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1、检验程序确认和验证（2）测量区间定义 measuring interval 又称工作区间working interval在规定条件下，由具有一定测量不确定度的测量仪器或系统能测出的一组同类量的量值（VIM）。-注1：在某些领域，也称“测量范围”。-注2：测量区间下限不应与“检出限”相混淆。线性、线性范围定义线性：linearity指待测标本中能直接按比例关系给出分析物浓度结果的能力。注1：线性代表整个测量系统的反应。注2： 个测量系统的线性由不同已知浓度的分析物测定得到。 线性范围：linear range指测量系统所能覆盖的可接受线性范围，非线性误差小于设定标准。分析测量范围定义 analy
2、tical measurement range患者标本未经任何处理（稀释、浓缩或其他预处理）, 由测量系统直接测得的可靠结果范围，在此范围内，一 系列不同标本分析物测量值与实际浓度呈线性关系。临床可报告范围定义clinical reportable range指定恒是定量检测项目向临床能报告检测范围，患者标本 可经稀释、浓缩或其他预处理。区别线性评价-CLSI文件 EP6-A , Evaluation of the Linearity ofQuantitative Measurementprocedures, 2003 EP10-A3, Preliminary Evaluation of Qu
3、antitativeClinical Laboratory Measurement Procedures, 2006EP6-A方案和要求1. 设备熟悉阶段-检验人员应熟悉检测系统的操作、正确的质控和校 准、恰当的标本制备。2. 线性评估实验-实验室验证厂商声明：57个浓度*重复2次。-厂商建立新方法：911个浓度*重复24次。-实验室改良已建立的方法：79个浓度*重复23 次。-时间：最好一天内完成。EP6-A方案和要求样品准备：可接受的基质1. 病人混合标本：1份标本的分析物浓度应接近可报告 范围上限，另1份标本的分析物浓度应接近检出限。2. 用推荐稀释液稀释病人混合标本：标本中分析物浓度
4、应为高浓度，稀释液应按厂商推荐。3. 病人混合标本添加分析物：若没有干扰的话，含分析 物的添加物无需高纯物质。4. 病人混合标本用低浓度经处理的材料稀释或经处理 的混合材料稀释。5. 商品质控品/校准品/线性材料。6. 病人混合标本用生理盐水或其他稀释液稀释。7. 不稀释或过度稀释的商品质控品。8. 水溶液。EP6-A方案和要求-实验要求-测量顺序：应随机。如存在明显携带污染或漂移，选 择对后续标本影响最小的顺序进行。-分析范围：应接近或等于最低和最高厂商声明的性能 范围。2.离群值检查-单个测定结果明显偏离其他检查结果;-单个离群值可删除，不用增加数据；-提示存在非线性或系统误差。3. 确定
5、分析测量范围-作一元一次（直线）、二次（抛物线）或三次（S形）EP6-A方案和要求多项回归分析。-样品制备：足量混合血清。阶别-回归方程自由度-X1：低值混合血清。一次Y=b0+b1X2-X2： 3 份 X1+1 份 X5。. - 二次Y=b0+b1X+b2X23-X3： 2 份 X1+ 2 份 X5。三次Y=b0+b1X+b2X2+b3X34-X4： 1 份 X1+3 份 X5。-X5 :高值混合血清。-更多水平：X4+X1、X3+X2、X2+X3、X1+X4。EP6-A方案和要求-数据处理和分析：-一元一次：直线，是判断某种方法是否为线性的最适 方程。-一元二次：抛物线，有增加趋势或减少趋
6、势。-一元三次：S形，呈非线性，b2和b3做t检验证明 非线性。1. 初步数据检查-有无极端明显差异或错误;-X-Y图上有无离群值；最适多项回归模型在处取俏 如截距；原斜率；寻X的取值4.非线性程度：计算线性偏差（DL）。于偏移目标或测量误差。-每组数据有无漂移或趋势性变化。-用户定义线性程度要求或非线性允许误差范围，取决分辨力。验证：临床可报告范围5.考虑随机误差-是否因随机变异导致非线性，用方差来估计，即sr。Examples： IgMDilutionReplicate SIReplicate S2MeanJiffe renteDz/2枷iff126.526.226. 350. 30.05
7、L 1390. 648213913813S. 501.00. 500.7220. 261326927327 LOO4.08.00L4761.0894337343340.1X10,018.001.7651.5575可报告范围下限：5=测量系统的灵敏度定义 sensitivity of a measuring system简称灵敏度sensitivity测量系统的示值变化除以相应被测量的量值变化所得的商。注1：测量系统的灵敏度可能与被测量的量值有关。注2：所考虑的被测量值的变化必须大于测量系统的1094044M. 505,012.501.2300. 756OrderCoef. SymbolCoef
