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1、 实验动物学实验报告学 院：学 号： 姓 名时 间：实验一：小鼠实验一、实验目的1、掌握小鼠抓取、固定的根本方法；2、掌握小鼠的雌雄鉴别方法；3、掌握小鼠的标记方法；4、掌握小鼠的根本采血技术；5、掌握小鼠的常用给药方法；6、掌握小鼠的解剖方法，熟悉部脏器的自然位置；二、实验材料1、实验动物：每组两只雌鼠，两只雄鼠；2、实验器械与试剂：鼠笼；小鼠固定器和小鼠固定板；眼科剪；眼科镊；解剖刀；1ml注射器；毛细玻璃管；灌胃针；苦味酸染料；葡萄糖液；2%水合氯醛；三、实验容与方法1、小鼠的抓取和固定 抓取时先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠笼或实验台向后拉，在其向前爬行时，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和
2、颈部皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，以无名指按住鼠尾，小指按住后腿即可。这种在手中固定方式，能进展实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以与其他实验操作。2、小鼠的雌雄鉴别 雄鼠的阴囊明显，雄鼠可见阴道开口和五对乳头。幼鼠或仔鼠那么主要从外生殖器与肛门的距离判定，近者为雌，远者为雄。另外，雌鼠肛门和生殖器之间有一无毛小沟，而雄鼠那么在肛门和生殖器之间长毛。3、小鼠的标记方法 1耳孔法 用耳号钳在耳上打洞或者用剪刀在耳边缘剪缺口，左耳为十位，右耳为个位。 2剪趾法 适用于出生一周以新生仔鼠； 3染色法用毛笔将苦味酸涂在动物的不同部位，注意逆着毛发生长方向刷。4、小鼠的根本采血 1剪尾采血 当
3、所需血量很少时采用本法。固定动物并历出鼠尾，将鼠尾在45温水中浸泡数分钟，也可用酒精棉球涂擦，使局新血管扩。将鼠尾擦干，再用刀片剪去1-2mm，让血液滴入盛器或直接用移液器吸取，同时自尾根部向尾尖按摩。取血后，先用棉球压迫止血并立即用6液体火棉胶涂于尾巴伤口处，使伤口外结一层火棉胶薄膜，保护伤口。也可采用切割尾静脉的方法采血，三根尾势脉可交替切割，并自尾尖向尾根方向切割，每次可取0.20.3ml血，切割后用棉球压迫止血。这种采血方法在大鼠进展较好，可以较长的间隔时间连续取血，进展血常规检查。 2眼眶后静脉丛取血 当需中等量的血液，而又需防止动物死亡时采用此法。用左手固定鼠，尽量捏紧头部皮肤，使
4、头固定，并轻轻向下压迫颈部两侧，引起头部静脉血液回流困难，使眼球充分外突示眼眶后静脉丛充血，右手持毛细玻璃管，沿眦眼眶后壁向喉头方向旋转刺入。刺入深度小鼠23mm。当感到有阻力时再稍后退，保持水平位，稍加吸引，由于血压的关系，血液即流人玻璃管中。得到所需的血量后，拨出毛细管。假设手法恰当，小鼠约可采血0.20.3ml。 3心脏取血 动物仰卧固定在固定板上，剪去心前区部位的被毛，用碘酒酒精消毒皮肤。在左侧第34肋间，用左手食指摸到心搏处，右手取连有45号针头的注射器，选择心搏最强处穿刺，当针刺入心脏时，血液由于心脏跳动的力量自动进人注射器。此法要验者掌握以下要点：要迅速而直接插入心脏，否那么，心
5、脏将从针尖处滑脱；如第一次没刺准，将针头抽出重刺，不要在心脏周围乱探，以免损伤心、肺；要缓慢而稳定的抽吸，否那么，太多的真空反而使心脏塌陷。假设不需保存动物生命时，也可麻醉后切开动物胸部，将注射器直接刺人心脏抽吸血液。5、小鼠的常用给药方法1经口给药：小鼠灌胃左手抓住鼠背部与颈部皮肤将动物固定，右手持灌胃针，将灌胃针插入动物口中，沿咽后壁徐徐插入食道。动物应固定成垂直体位，针插入时应无阻力。假设感到阻力或动物挣扎时，应立即停止进针或将针拔出，以兔损伤或穿破食道以与误入气管。一般当灌胃针插入小鼠34cm，常用的灌胃量小鼠为0.21ml；2皮下注射给药 皮下注射给药部位以颈部三角区最正确。操作时，
