086962880217088100343356185 10177583117408667417088100343356109 10108601437357284617088100343356110 10115220721601491617088100343355237 10102704160570270917088100343355238 10122936486142541417088100343356169 10186220440263571817088100343354928 101760654089788804
