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1、第一章 绪论复习题1. 从广义和狭义上给出分子生物学的定义。广义：研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能，并从分子水平上阐述这些大分子之间相互作用的关系及其基因表达调控机制的科学。狭义：偏重于核酸的分子生物学范畴，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等的分子过程，其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构和功能的研究。2. 分子生物学研究的主要内容有哪几个方面?1、基因与基因组的结构与功能 2、DNA的复制、转录和翻译 3、基因表达调控的研究4、DNA重组技术 5、结构分子生物学 3. 简述什么是反向生物学？什么是后基因组时代？反向生物学：直接从克隆目的基因出发，研究基
2、因的功能及其与表型的关系的科学。后基因组时代：主要任务是研究细胞内全部基因的表达图式和全部蛋白质图式，或者说是“从基因组到蛋白质组”。4. 分子生物学、基因工程、DNA重组技术有什么区别？分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能，并从分子水平上阐述这些大分子之间相互作用的关系及其基因表达调控机制的科学。基因工程并不等同于DNA重组技术，基因工程还包括其他能使生物细胞基因组结构发生改变的体系。而DNA重组技术是分子生物学的研究内容之一。5. 写出 3个分子生物学发展史中的大事件 (发明年代、发明者、简要内容)。21世纪分子生物学的发展趋势将是怎样的？1928年，Griffith做的肺
3、炎双球菌的转化实验：以R型和S型菌株作为实验材料进行遗传物质的实验，他将活的、无毒的R型（无荚膜，菌落粗糙型）肺炎双球菌或加热杀死的有毒的S型肺炎双球菌注入小白鼠体内，结果小白鼠安然无恙；将活的、有毒的S型（有荚膜，菌落光滑型）肺炎双球菌或将大量经加热杀死的有毒的S型肺炎双球菌和少量无毒、活的R型肺炎双球菌混合后分别注射到小白鼠体 内，结果小白鼠患病死亡，并从小白鼠体内分离出活的S型菌。1952年，Hershey和Chase先用32P标记噬菌体的DNA，用35S标记噬菌体的蛋白质，使噬菌体吸附在大肠杆菌上，然后用组织捣碎器将二者分开，这时发现几乎全部35S的放射性都可以从细胞上拉下来，而大部分
4、32P则被注入到细胞内，噬菌体在细胞内照样正常地进行增殖。至于进入细胞内的少量35S，在后代噬菌体中几乎没有出现，相反一半以上的32P出现在后代噬菌体的DNA中。明确了噬菌体的DNA将新的信息带进细胞，这些信息规定了噬菌体在细胞内进行增殖所必需的一切条件，从而产生与亲代噬菌体遗传性完全一样的子代噬菌体。1953年，沃森和克里克发现了DNA双螺旋的结构，开启了分子生物学时代，使遗传的研究深入到分子层次，“生命之谜”被打开，人们清楚地了解遗传信息的构成和传递的途径。21世纪分子生物学的发展趋势：研究细胞内全部基因的表达图式和全部蛋白质图式，即后基因组。6. 解释下列名词：结构分子生物学、生物信息学
5、、DNA重组技术、功能基因组学、蛋白质组学、功能蛋白质组学、反向生物学、后基因组时代、基因表达调控结构分子生物学：研究生物学大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。生物信息学:对浩如烟海的DNA和蛋白质分子中各种类型的信息进行识别、存储、分析、比对、注释、模拟和传播是生物学的主要内容，它由各类数据库、计算机网络和应用软件三大部分组成。DNA重组技术：将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。功能基因组学：对成千上万的基因表达进行分析比较，从基因组整体水平上阐述其活动规律的科学。蛋白质组学：