8、ficientValueCoefficient SEt-testDefrcss freedomStd Error 1iliFirstb0-52.0716.923 1bl96. 185.10is. a8bO-129.4715. 628. 3ISecondbl162.5211.9113.6710.3|b2-11.061.&55,7bQ-97.4835. 88-2. 7Thirdbl117.5846.912 5b26.0817.410. 3610a 3b3-1.901.92-1ActualPredictedPredictedDtrferenee% DifferenceMeanFirst orderS
9、econd Order26.4Id. 122.0-22. 1-50. 11138.5140.3151. 31L07.8427 LO236.5258.622. I9.34340.0332.7343.711.03.31406.5428.8406.722. 1-H. 15线性评价：Westgard混合物记录均值123X1 (0%)6666X2 (25%)138138138138X3(50%)278277279278X4(75%)410411411411X5(100%)545546543545混合物 均值（Y） 理论值（X） 偏倚 误差X160 (X3 均值 X0)+6N/AX2138139 (X3
10、均值 X)-1%X3278278 (X3 均值)00X4411417 (X3 均值 X)-6%X5545556 (X3 均值 X)-11%实验方法：尚无公认方法。-实验结果与分析-计算回收率：回收率二（实测值/预期值）*100%-按厂商说明书要求判断结果。举例（最高）稀释倍数一预期值一回收率1:101:201:1001:200可报告范围上限：20*=133778举例（最 稀策实测值一率1:101:401:501:1001:200检出限定义 detection limit, limit of detection在给定测量程序获得的测得值，其声称的物质成分 不存在的误判概率为B,声称物质成分存在的
11、误判概率 为a。注1：国际理论和应用化学联合会（IUPAC）推荐a 和B的默认值为。注2：有时使用缩写词LOD。注3：不要用术语“灵敏度”表示“检出限”定量检测限定义limit of quantitation, LoQ在规定可接受精密度和正确度条件下，能定量测出 标本中分析物的最小量。也称为确定低限、检测范围的低限。空白限定义 limit of blank, LoB-在规定可能条件下，空白标本被观察到的最大检测 结果。-注：LoB不是实际检测到的浓度，是在实际浓度处 的阳性信号，同样，LoB是在规定可能条件下，含有分 析物等于LoD水平样品的预期最低值。是检测下限、 最小可检测浓度。概率分布曲
12、线检出限评价-CLSI文件 EP17-A， Protocols for Determinationof Limits of 确认：EP17-A方案和要求检测限（LoD ）确认方案-对某一检验项目，用空白标本和非常低浓度系列标本 进行多次重复检测，得到各自结果。-空白标本的检测结果：用于确定某个响应量的临界 点，高于该临界点的值被认为含有分析物，即为阳性结 果。-该临界点结合低浓度标本的标准差：用于确定可能的 超过预期最高空白值的分析物浓度。EP17-A方案和要求-空白限（LoB）：在规定水平I类错误和II类错误。无效侃设不成守 本来自”=山的怠体）小拒乞为专本束白=1/点体 柜寺h。,认为畔本
13、不宏自丫 的e体m（雁饵）a = B=5%空白限（LoB）方法：-空白值呈正态分布，空白限：LoB=B+aB七：空白检测均值；气：空白检测标准差。-空白值呈非正态分布，空白限：估计 95%位数：Px = Nb（95/100）+,LoB=PctB100- a如: p=95, Nb=60, Px=, LoB=（X7+X ） /2Detection and Limits ofQuantitation, 2004检出限（LoD）方法:举例-一种为实际标本等于LoB； -一种为实际标本浓度检测结果估计5%位点等于LoB。LoD=LoB+a =+*=LoD =B+aB+a 匕：低浓度标本检测均值;。疽低浓度标本检测标准差。 LoQ测定步骤:空白限&检出限确认LoDWET1Q0 1EDg时麟样本10 070.01216.9样本20.060.01122.7样本30.0113.4样本40.070.009|11.9样本5。,睥0.00514-3
