《液相色谱质谱操作步骤》由会员分享，可在线阅读，更多相关《液相色谱质谱操作步骤（4页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、液相色谱质谱操作步骤开机1. 将废气管放入窗外；2将氮气罐拧开（氮气总压不能低于2MPa），氮气时候足够，注意氮气 分压表压力可能在左右；3. 打开电脑，进行自检；4. 打开液相自动进样器，自检后绿灯亮即可完成自检；5. 打开泵电源6. 接着打开质谱，自检 3 分钟，听见两次声响后自检成功；7. 打开masslynx软件后，抽真空4小时左右，直到真空值为e-5次方， 即可利用；调谐1. 抽好真空后，准备调谐；2. 成立个人“Project” ：在 Masslynx 界面点 File-Project wizard 点 yes， 输入名称，选择成立新的 Project；3. 进行质谱调谐。在TQ
2、Detector软件中单击API加氮气，然后调源温 度（参考80），去溶剂温度（参考300），点击软件右下角I图标加电压。等 到温度升到设定值后，在Fluidics中设定参数，调谐前，FLOW STATE先选 择waste对管路进行清洗（单击purge the Fluidics system）；清洗完毕后，FLOW STATE当选择infusion,在Analyser中设定参数：若是选择单MS则参数为 15，15，1, Entrance 50，Collision 2, Exit50，并在软件右边选择母离子扫描, 点击 start 进行调谐，改变 cone 的电压值，使选择的峰信号达到最高，即达
3、 到最优值；若果选择MS-MS扫描，要先打开氩气，参数为13,13, Entrance-2，Collision-2，Exit 2，点击 start 进行调谐，点 status infusion 出现信号，选择子离子扫描，固定corn的电压值，改变collision,使目标峰达到最高即达 到最优值。达到最优值后进行收集，改变 DATA 和 MASSES 参数打开一个 色谱图,点小闹钟,在出现的色谱图上点鼠标左键水平向右拖动鼠标,可取 得收集母离子或子离子信息。要进行下次收集时先关闭上次收集。保留好调 谐方式到个人的Project中；4. 调谐完毕后用溶剂清洗管路,在 Fluidics 中设定 F
4、LOW STATE 择 waste，点击purge the Fluidics syste m,设流速放空洗液。洗完后先关电压（右 下角圆环）,降温,温度下降到设定值后关闭氮气；方式编辑及测定1. 别离点击inlet method和mass method编液相和质谱的方式。编好后 别离将该文件存到Project中；（注意：液相时间应与质谱时间一致）2. 编辑样品序列：先成立个人“project”在最初的界面instrument中 输入样品名,瓶号,进样量,然后别离调出液相方式与质谱方式；3. 在操作平台中打开 mass console，在 Acquity uplc sysytem 当选择 con
5、trol 下拉菜单中start up system选择A （纯有机相），B（纯水相）流动相进行系统清 洗（一般清洗4个循环，流速8ml/min大约10分钟）；4. 做样前,一般设定 min 流速平衡色谱柱及系统,先用建好的液相方 式平衡柱子，在点Inlet method，界面当选LC-Load Method，观察Delta值 小于50方可开始测试样品（若利用缓冲盐则应小于10）。选中序列中要进的 样，点击start出现start list，（选fromto）肯定后开始走样。可点击谱图进行观测，点时钟进行不时观测；5测样完成以后，先去电压（TQ Detector中右下角圆圈），等源温度和脱溶气温
6、度都降到100度以下时单击API去氮气。（注意：必然要先去电 压，在去氮气）然后在mass console中将流量改成0；6冲洗色谱柱：按照测试进程流动相选择用不同比例的有机相/水相冲洗柱子，最后用纯有机流动相冲洗柱子至柱压降至最低；7设流速为零；注意事项1. 天天进行测样前先点 mass console进行Starts up system 清洗；2测定完毕后将无机相溶剂滤头放入纯有机相瓶中；3. 改换柱子时注意：连接柱子之前要等管路有水出来后再进行；4. 调谐时注意：必然要先开气，再加压；5. 电脑不能关闭超过10分钟，不然仪器自动卸真空；6. 卸真空前不能关闭质谱电源及自动进样器电源；7. 用紫外检测器时要先开溶剂泵，20 分钟左右以后打开紫外检测器电 源；8. 测定前确保流动相足够；9. 实验前后都要填写仪器利用记录表，实验完成后填写仪器利用记录；10. 正确操作仪器，利用进程中如发现仪器出现异样情况，应及时与实 验室管理人员联系；11. 要求用托盘盛放药品，避免药品直接放在实验台上，实验结束及时 清洁实验台，带走所有实验试剂及样品；12. 仪器利用人员有义务打扫实验室卫生；13. 仪器利用人员有义务和责任负责实验室内实验仪器的安全；14. 仪器利用人员有义务和责任负责实验室内水、电安全；