6、是以蛋白质组为研究对象，研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。功能蛋白质组学：研究定位在细胞内与某种功能有关或在某种环境条件下的一群或一套蛋白质的科学。反向生物学：直接从克隆目的基因出发，研究基因的功能及其与表型的关系的科学。后基因组时代：主要任务是研究细胞内全部基因的表达图式和全部蛋白质图式，或者说是“从基因组到蛋白质组”。基因表达调控：基因表达的实质是遗传信息的转录和翻译，基因表达的调控主要在转录水平和翻译水平上发生。原核生物主要发生在转录水平，真核生物主要发生在各种不同的水平，主要表现在对上游调控序列、信号转导、转录因子及RNA剪接等多个方面。第二章 核酸的结构与功能复习题1. 研
7、究DNA的一级结构有什么重要生物学意义? DNA的一级结构即使指DNA分子中的核苷酸排列顺序。DNA的碱基顺序本身就是遗传信息存储的分子形式。生物界物种的多样性即寓于DNA分子中四种核苷酸千变万化的不同排列组合之中。2. 检测核酸变性的定性和定量方法是什么？具体参数如何？紫外吸收光谱的变化是检测变性最简单的定性和定量方法。核酸在260 nm具有特征的吸收峰，表示为A260nm,吸收紫外光的量取决于核酸分子的结构。结构越有序，吸收的光越少。因此，可用紫外吸收值的大小来测定DNA的含量；3. 影响DNA复性速度的因素包括哪些？ DNA分子组成。简单分子，如多聚dC-多聚dG变性后，彼此容易发现互补
8、链，因此很快就会复性。 同一种DNA分子，浓度越高，互补链碰撞机会越多，复性速度越快。 DNA片段大小。较大的线状单链分子，由于分子扩散受到妨碍，减少了发现互补链的机会。因此，在复性研究时，一般要将其剪切成400bp大小的片段，以增加复性速度。 温度的影响，复性速度与温度直接有关。 阳离子浓度，小于0.5mol/L浓度时增加盐浓度有利于复性。4. DNA复性实验的标准条件是什么？复性程度怎样检测？标准条件：一定的离子强度。 DNA复性以后，双螺旋结构的各种性质可以得到恢复。DNA的复性需一定的离子强度，用以削弱两条链中磷酸基团之间的排斥力，通常使用0.150.50mol/L NaCl。较高的温
9、度。用以避免随机形成的无效氢键。一般认为比Tm低25左右的温度是复性的最佳条件（55-60度）。复性程度的检测 : 减色效应，在复性过程中可跟踪测定A260nm的光吸收值；S1核酸酶只催化单链DNA的水解，不能作用于双链DNA，因此将样品限定水解后测定抗S1核酸酶水解的双链DNA量。羟基磷灰石层析，羟基磷灰石是一种磷酸钙盐，经过一定的处理后，具有吸附双链DNA的能力，洗脱时，只允许单链通过，从而可以计算出剩余双链DNA的量。5. 核酸的分子杂交一般有几种类型？它们分别用于检测那些物质？溶液杂交：将不同来源的DNA变性后，在溶液里进行杂交。滤膜杂交：用硝酸纤维素制成的滤膜, 可以吸附单链DNA或
10、RNA,将变性DNA或RNA吸附到滤膜上，再进行杂交。可分Northern印迹法、Southern印迹法和Western印迹法。6. 解释下列名词：核小体、Southern、Northern 、Western、Cot曲线、分子杂交、microRNA、snoRNA、非编码mRNA、ORF、nRNA、hnRNA、snRNA、scRNA、tmRNA、nRNA、B-DNA、Z-DNA。核小体：构成真核生物染色质的基本结构单位。Southern：Southern 印迹法，DNA片段经电泳分离后，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜或尼龙膜上，然后与探针杂交，被检对象为DNA，探针为DNA或RNA。Norther