6、常规消毒注射部位皮肤，然后将皮肤提起，注射针头取一钝角角度刺入皮下，把针头轻轻向左右摆动，易摆动那么表示已刺入皮下，再轻轻抽吸，如无回血，可缓慢地将药物注入皮下。拔针时左手拇、食指捏住进针部位片刻，以防止药物外漏。3肌肉注射给药4腹腔注射给药左左手提起并固定小鼠，使鼠腹部朝上，鼠头略低于尾部，右手持注射器将针头在下腹部靠近腹白线的两恻进展穿刺，针头刺入皮肤后进针3nm左右，接着使 注射针头与皮肤呈45角刺入腹肌，穿过腹肌进入腹膜腔，当针尖穿过腹肌进入腹膜腔后抵抗感消失。固定针头，保持针尖不动，回抽针栓，如无回血、肠液和尿液后即可注射药液。5尾静脉注射给药鼠尾静脉有两根，左右两侧各一根。操作时先
7、将动物固定在鼠筒或扣在烧杯中，使尾巴露出，尾部用4550的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血管扩，并可使表皮角质软化，以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧，使静脉充盈，用中指从下面托起尾巴，以无名指和小指夹住尾巴的末梢，右手持注射器，使针头与静脉平行小于30，从尾下四分之一处约距尾尖2-3厘米处进针，此处皮薄易于刺入，先缓注少量药液，如无阻力，表示针头已进入静脉，可继续注入。注射完毕后把 尾部向注射侧弯曲以止血。如需反复注射，应尽可能从末端开场，以后向尾根部方向移动注射。动进入注射器。6、小鼠的解剖将小鼠放在解剖盘上，用大头针将四肢固定在解剖盘上。用酒精棉球将小鼠腹部的皮肤消毒。用手术剪沿腹中线将小鼠的腹
8、部和胸部的皮肤剪开，然后用手术剪将腹腔和胸腔剪开，仔细观察小鼠腹腔和胸腔的各脏器官。部脏器观察1肺：分左右两叶，右肺分为四叶，左肺为一整叶。2心脏：呈圆锥状，位于近胸骨端，心尖位于第四肋间。3肝：附于隔上，呈暗褐色，分5叶。4胃：分贲门、幽门、胃底与胃体。5肠：分小肠和大肠。小肠包括回肠、空肠和十二指肠。6脾：脾斜卧在胃的左侧，呈暗红色，长条扁平状。7胰：在十二指肠附近，呈粉红色。8肾：右肾比左肾位置稍高 ，肾脏前方有肾上腺，每肾侧各有一根输尿管，开口于膀胱背侧。9卵巢和子宫：卵巢形似绿豆状，粉红色，左右各一，位于肾脏下方。小鼠为双角子宫，为Y字形。10睾丸：小鼠睾丸有一对，幼年时睾丸位于腹腔
9、，性成熟后那么下降至阴囊。实验二：大鼠实验一、实验目的1、掌握大鼠抓取、固定的根本方法；2、掌握大鼠的雌雄鉴别方法；3、掌握大鼠的标记方法；4、掌握大鼠的根本采血技术尾静脉采血、心脏釆血、腹主动脉采血；5、掌握大鼠的常用给药方法灌胃、腹腔注射、尾静脉注射、皮下注射、皮注射、麻醉；6、掌握大鼠的解剖方法，熟悉部脏器的自然位置；二、实验材料1、实验动物：每组SD大鼠2只1雌1雄；2、实验器械与试剂：鼠笼、大鼠固定器、大鼠固定板、1ml注射器、5ml注射器、眼科剪、弯头镊、灌胃针、10%水合氯醛、生理盐水；三、实验容与步骤1. 抓取和固定 右手从鼠笼将大鼠尾巴上段抓住并提起，放在鼠笼上部。轻轻向后拉
10、鼠尾，大鼠向前挣脱时，用左手拇指和食指抓住两耳后和劲部大局部皮肤。其余手指与掌心夹住背部和尾部，将大鼠尾巴钩绕于小指上，将尾巴固定。注意不要用力过大使大鼠窒息死亡。2. 性别鉴定 成年雄鼠的睾丸沉降至阴囊中，故其阴囊明显，成年雌鼠可见阴道开口和乳头，幼鼠或仔鼠那么主要从外生殖器与肛门的距离判定，雄性：距离长，毛发密和其他部位一样，雌性：距离短，毛发稀疏。3. 给药1灌胃: 将注射器装入药物溶液，装上灌胃针。抓取固定大鼠后，使大鼠头部朝上，从大鼠口角一侧进针，沿咽后壁缓缓插入食道。假设感到巨大阻力或动物挣扎时，应立即停止进针或将针拔出，以免损伤或穿破食道以与误入气管。一般当灌胃针插入大鼠45cm
