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1、Transwell 侵袭实验全面总结第一节 概念这里想明确两个概念，一个是Transwell,另一个是肿瘤细胞侵袭模型。1Transwell trans-这个词根有转移、转运、穿过等意思，well有小室的意思，可以从字面上理解，这 是一类有通透性的杯状的装置，根据Corning公司的Transwell说明书中的介绍，可以认为 这是一种膜滤器(Membrane filters)，也可认为是一种有通透性的支架(permeable sup ports)。更准确地说，Transwell应该是一种实验技术，这项技术的主要材料是Transwel l小室(Transwell chamber， Transwe
2、ll insert),其外形为可放置在孔板里的小杯 子，不同厂家对Transwell会有不同的命名，而不同型号也可有不同形状，不同大小，根据 实验需要,可有不同选择。但无论是何种外形，其关键部分都是一致的，那就是杯子底层的一张有通透性的膜，而杯子 其余部分的材料与普通的孔板是一样。这层膜带有微孔，孔径大小有0.112.0卩m，根据不同需要可用不同材料，一般常用的是聚碳酸酯膜(polycarbonate membrane)。下图是一2聚库旺船IIS 1 p24h)，细胞还是会掉到下室里面 去，所以有条件的话，最好还是在膜下层涂上FN。另外，值得一提的是，膜下层涂上FN还 有一定的趋化作用。zha
3、ngyong1036战友提供的价格：sigma的fibronec tin,价格在150 0 左右。2步骤21 Transwell 小室制备211 无基质胶 Transwell 小室制备 包被基底膜：用50mg/LMa trigel 1: 8稀释液包被Transwell小室底部膜的上室面，4C风干。如果需要 在下室面铺FN的话，可将200ul枪头的尖端剪掉，吸取FN均匀涂抹在小室的下面。用胶原 （collagen）的话，一般配成0.5mg/ml，直接用枪吸了涂在膜上。 水化基底膜：吸出培养板中残余液体，每孔加入50ul含10g/LBSA的无血清培养液，37C, 30min。另有 tianjin_glioma 战友提供的方法：在上室的聚碳酸酯膜上加入稀释后的 Matrigel （3. 9ug/ul） 60-80卩l （注意体积不可太大，以刚把聚碳酸酯膜浸湿为最好），置37C 30mi n 使 Matrigel 聚合成凝胶。212 有基质胶的 Transwell 小室制备Chemicon公司的ECM550系列说明书要求，将小室放入培养板中，在上室
