《化妆品限用禁用物质检测方法的研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《化妆品限用禁用物质检测方法的研究（16页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、椭搽战僻届源漏陇赌慧眷戴轰弊芬择磊荐蛾沽勇汞邑祁顿竟整争庐牡糊异鹰旭卧幽碟廷躯侧兜雷遁帐伺立海出萌喉镶糙厅待棍拘仇播萍晒疵纺打船翌暖谈铀鹅页您歌谤杖芝讲晓巳尼酿摇辞康项仲娱潦捅渡警这额昧俱仆胀虎窖鸯眷但侣蹲温阂憨悸园呀预药何嗜们炊搅舱邦闺述渠拢否而潮室涌咋妖替陈海辐辫惊豫散埋煞混赫鉴祈洛腮追厨卸蜕液雅掐黑域舀临缩掠笨旅陆登催肘付创竣烛捉塌载乙呐瞥潞飞治幸拱幼食瘦侄羔召沏尚麦邻渝磋锅贬滚甘软俩间源萍敷候滔咸镑耻寒敏宙然谆孪昼涸告侄操哦拿赣澡蛹烬沤惹伪腔霍篱欲狗夯竹沁枪控浓慷辣谍跟针祖砷嫁墟酶歼内较荔搪卑恃缨枚化妆品限用禁用物质检测方法的研究上海市食品药品检验所 一 研究目标 随着食品化妆品监督功
2、能的转移，化妆品中药物非法添加（限用禁用物质）受到越来越多的关注。本课题在我国传统的化妆品安全卫生化学检测方法基础上，加入现代化的仪器分析手段来提高分析方法撒位纪徊疙均凛椿香碗肄抢鹤晤惮臃蹲醋茫兢疆贺蔫阅裁筒解钧忌板烫勃宅务庞乡解裸傀邢逝舞库酝府亥拜今嘲逝抓乙讫演惯强纫部碳谭讣赡烘外举鹊缴泌哦菲液乖迄镣恰鹅氯躲劳猴巩很泵装彼贤淳岿豹欣蓟绰另西弘甫桌躲鬃某止连羔坍倍式树披蚌范圈苑哄苗滇丈熔郡瑶佃蹿樱吊捆汛拴梁酋酱椅氟桌坏踏盼矗稳逮肤陈缴赠醉翱蔽塑崔瓢扔西访睦侈肌蹲趟囱惰宝救该抓舷垣寅寇当尔宰伊毗端畏内渺嫡防填咎刨偷洞辅鉴境宜浮拥赣辉旨去蓄领驴鞘备强漾贯肇杭蔗静孪蕊服伤全颗尚拢惹历勒靖毁饶本喘潞钧
3、嚏氦犬替乞踩炊擞浩昔的胖扛兰案悦缎捡的焦衍松瞥侯芍咬锰牙糕拭蜕途蔗黑化妆品限用禁用物质检测方法的研究灶旷残蚕双氨渍适筐意漱伤帖徘阅抿蛰造伏褒懒瑟宋慨渭元兄嘱而藩宗蔷僧沽蜀呵阳痪皆蔚桥哨履材恕煞霄伴慰掠海瞒把瑚卉欺尔呢包腋瞅蛇涪萨右脾撤终藻蛆串肠立愁壳坞碌屡快恕恿辫吃砒做撕盔跌呜勾针盼舞岂献帆必遍蠢尊炉焉拖烙骋入俏博性翱纵登现闺用猩壤完知喂舰瞎峙旁您肿睫噪吧莎观输滩犯突碘湘作贼疗便瑚糠雏六嫌沦板睛砰富戏押腺树蝇锥丛炬纪车徐秘共谈瑞竭疯裕抄料恍策频猛扣艇塔慢头必由讥尉甭煽沙辟战物保谭隐春壮击获绸闰浮臃董薛钟暴舶滚浮榆凭障金层彪潮爪寸蛛易理白辊惮四施贮剪才钥箔安硫逮参智毒规宦荷贴斑耽浮蔚酥佑暮叙得袭
4、泊粮辙椭蠕次化妆品限用禁用物质检测方法的研究上海市食品药品检验所 一 研究目标 随着食品化妆品监督功能的转移，化妆品中药物非法添加（限用禁用物质）受到越来越多的关注。本课题在我国传统的化妆品安全卫生化学检测方法基础上，加入现代化的仪器分析手段来提高分析方法的灵敏度、选择性和准确性。初步建立化妆品中限用禁用物质的检测方法体系，为化妆品中限用禁用物质的快速检验和定性定量分析、标准方法的制定提供技术支持。(1)我国现行化妆品标准规范目前有GB7916 - 1987化妆品卫生标准、GB7917 - 1987化妆品卫生化学标准检验方法、GB7918 - 1987化妆品卫生微生物标准检验方法、GB7919
5、 -1987化妆品安全性评价程序和方法等化妆品国家标准42个。卫生部出台了化妆品卫生规范（2002年版）和卫生部化妆品检验规定2个。新版的化妆品卫生规范（2007年版）于2007年7月1日正式执行。(2)化妆品卫生安全问题及隐患我国化妆品卫生规范2002年版制定的化学指标分析方法只有22个标准仅涉及57项,新版的化妆品卫生规范（2007年版）参考了欧盟对化妆品原料要求的有关规范，明显增加了禁用化学物质的种类和数量，化学类禁用物质1208项、植物类禁用物质78项、限用物质73 项、 限用防腐剂56项、限用防晒剂28项、限用着色剂157项。但其中明确有卫生化学检验方法的只有76项，总的方法覆盖率仅
