大鼠失血性休克复苏期损伤及ω-3多不饱和脂肪酸的保护作用要点

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1、中华实验外科朵志 2016 年 9 月第 33 卷第9 期 Chin J Exp Surg,September 2016, Vol.33,No.9 2133 中华实验外科朵志 2016 年 9 月第 33 卷第9 期 Chin J Exp Surg,September 2016, Vol.33,No.9 2133 实验研究中华实验外科朵志 2016 年 9 月第 33 卷第9 期 Chin J Exp Surg,September 2016, Vol.33,No.9 2133 中华实验外科朵志 2016 年 9 月第 33 卷第9 期 Chin J Exp Surg,September 201

2、6, Vol.33,No.9 2133 大鼠失血性休克复苏期损伤及a)-3 多不饱和脂肪酸的保护作用童波朱承良作者单位:312003浙江省绍兴市人民医院急诊外科通信作者:童波,Email :389568364 qq. comDOI :10. 3760/cma. j. issn. 1001 -9030. 2016.09. 021【搞要】目的观察33多不饱和脂肪酸(PUFA)通过抗炎抗氧化作用对出血性休克复苏期 损伤的保护作用。方法 取雄性SD大鼠80只,均分为对照组,模型组以及3-3PUFA低 (10 mg/kg)、中(30甸kg)、高剂呈组(100 mg/kg),除对照组外其他各组大腻建立岀血

3、性休克模型,待 进入复苏期后记录各组大鼠的心率、平均动脉血圧和血氧饱和度,并检测致炎细胞因子肿瘤坏死因子 a(TNE-a)、门细胞介素(让)邛和内漫索水平,以及氧化应激相关的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)和體过氧化物酶体(MPO)等氧化应澈指标的变化。结果 在复苏期30 min(0-3PUFA高剂最组 大鼠的平均动脉压、心率和动脉血毓分压分别为105.1 mmHgd mmHg = 0.133 kPa)、319.2次/分和 69. 4 mmHg,显著高于模型组的69.6 mmHg、310. 5次/分和38. 1 mmHg;3-3PUFA可以升高大鼠在失 血性休克后复苏期的平均动脉压

4、和动脉血氧分压指标;同时,3-3PlJFA还可以显箸降低失血性休克 复苏期TNF-aJL-13.MDA.MPO和内秦索的含量,增加SOD的含量。结论 3?PUFA对大鼠失血 性休克复苏期具有良好的保护作用,其机制与其抗炎及抗氧化应激有关。【关键词】妙3多不饱和脂肪酸;出血性休克;复苏;炎性因子;氧化应激The protective effect and mechanism of 3 - 3 polyunsaturated fatty acid on rat model of hemorrhagic shock in resuscitation period Tong Bo. Zhu ChngU

5、angDepartment of Emergency Surgery t Shaoxing People * s Hospital, Shaoxing 312000, China Corresponding author: Tong Bo, Email;389568364(fq. comAbstract Objective This study tests the hypothesis that treatment with - 3 polyunsaturated fatty acid (o - 3PUFA ) will attenuat e iiiflatniuatory irMpoiibe

6、 and slsibilize lienivdyTiajnic Methods Male SD rats were randomly divided into 5 groups: controlt model with hemorrhagic shock/resuscitation (HS/R) and co - 3PUFA low, medium and high dose group, each agent was administered before resuscita- lion. The model was performed and fish oil ( 10, 30, 100

7、mg/kg) was infused through caudal vena at 30 minutes after shock Half of each group was killed at 30 minutes and at 2 hours after resuscitation Then several kinds of inflammation and oxidative stress indicators such as interleukin (IL) - lpf myeloperoxi dase ( MPO), tumor necrosis factor - a ( TNF -

8、 a) , endotoxin and superoxide dismutase (SOD) were (eated. Results The mean anerial pressure ( MAP) and arterial partial pressure of oxygen ( PaO7) of high dose 3 -3PUFA group was 105. 1 mmH月(1 mmHg = 0. 133 kPa) and 69. 4 mmHg, significantly higher than model group (69. 6 mmHg, 3& 1 mmHg, P 0. 05,

9、 respectively) ; 3 - 3PUFA could increase the MAP and PaO2 in hemorrhagic shock in resuscitation period In additiont 3 - 3PUFA could significantly reduce the levels of TNF - a, IL - 1(5, malondialdehyde ( MDA ), MPO and endotoxin in serum and increase SOD level Conclusion 3 - 3PUFA pretreatmenl befo

10、re fluid resuscitation showed a beneficial effect to the hemodynamic stabilization through anti - inflammation and anti - oxidase in HS/R rat model Key wordsa)-3 polyunsaturated fatly acid; Hemorrhagic shock; Resuscitation: Cytokine;Oxidative stress中华实验外科朵志 2016 年 9 月第 33 卷第9 期 Chin J Exp Surg,Septe