11、n：Northern印迹法，RNA片段经电泳分离后，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜或尼龙膜上，然后与探针杂交，被检对象为RNA ，探针为DNA或RNA，是用于鉴定RNA的杂交技术。Western：Western印迹法，是一种专门针对蛋白质的一种特异性鉴定技术，以一级抗体和与酶偶联的二级抗体为探针。Cot曲线：DNA的复性曲线，以Cot值为横坐标，双链DNA的百分数为纵坐标所绘制的曲线，Cot1/2=1/K2X,K2可以反应DNA序列的复杂性，DNA序列越复杂，K2越小，复性速度越慢。分子杂交：双螺旋结构的各种性质在DNA复性后可得到恢复，利用这一特性科将两个来源不同的互补序列退火形成双链，这个过
12、程成为分子杂交。microRNA：是植物和动物细胞中自然产生的一类长度为18-25bp的小分子RNA。snoRNA：是一种能与蛋白质结合成核仁小核糖核蛋白，作为rRNA前体加工复合体的重要成分，参与rRNA前提的加工的RNA。非编码mRNA：是能够进行剪接和3端加尾修饰，但是不具有开放阅读框的RNA。ORF：指一条核苷酸能以3种可能的形式之一读出，每个可读框序列分成一系列的三联体，依照序列的不同，任何序列都有3种可能的可读框。可读框一般是不含转录终止子的读码框。nRNA：细胞核内RNA的统称，包括核内mRNA、tRNA和rRNA初始转录混合物核内小分子RNAhnRNA：mRNA的前体是蛋白质编
13、码基因的初始转录产物，统称核不均一RNA，即hnRNA。snRNA：独立的RNA小分子，一般70-300nt，主要参与mRNA 前体（hnRNA）和rRNA前体的加工。scRNA：约有100到300个碱基，每个细胞中可含有105-106个这种RNA分子。它们是由RNA聚合酶或所合成的，其中某些像mRNA一样可被加帽。是细胞质中的一类RNA。tmRNA：存在于各种细菌及细胞器（线粒体、叶绿体等）中，长度在260-430bp的稳定小分子RNA，是mRNA和tRNA的杂合体。nRNA：细胞核内RNA的统称，包括核内mRNA、tRNA和rRNA初始转录混合物核内小分子RNAB-DNA：DNA由两条反向
14、平行的脱氧多核苷酸（两条链的走向为53和35），围绕一中心轴（假想轴）构成右手双螺旋结构。Z-DNA: 是左手双螺旋，又叫Z-DNA。 Z-DNA中大沟消失，小沟狭而深，使调控蛋白识别方式也发生变化。做人最好状态是懂得尊重，不管他人闲事，不晒自己优越，也不秀恩爱。你越成长越懂得内敛自持，这世界并非你一人存在。做人静默，不说人坏话，做好自己即可。不求深刻，只求简单。你活着不是只为讨他人喜欢，也不是为了炫耀你拥有的，没人在乎，更多人在看笑话。你变得优秀，你身边的环境也会优化。3. 从今天开始，帮自己一个忙，不再承受身外的目光，不必在意他人的评价，为自己活着。从今天开始，帮自己一个忙，做喜欢的事情，
15、爱最亲近的人，想笑就大笑，想哭就痛哭，不再束缚情感的空间，让自己活得轻松些。4. 很多你觉得天大的事情，当你急切地向别人倾诉时，在别人眼中也是个小事，他最多不痛不痒呵呵地应和着。因为他不是你，他无法感知你那种激烈的情绪。直到有一天，你觉得无需再向别人提起，你就已经挽救了你自己。这世界上除了你自己，没谁可以真正帮到你。5, 我们总是带着面具走进爱情的，总想展示自己最优越的一面，你要接受一个人，不只是接受他的优越，而是看清了他的平凡普通却仍然去深爱。事实经常是：我们走着走着，就感觉对方变了，其实我们并没有变，我们只是走进对方最真实的地方，然后迷失了自己。6. 我捧你，你就是杯子，我放手，你就是玻璃渣子。无论是恋人还是朋友，珍惜在你每一次难过、伤心时都陪伴在你身边的人。珍惜经常和你开玩笑的人，说明你在这个人的心中肯定有一定的分量。 珍惜在你心情不好时第一个发现的人。7. 今天再大的事，到了明天就是小事；今年再大的事，到了明年就是故事；今生再大的事，到了来世就是传说。人生如行路，一路艰辛，一路风景。你目光所及，就是你的人生境界。总是看到比自己优秀的人，说明你正在走上坡路；总是看到不如自己的人，说明你正在走下坡路。与其埋怨，不如思变。8. 归零是一种积极的心态。