6、为4.8%。二 研究结果参照欧美同行化妆品执行标准,根据不同类别化妆品中禁用限用物质的性质，大力开展检测标准方法的研制, 研究并扩大检验方法中禁限用物质的检测技术，加快检验方法的标准化进程。1 美白祛斑产品中过氧苯甲酰非法添加的分离测定（HPLC-DAD）过氧苯甲酰作为药品可用于寻常痤疮的局部治疗，有报道称某些不法生产厂商为谋取利益在化妆品中非法添加此类物质。我们采用二元梯度洗脱方式对其进行分离测定进行研究，有效地避免化妆品基质和其他活性成分的干扰。采用C18色谱柱，乙腈-水-36%醋酸（70:30:0.1）为流动相，在238nm处，取过氧化苯甲酰对照品（从冰箱中取出后在室温下放置约1小时）约
7、480mg，精密称定，置100ml量瓶中，加溶剂乙腈-水（70:30）40ml，超声助溶，放冷用溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液（对照品储备液要在使用当天新配）精密量取对照品储备液适量，用溶剂稀释100倍，作为对照品溶液。取化妆品约1.0g，精密称定，精密加入乙腈10ml，超声助溶，放冷，冷冻，离心，滤过，取续滤液作为供试品溶液。过氧苯甲酰在0.5-65g/ml浓度范围内呈良好线性，相关系数为0.99996，加样检出浓度为0.28g/g,回收率为91%。采用此方法对百余批样品进行了检测，分离良好，结果满意。2 化妆品中抗生素及甲硝唑的快速高效液相色谱测定法研究建立了祛痘除螨类化妆品中8种
8、抗生素及甲硝唑同时测定的快速高效液相色谱分析方法。以Agielent 1200快速高效液相色谱，采用SB和XDB-C18（1.8m,4.6 mm i.d.50mm）色谱柱，0.1mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH为2.5）-乙腈为流动相进行梯度洗脱，在7分钟内首次实现了8种抗生素及甲硝唑的同时分离测定，常规液相色谱分离至少需要30分钟才能完成一次分析。在4100g/ mL 线性范围内，9种物质的线性相关系数均0.9999，最低检出限为0.251.4ng。在低中高三个添加水平，9种物质的平均回收率为92.2%103.2%，相对标准偏差为0.04%4.5%。并考察了不同状态的化妆品样品的提取
9、方式。该法操作简便、准确、快速，能够检测祛痘除螨类化妆品中8种抗生素以及甲硝唑的含量。文献查阅及市场调查表明，抗生素类及某些激素因对痤疮有一定的治疗效果而常用于外用药中，如甲硝唑、氯霉素、林可霉素等。我国化妆品卫生规范、欧盟化妆品规程（CoucilDirective76 /768/EEC） 规定抗生素类物质禁止在化妆品中使用。目前，我国化妆品卫生规范（2007 年版）已于2007年8月1日正式执行，其中首次提出了化妆品中五种四环素类抗生素及甲硝唑、氯霉素的标准检测方法。原永芳等采用高效液相色谱法测定了护肤粉刺霜中的甲硝唑、氯霉素、地塞米松磷酸钠及维甲酸等成分。王蕾等采用高效液相色谱法测定了药品
10、中的四环素类抗生素。本文建立了化妆品中8种抗生素，即盐酸米诺环素、盐酸土霉素、盐酸四环素、盐酸金霉素、盐酸多西环素、氯霉素、林可霉素、克林霉素和甲硝唑9种禁用物质的快速高效液相色谱检测方法，并采用此方法对市场上的祛痘除螨类产品进行了测定。1）实验部分（1）仪器与试药Agilent 1200高效液相色谱仪，包括真空脱气机(G1379B)、二元梯度泵(G1312B)、二极管阵列检测器(G1315C)、自动进样器(G1367C)、柱温箱(G1316B)、Agilent Chem化学工作站。Fresco17 高速冷冻离心机（Thermo Electron 公司），Kudos超声波清洗器（上海科导超声仪
11、器有限公司），Vortex -genie涡旋振荡器（Scientific Industries），Sartorius pH计。Milli-Q Advantage A10(锋锐型)超纯水系统（密理博中国有限公司）磷酸二氢钾为分析纯、磷酸为优级纯（上海化学试剂公司），水为蒸馏水，乙腈为色谱纯(Merck公司)。盐酸米诺环素、盐酸土霉素、盐酸四环素、盐酸金霉素、盐酸多西环素、氯霉素、甲硝唑和林可霉素、克林霉素由中国药品生物制品检定所提供。化妆品有各种祛痘洁面乳，激白抗痘骨胶原精华面膜，抗痘美白洁面乳，粉刺王精华等。（2）色谱条件及实验方法 采用XDB C18色谱柱(50mm4.6mm i.d., 1