11、mber 2016, Vol.33,No.9 2133 中华实验外科朵志 2016 年 9 月第 33 卷第9 期 Chin J Exp Surg,September 2016, Vol.33,No.9 2133 出血性休克是临床上常见的一种危急综合征,表 现为快速、大量的血容量不足,引起血压下降、组织灌 注减少,体液和蛋白丢失等一系列休克综合病症,最终 引发多器官功能障碍综合征(MODS)。尽管现今的急 救治疗可以有效恢复患者的血容最,维持血压在正常 水平,但是出血性休克的病死率仍然较高(。心3多 不饱和脂肪酸(PUFA)为人体必需脂肪酸,作为一种 营养物质具有降低炎性类花生四烯酸、活性氧产

12、生,减 少炎性因子、黏附因子表达的作用。本研究旨在探 讨失血性休克大鼠在静脉给予3-3PUFA以后,在复苏 期内的保护作用及其机制C.材料与方法1. 材料:SD大鼠80只,雄性,体巫200 220 g,由 浙江大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(浙) 2012-001 0大鼠饲养环境温度保持在2025兀,湿度 保持在55% -65%, f由饮水,按时添加饲料,光照时 间为7:00 19:00c(0-3鱼油脂肪乳注射液(商品名: 10%尤文/Omegaven ),上海华瑞制药右限公司;戊巴 比妥钠,Sigma-Aldrich科技有限公司,批号:8110254; 肝素钠注射液,匕海第一生化医

13、药股份有限公司,批 号:2013I009;M方乳酸钠林格氏液,民生药业集团有 限公司生产,批号:20140928;所有生化检测试剂盒均 购自南京建成生物工程研究所;所有酶联免疫吸附试 验(ELISA )试剂盒均购自美国eBioscience公司; M 1)3000生物信号采集系统购自安徽淮北止华实验仪 器有限公司J-STAT血气分析仪购自美国雅培公司。2. 实验方法:将80只大鼠平均分为对照组(生理 盐水),模型组(生理盐水)以及(0-3PCFA低剂呆组 (10 mg/kg )、中剂虽(30 mg/kg )和高剂量组 (100mg/kg),每组16只。除正常对照组,腹腔注射戊 巴比妥钠(60

14、mg/kg)麻醉大鼠,仰位固定厉分离左侧 股静脉及股动脉,使用PE-20管分别进行静、动脉插 管,并将M 1)3000生物信号采集系统连接至股动脉,监 测大区的血压以及心率,根据收缩斥和舒张压计算平 均动脉压(MAP),手术开始后每隔15 min对以上指标 进行一次采集。将200 lU/kg肝索经股静脉插管注入 大鼠体内,3 min后,经股静脉导件缓慢放血15 min (5 ml),并将各相应时段的血液盛于EP管中保存备 用,然后使大鼠MAP保持在35 40 mmHg( 1 mmHg = 0. 133 kPa)持续1 ho各组大鼠在放血开始45 min时, 各组大鼠静脉注射相应的药物,对照组和

15、模型组大鼠 给予等容虽生理盐水,1 h后对大鼠进行出血创伤复 苏术,将收集到的血液以0. 5 ml/min的速度经股静脉 插管分别重新输冋各个大鼠体内,同时给予林格氏液 0. 5 ml/mino监测大鼠MAP,当其恢复到90%时即可 停止输液。实行复苏术30 min时在各组随机选取8 只大鼠处死,收集血液样本,ELISA检测丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化卿(SOD)和髓过氧化物购体 (MPO)、以及白细胞介索(山)-出、肿瘤坏死因子a (TNF-a)、内毒素等相关指标,在复苏期2 h结束时再 取血并处死毎组剩余的8只大鼠,检测与之前相同的 指标。分别于术蓟、给药前、进入复苏期、复苏30 mi

16、n 以及2 h取血监测动脉血铁分压(PO2)。正常对照组 大限全程麻醉及血压、心率的监测,不进行放血及回输 等操作,但是和其他组大鼠同时取血检测指标。3.统计学方法:应用SPSS 19. 0统计软件分析,结 果以均数士标准差(x.s)表示,组间比较采用单因素 方差分析(One-way ANOVA)后Dunnel I检验,或双因 素重复分析(Two way repeated ANOVA),以 P 0. 05 为差异右统计学意义。结 果1.3-3PUFA对失血性休克大K.心率、平均动脉压 以及动脉血氧分压的影响:失血性休克模型大鼠的 MAP均在股静脉放血15 min后产生急剧卜降,在随后 的I h内基本保持在一致水平,即35 40 mmllg.iF常 组大鼠MAP保持不变。但在复苏期,o-3PLFA给药 组的大鼠的MAP

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