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1、解脲/人型支原体分离培养与药敏实验分析目的：了解本地区解脲支原体耐药状况，指导临床合理用药。方法：应用支原体微量培 养及同步药敏试剂盒，检测解脲支原体及其药敏分析。美满霉素、交沙霉素、克拉霉素三种 抗生素敏感性高，不易产生耐药性，且耐药率变化不大；结论：临床治疗UU引起的非淋菌 性尿道炎，本地区应推荐美满霉素、强力霉素、交沙霉素作为治疗解脲支原体的首选药物。 不论是UU单项感染或是UU + MH混合感染均产生多重耐药，支原体的耐药问题严重，治 疗要根据药物敏感性报告用药。提示：在进行治疗前做支原体药敏试验很有必要。支原体(mycoplasma )是细胞外生存的最小微生物。是一类缺乏细胞壁的原核
2、细胞型微生 物，大小一般在0.30.5um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形 态，能在无生命培养基中生长繁殖的最小原核细胞型微生物。它不同于细胞，也不同于病毒。 种类繁多、分布广泛、造成的危害相当大，涉及人、动物、植物及昆虫等多个领域，给人类 健康和科研工作带来不利影响。从人体分离的16种支原体中，5种对人有致病性，即肺炎 支原体、解脲支原体、人型支原体、生殖支原体及发酵支原体。脲解支原体属(ureaplasma ) 含脲解支原体等体、脲解支原体及人型支原体等对人有致病性。肺炎支原体是呼吸道感染、 肺炎的主要原因。能引起人类泌尿生殖道感染的有解脲支原体(UU)人型支原体(M
3、H) 生殖道支原体等，其中最常见的是UU，约有30%40%男性的非衣原体、非淋病性尿道 炎是由UU所致；此外UU可通过胎盘感梁胎儿，引起早产、死胎、低体重胎儿和新生儿呼 吸道感染。由于不合理使用抗生素，支原体对常用抗生素耐药已非常普遍，对其进行培养及 耐药性监测显得尤为重要。解脲支原体(M.urealyticum )为支原体属中唯一的一个种，因生长需要尿素而得名。菌落微小，直径仅有1525um,须在低倍显微镜下观察，故旧称T 株（tiny strain ）解脲支原体与女性生殖健康关系最为密切，解脲支原体可引起泌尿生殖 道感染，并被认为是非淋球菌性尿道炎中仅次于衣原体（占50% ）的重要病原体。
4、由于80% 孕妇的生殖道内带有解脲支原体，因此可通过胎盘感染胎儿而导致早产、死胎，或在分娩时 感染新生儿，引起呼吸道感染。我国近年来发病的例数不断增加。随着广谱抗生素的大量使用，耐药菌株在不断增加。本文 对2009年7月2009年12月我院门诊患者标本作解脲支原体（UU ）人型支原体（MH ） 培养和药物敏感性试验。现将结论报告如下：一、材料与方法（一）标本来源2009年7月 2009年12月我院妇科、皮肤科患者标本共9例，男性2例，女性 7 例，患者均为呈贡泌尿道感染者，年龄不限。男性患者均有尿道内不适和浆液 性分泌物，女性患者大多数有白带增多，白带涂片检查均有脓白细胞增多。（二）标本采集男
5、性患者用无菌棉球擦干尿道口，用无菌棉拭子插入尿道2 cm 3 cm , 轻轻旋转后取出；女性患者清除阴道口分泌物后，用无菌棉拭子插入宫颈1 cm2 cm,轻 轻旋转后取出。标本取出后立即接种培养。（三）试剂与方法采用郑州安图绿科生物工程有限公司生产的UU和MH分离鉴定、药敏 试剂盒。严格按说明书操作及判读结。（四）试剂 试剂盒采用郑州安图绿科生物工程有限公司支原体分离、鉴定、药敏检测试剂 盒。测定药物包括：强力霉素、交沙霉素、司帕沙星、罗红霉素、美满霉素、克拉霉素、阿 奇霉素、林可霉素、大观霉素、甲砜霉素、共10种抗生素。（五）病原体检测方法采用郑州安图绿科生物工程有限公司的试剂检测UU、Mh
6、。严格按 照检测试剂使用说明书无菌操作，标本采集后立即送检，室温保存不得超过2h , 2 8不超过5h。首先将50pl完全溶解培养基加入C-空白孔中，再将无菌拭子采集的样本插入完 全溶解培养基中，挤压旋转拭子数次，使拭子中样本渗入培养基中，充分混匀接种了样本的 液体培养基，用加样器分别准确量取50ul接种到试剂条各孔中（除C-）,再滴加一滴无菌 石蜡油（约50ul）,然后盖上盖子。36 C恒温箱UU培养24 h,Mh培养24 h，培养基不 变色为阴性，培养基由橙黄色变成红色，且清亮透明为阳性，表示有支原体生长。（六）实验材料 采用郑州安图绿科生物工程有限公司生产的Mycoplasma cult
7、ure , identification , susceptibility kit试剂盒进行测试。该试剂盒集鉴 定、药敏为一体，在同一试剂盒分别设置生长对照孔，解脲支原体（UU ）人型支原体（MH ） 鉴定孔及10种抗生素测试孔。操作严格按说明书进行。二、结果（一）支原体阳性检出率从9例患者标本中检出支原体共7株阳性率为78 %。其中UU 单项感染5例，占阳性总数的71%, UU + MH混合感染1,占阳性总数的14 %,H单项 感染4例，仅占阳性总数的57%。（二）支原体药物敏感试验结果分别对UU阳性、UU + M H阳性、MH阳性的标本作药物 敏感性试验并进行比较分析发现不论是UU单项感染
8、或是UU + MH混合感染者强力霉素、 美满霉素的耐药率最低，其次是克拉霉素，耐药率最高为大观霉素。MH单项感染病例相对 较少,耐药情况有待进一步探讨。本次调查男性支原体感染率为 0,女性支原体感染率为 100%经统计学检验P在7例女性生殖道分泌物标本中解脲人型支原体都有生长的有1例， 只有解脲支原体生长的有5例,人型支原体的有1例。7例女性支原体生长的药敏结果如下 表：3 讨论由于试剂检测原理是依据培养与生化，利用PH值的升高致基础液变色而判断结果，极少量 碱性标本可能会直接导致溶液变红,出现假阳性,解脲支原体如同其他支原体一样,在人工 培养基上可以生长，但营养要求较高，需要供给胆固醇和酵母
9、。酸碱度要求低，最适值6.00.5具有尿素酶，在PH6.0含有尿素的培养基中，能分解尿素，产生NH3,因PH上 升使含酚红指示剂的培养液由黄变红。如培养液过碱PH8.0以上时，其中UU会迅速死亡。 解脲支原体生物学特性对 PH 要求较低（6.0），具有分解尿素产生氨，使酚红指示剂变色， 不分解葡萄糖、精氨酸，而人型支原体可分解精氨酸，但不分解尿素和葡萄糖，人型支原体 除引起人类非淋菌性尿道炎外，还可引起慢性前列腺炎、宫颈炎和盆腔炎。临床能引起性病 的支原体主要包括解脲支原体和人型支原体，其发病率一直呈上升趋势，耐药性也随着抗生 素的滥用日趋厉害，危害着人类的健康。治疗及防治支原体传播的关键是及时准确的诊断。 （作者单位：云南省楚雄医药高等专科学校）感谢您的阅读！