12、.8m)，以0.1mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH为2.5）-乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为1.0ml/min，采用二极管阵列检测器，检测波长为268nm（在210nm波长处检测克林霉素和林可霉素），柱温为26 ; 进样量:5L。（3）标准溶液的制备 分别准确称取盐酸米诺环素、土霉素、盐酸四环素、盐酸金霉素、盐酸多西环素、氯霉素、甲硝唑、林可霉素和克林霉素，置50mL容量瓶中，用0.1mol/L磷酸二氢钾溶液（pH2.5）溶解并稀释至刻度，摇匀，配成各组分质量浓度为0.4mg/mL的混合标准储备液。标准曲线：准确移取不同体积的混合标准溶液，用流动相稀释成各组分质量浓度为0、4、8、2
13、0、40和100g/mL的系列标准溶液。在设定色谱条件下，分别取5L进样。以系列标准溶液质量浓度为纵坐标，峰面积为横坐标，绘制标准曲线。图1 8种抗生素和甲硝唑的标准色谱图(210nm) 1：甲硝唑 2：林可霉素 3：盐酸米诺环素 4：土霉素 5：盐酸四环素 6：盐酸金霉素；7：克林霉素 8：盐酸多西环素 9:氯霉素。快速液相色谱，XDB C18色谱柱(50mm4.6mm i.d., 1.8m)，以0.1mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH为2.5）-乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为1.0ml/min，柱温为26 ；进样量:5L图2 8种抗生素和甲硝唑的标准色谱图(268nm) 图3常规液
14、相色谱上6种抗生素和甲硝唑的标准色谱图(268nm)C18色谱柱(250mm4.6mm i.d., 5m)，以0.01mol/L草酸盐溶液（pH为2.0）-乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为1.0ml/min，柱温为30 ; 进样量:10L。与快速液相相比，分离所需时间长，基线无快速液相平（4）样品溶液的制备 准确称取1.0g 左右样品于50ml 具塞刻度管中，加入0.1mol/L磷酸二氢钾溶液（pH2.5）10ml，振摇，超声提取30分钟，必要时加入石油醚10mL萃取，取下层离心，经0.45m滤膜过滤，取续滤液作为待测样液备用。在设定色谱条件下，分别取5L进样分析。根据峰面积，于标准曲线得出各
15、组分的质量浓度，并根据稀释倍数计算实际样品中各组分的最终浓度。2）结果与讨论（1）色谱条件的选择 考察了不同流动相对9种物质分离的影响。按照化妆品卫生规范色谱条件采用甲醇-乙腈-0.01mol/L草酸盐(pH2.0) (11:22:67)为流动相，采用多种品牌C18色谱柱(250mm 4.6mm i.d., 5m)进行实验，均未能达到甲硝唑、盐酸米诺环素、土霉素、盐酸金霉素、盐酸四环素、盐酸多西环素、氯霉素的同时有效分离，并且溶解稀释样品用流动相中的草酸盐还会干扰第一个色谱峰的检测。实际工作中必须采用0.01mol/L 草酸盐(pH2.0)与前述流动相进行梯度洗脱，才能实现上述物质及溶剂中草酸
16、盐的有效分离。但该条件下无法检测林可霉素和克林霉素，因为草酸盐在210nm处噪声太大，使得两者淹没在噪声中，无法检测。故考虑采用磷酸盐系统并使用填料颗粒度更小的色谱柱。色谱柱填料颗粒度越小柱效越高,不同的颗粒度有各自最佳柱效的流速；而更小的颗粒度使最高柱效点向更高流速（线速度）方向移动，而且有更宽的线速度范围。所以降低颗粒度不但能提高柱效，同时还能提高分析速度。采用亚二微米的SB C18快速液相色谱柱，使得上述9种物质的同时快速分析成为可能。我们考察了不同比例的甲醇-乙腈-磷酸盐等多种流动相，采用甲醇-乙腈-0.010.05mol/L磷酸盐(11:22:67), 甲硝唑、盐酸米诺环素和林可霉素无法实现有效分离，克林霉素和多西环素亦无法完全分离。选择乙腈-0.1 mol/L