11、，常用的灌胃量大鼠为0.51ml；假设药物灌入肺中，大鼠死亡。 2腹腔注射：左手固定大鼠后，右手持针，45度沿腹白线两侧进针，刺入腹肌，穿过腹肌进入腹膜腔，当针尖穿过腹肌进入腹膜腔后有落空感。针头刺入皮肤后进针3nm左右，将注射针头朝上，减少与皮肤间的倾斜角度，继续进针。固定针头，保持针尖不动，回抽针栓，如无回血、肠液和尿液后即可注射药液。3尾静脉注射：鼠尾静脉有两根，左右两侧各一根。操作时先将动物固定在鼠筒，使其尾巴露出，尾部用4550的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血管扩，并可使表皮角质软化，以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧，使静脉充盈，用中指从下面托起尾巴，以无名指和小指夹住尾巴的末梢，右手持
12、注射器，使针头与静脉平行小于30，从尾上三分之一处进针，此处皮薄易于刺入，回抽出血液后，表示针头已进入静脉，可缓慢将药物注入小鼠尾静脉中。注射完毕后用干棉球压迫尾部向注射以止血。如需反复注射，应尽可能从末端开场，以后向尾根部方向移动注射。切勿从后3/1处注射，此处大鼠易发生断尾现象。4皮下注射：将大鼠以俯卧位固定，将腹部皮肤去毛后，左手拇指和食指捏住腹部皮肤，右手持针沿纵轴方向刺入皮下，进针时感觉有阻力，继续刺入后突然阻力消失，判断针头可活动后注射入药液。注射成功后可见一个小丘状隆起，经过段时间后注射入的药物可被吸收。5皮注射：小鼠以俯卧位固定，将腹部皮肤去毛后，左手拇指和食指捏住腹部皮肤，右
13、手持针沿皮肤平行方向刺入捏住的皮肤，注射药液。假设感觉注射时有阻力，注射部位局部形成光亮泛白的皮丘即为注射成功。为防止药液流出，停留片刻后将针头拔出，用干棉球按压针孔。4. 麻醉： 抓取固定大鼠后，通过腹腔注射的方式按10%水合氯醛2ml/kg的用量将适量的麻醉剂注射如大鼠体，等待几分钟后观察大鼠反响。假设大鼠行动缓慢或几乎不动为麻醉成功。假设注射过量麻醉剂会造成大鼠死亡。5. 釆血1尾静脉采血先将大鼠固定在鼠筒，使其尾巴露出，尾部用4550的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血管扩，并可使表皮角质软化，以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧，使静脉充盈，用中指从下面托起尾巴，以无名指和小指夹住尾巴的末梢，右
14、手持注射器，使针头与静脉平行小于30，从尾上三分之一处进针，此处皮薄易于刺入，回抽出血液后继续采集血液，每次0.1ml。2心脏釆血：将麻醉后的小鼠以仰卧位放置，用指腹触摸观察确定小鼠心脏的位置为搏动为剧烈处。右手持注射器，左手在左侧固定心脏，针头紧贴剑突下以30度角向前刺入2.5cm左右，边进针边回抽针管，可见血液借心脏搏动的力量进入注射器。此时固定针管与心脏的位置，继续采血。采血完成后拔出针头，用干棉球按压住针头的位置。每次采血量可达23ml。3腹主动脉采血：将大鼠麻醉固定后，用手术剪沿腹正中线剪开腹腔，将腹主动脉充分暴露后腹主动脉与腹主静脉伴行，紧贴脊柱，右手持注射器，针尖斜面朝下，入针角
15、度约2530度，朝向心端方向刺入，深度以5mm左右为宜，抽吸血液，假设观察到针管中血液为鲜红色即为进针成功，继续采血。一般体重200300g大鼠可采集血液810ml，采样过程迅速。6. 大鼠解剖；将大鼠麻醉后放至在解大鼠固定板上，仰位放置，充分暴露颈部、胸部和腹部。用酒精棉球将小鼠腹部的皮肤消毒。用手术剪沿腹中线将小鼠的腹部和胸部的皮肤剪开，然后用手术剪将腹腔和胸腔剪开，仔细观察小鼠腹腔和胸腔的各脏器官。部脏器观察：1肺：分左右两叶，右肺分为四叶，左肺为一整叶。2心脏：呈圆锥状，位于近胸骨端，心尖位于第六肋间。乳白色胸腺附于主动脉弓前部。3肝：紧邻隔下，呈暗褐色，分7叶，无胆囊。4胃：分贲门、幽门、胃底与胃体。5肠：分小肠和大肠。小肠包括回肠、空肠和十二指肠。6脾：脾斜卧在胃的左侧，呈深红色，长条扁平状。7胰：在十二指肠附近，不规那么状且呈粉红
